Способ качественного определения смеси желчных кислот и их комплексов с таурином и глицерином Советский патент 1974 года по МПК G01N31/08 

1-:.---,

Изобретение касается аналитической химии желчных кислот и относится к способам качественного анализа их смесей.

Известен способ качественного анализа смесей желчных кислот и их комплексов с глицином и таурином путем хроматизирования на бумаге анализируемой пробы с последующим проявлением хроматограмм и идентификацией компонентов смеси по величинам. Полный анализ смеси .кислот требует применения нескольких систем ПОДВИЖНЫХ растворителей, например холеная, дезоклихолевая и гиодезоксихолевая кислоты и их комплексы хроматографируются в системе дихлорэтан гептан (60:40- 70:30), тауриновые производные хроматографируются в системе дихлорэтанбутанол (85:5) и т. д.

Полное время анализа до 48 часов. Таким образом, известный способ характеризуется длительпостыо анализа и его сложностью изза необходимости применения нескольких систем подвижных растворителей.

Цель предлагаемого способа - ускорить и упростить анализ смеси желчных кислот и их комплексов с таурином и глицином.

Это достигается тем, что в качестве растворителей используют смесь ледяная уксусная кислота - муравьиная кислота - гептан-.

Кроме того, указанную смесь растворителей рекомендуется использовать в следующих объемных соотнощениях: толуол - 3-4 об. части, ледяная уксусная кислота - 2,3-3,5 об. части, 85%-пая муравьиная кислота - 0,3-0,5 об. части и гептан - 2,3-3,2 об. части.

Пример. На хроматографическую бумагу наносят очищенную от липидов жирных кислот, белков и желчных пигментов анализируемую желчь.

Очистку образца желчи проводят таким образом, что на хроматографическую бумагу, предварительно обработанную хлористым барием и высушенную, наносят исследуемую пробу, высушивают и последовательно обрабатывают бумагу с нанесенной пробой диэтиловым эфиром и этиловым спиртом.

Желчь разводят вдвое 0,02 н. раствором гидроокиси натрия и 0,06-0,03 мл наносят на центр хроматографической бумаги размером 30X40 мм, одна из коротких сторон которой срезана в виде заостренного клина, высущивают и бумажку вставляют в аппарат для экстракции, состоящий из приемника (стеклянная пробирка размером 15-20 ммХ150 мм), воздушного холодильника (стеклянная трубочка размером 10-13 ммХ500 мм) и соединенных между собой при помощи шлифа. Бумажку с пробой сворачивают в форме цилиндра и на 1/5 ее длины и вставляют заостренным концом наружу в шлиф воздушного холодильника. В приемник наливают 2-2,5 мл диэтилового