Способ разделения высокомолекулярных веществ-амфолитов Советский патент 1974 года по МПК A61K38/42 C07K1/28 A61K38/00 

Изобретение относится к медицинской и биологической химии, в частности к выделению белков. Известен способ разделения высокомолекулярных веществ - амфолитов путем их изоэлектрического фокусирования в градиенте рН, образованного носителями амфолитов, например низкомолекулярными полиаминополикарбоновыми кислотами в постоянном электрическом поле, и отделения полученных фракций. Однако известный способ является трудоемким. Цель изобретения - упрощение способа и сохранение стабильности разделяемых веществ. Это достигается тем, что разделение осуществляют путем внесения амфолитов в буферный раствор с заданным градиентом рН, создаваемым различными концентрациями органического растворителя, например глицерина. Способ разделения высокомолекулярных веществ - амфолитов производят следующим образом. Методом электрофокусирования в амфолитах определяют изоэлектрические точки фракций бычьего гемоглобина. Они имеют следующие значения: 7,2; 7,27; 7,32; 7,44; 7,47 и 7,65 единицы рН. В качестве буферного раствора выбирают борно-боратный буфер с рН 8,6 (0,001 М). В качестве органического раствоителя применяют глицерин. Используя граик зависимости рН исходного буферного расвора от концентрации глицерина, находят концентрации глицерина для создания зон рН, необходимых для электрофокусирования фракций гемоглобина. Концентрации глицерина, необходимые для создания соответствующих зон рН в исходном буферном растворе, следующие: рНКонцентрация глицерина, в % 1,5 2,0 2,5 2,75 3,0 3,5 Предмет изобретения Способ разделения высокомолекулярных веществ - амфолитов путем их изоэлектрофокусирования в градиенте рН и отбора полученных фракций, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и сохранения стабильности разделяемых веществ, разделение осуществляют путем внесения амфолитов в буферный раствор с заданным градиентом рН, создаваемым различными концентрациями органического растворителя, например глицерина.