Штамм 313-152 - продуцент уратоксидазы Советский патент 1977 года по МПК C12D13/10 

I

Изобретение относится к области, .медици-iйы, а именно к получению ферментов.

Известно использова ше дрожжей Candida niltus, бактерий BacUEus foisidiosus и дру гих в качестве продуцента уратоксидазы.5

Однако известные штаммы обладают невысокой активностью.

Целью изобретения является использование штамма 313...-152 Ac-t. sp .

Штамм 313-152 AciitiOtnfces sp.- про- ю дуцент уратоксицазы. Хранится в коллекции культур Всесоюзного научно-иссдедователь- СКОРО института антибиотиков (Москва) , Мг 1510.

Для получения посевной культуры штамм 3i3-l52Acli-tiotrtvce8 sp- высевают на 15 скошенный агар, содержащий КН РО. ОД%, Mg-SO 0,О5;о, КСе 0,05%, FeSO % мг/мл, GriSOy 0,5 мг/мл, мочевую кислоту О,О259о, агар 2%, и вырашивают в течение 7 суток при 28 С. Исходный штамм хранят при 4 С iMi на скошенном агаре с овсяным отваром/

Культурально-морфопогическая характаристшсА.

На синтетической среде с глюкозой воз1дуигаый мицелий белесый, мучнистый, субст-25

ратный мицелий мраморно-розовьтй, растворимого пигмента не образует. При росте на среде Гаузе1№ 2 воздушный мицелий бледнорозовый, субстратный мицелий терракотовый, пигмента нет. На среде Гаузе N 2 воздушного мицелия нет, субстратньгй мицелий бистровый, пигмент гряано буро-фиолетовый. При росте на овсяной среде воздушный мицелий белый, субстратный мицелий темноко|эичневьгй, пигмент серо-темно-фиолетовый. На соевой среде воздушный мицелий белесый, развит скудно, субстратный мицелий бежевый, пигмента нет. При росте на гороховой среде воздушный мицелий белый, развит скудно, субстратный мицелий бежевый, пигмента нет. Спороносцы прямые, волнистые, споры овальные.

Физиолого-биохимические свойства..

Штамм гицролизует крахмал, желатину разжижает медленно. При росте на среде с желатиной выделяет красно-бурый пигмент. Молоко пептонизирует медленно, без предварительной | коагуляции. i Меланоидного пигмента не выделяет. В качестве единственньтх источников углерода использует глюкозу, маннит, ксилозу, рамноэу, не потребляет ияоэит, в качестве единственного источника азота и урперода может использовать мочевую кислоту, Уратоксидаза образуется индуктивно, т.е. только при Ьырашивании на средах с моювой кислотой. Фермен имеет внутриклеточную локализацию и в культураль кую среду не выделяется. Прнмейение штамма. Для полутения фермента посевную культуру переносят в колбы объемом 750 мл, содерлсащие;аО мл среды следующего состава: 0.1%. Mg-bO 0.5%, КСе 0.5Х FeSO 5 мг/мл. Си$0 0,5 мг/мл, мочевая кислота 0,3-1.О%. вода водотфоводная, рН 7.3. Культивирование актнкоминета ведут в течение 9-4 суток при на аппарате дл встряхивания. Дл5Г извлечения фермента разрушение кле ток проводят ультразвуком. При разрушении плотность бактериальной cycne:issm 0,5 г сырого веса в И мл 0,1 М боратного буфер рН 8,5. В экстракте клеток удельная активность фермента составляет О.1О-0,25 Е/мг белка (определенного по методу Лоури) или 0,4-0,8 Е/мл экстракта. Таким образом, в расчете на 1 г влажного веса биомассы приходится 8-12 Е, а на 1 т сухой биомассы 32-48 Е. Формула изобретен ия Штамм 313-152 Actinotnyces sp.-пройуцент уратоксидазы. Хранится в коллекции культур Всесоюзного научно-исследовательского института антибиотиков (Москва) J 1510. Морфологические признаки. Па синтетической среде с глюкозой воздушный мицелий белесый, субстратный мицелий мраморно-розовый, растворимого пигмента не образует. На среде Гаузе № 1 воздушный мицелий бледно-розовый, субстратный мицелий терракотовый, пигмента нет. На овсяной среде воздушный мицелий белый, субстратный мицелий темно-коричневый, пигмент серотемно-фиолетовый. На соевой среде воздушный мицелий белесый, развит очень скудно, субстратный мицелий бежевый, пигмента Hei На .гороховой среде воздушный мицелий белый, развит скудно, субстратный мицелий бежевый, пигмента нет. На среде Гаузе N 2 воздушного мицелия нет, cv6cTpaTHbiA мицелий бистровый, пигмент грязно-буро-фиолетовый. Спороносцы пр«1)ые. волнистые, споры овальные. Биохимические признаки. Штамм гилролизует крахмал, желатину разжижает медленно. При росте на среде с желатиной;выделяет красно-бурый пигмент. Молоко пептониаирует медленно без .коагуия.дик. Меланоианого пигмента не выделяет. Физиологические признаки. Штамм в качестве единственного источнд.ка углерода использует глюкозу, маннит, ксилозу, и рамнозу, инозит не употребляет. В качестве единственного источника азота может использовать мочевую кислоту. Растет также на среде с мочевой кислотой в качестве единственного источника и углерода и ааота.