зина в виде кристаллов, которые перекристаллизовывают из спирта. Выход 87,6%, т. пл. гидрохлорида 186- (с разлож.) Найдено, % : N 8,82. Вычислено, % : N 8,48. 3,655 г (0,01 моль) гидрохлорида растворяют в 66 мл смеси спирта с водой (1:1) и добавляют 3,75 (0,067 моль) едкого кали, .растворенного в 7 мл воды. Полученный раствор смеш,ивают с 9,5 г (0,057 моль) гидросульфита натрия, растворенного в 33 мл воды, и после нагревания в течение 10 мин при 30-40°С отфильтровывают. Растворитель отгоняют в вакууме до появления помутнения. Оставшееся маслообразное вещество отделяют и обрабатывают 100 мл спирта. Полученные кристаллы имеют т. пл. 199,5°С (с разлож.). Найдено, % N 8,92. Вычислено, %: N 9,33. Б. Конденсация. К 80 мл раствора, полученного после восстановления 0,012 моль замещенного тирозина без его выделения, добавляют 48 мл диоксана, 1 г хлорсульфонированного сополимера стирола и дивинилбензола (0,5%). Смесь перемешивают при комнатной температуре 15 час, рН среды поддерживают около 8 2 н. едким натром. Полученную смолу отфильтровывают, промывают 2 н. щелочью, ВОДОЙ, разбавленной соляной кислотой и водой до нейтральной реакции. В ИК-спектре имеются полосы поглощения в области 1160, 1340, 1600 и 1620 см-. Содер510 15 20 25 30 35 жание N - 2,76%, аналитическая объемьая емкость (АОЕ) - 2,0 мг. экв./г. В. Испытание сорбента. 2 г смолы загружают в колонку (0 1X5 см), уравновещивают 0,01М универсальным буфером с рН 7,0 и наносят 4 мл раствора (в том же буфере) ферментного препарата протосубтилииа Г-10 X, полученного из Вас. Subtilis с протеолитической активностью 409 ед./1 г белка при рН 7,5. Концентрация белка 2,5 мг/мл. Протеолитическую активность устанавливают модифицированным методом Ансона, концентрацию белка - методом Лоури. При элюации 30 мл указанного буфера вымываются протеолитически неактивные белки в интервале рН 5,6-10,0, а также красящие вещества. Протеолитические ферменты элюируются 120 мл 1М раствором хлористого натрия в том же универсальном буфере. Общая протеолитическая активность полученного фермента 1606 ед./ 1 г белка при рН 7,5. Очистку протеолитических ферментов можно проводить также непосредственно из культуральной жидкости Вас. Subtilis и из водного раствора ферментного препарата. Предмет изобретения Способ получения сорбента путем взаимодействия хлорсульфонированного сополимера стирола и дивинилбензола с аминокислотой, отличающийся тем, что, с целью создания сорбента с высоткой сорбционной способностью по протеолитически активным белкам, в качестве аминокислоты используют N- (паминобензил) -L-тирозин.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
Способ получения сорбентов для аффинной хроматографии сериновых протеаз | 1977 |
|
SU734215A1 |
Субстанция протеолитического фермента на основе Протосубтилина ГЗХ, иммобилизованного на хитозане, и композиция для лечения гнойно-некротических ран | 2016 |
|
RU2630668C1 |
Способ очистки трипсина | 1989 |
|
SU1742329A1 |
Способ очистки протеолитических ферментов | 1978 |
|
SU942427A1 |
Способ очистки протеолитических ферментов | 1976 |
|
SU644796A1 |
Способ получения протеолитического препарата для медицинского применения | 2015 |
|
RU2610669C1 |
Способ получения препарата иммобилизованной протеазы BACILLUS SUBTILIS | 1977 |
|
SU686377A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМОГО ИММОБИЛИЗОВАННОГО ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА ПРОТЕАЗ | 2004 |
|
RU2270861C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1-β-D-РИБОФУРАНОЗИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛ-3-КАРБОКСИАМИДА (РИБАВИРИНА) | 2002 |
|
RU2230118C2 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АФИННОГО СОРБЕНТА ДЛЯ ОЧИСТКИ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ | 2003 |
|
RU2230072C1 |
Авторы
Даты
1975-07-05—Публикация
1974-02-08—Подача