варительного изучения скрости реакции гидроксилироваиия и растворимости стероида в условиях проведения опыта.
По окончании реакции культуральную жидкость экстрагируют не смешивающимся с водой растворителем, растворитель упаривают и образующийся ацетонид ба-фторпрегнен-4-тетрол-11|3, 16а, 17а, 21-диона-3,20 ацетилируют по 21-положению и целевой продукт выделяют.
Выход целевого продукта по предлагаемому способу составляет 75-80%.
Пример.
Культуру гриба Tieghemella orchidis выращивают на скощенном сусло-агаре в пробирках в течение 2-3 недель при 26-28°С. Споры гриба смывают с поверхности агара 5 мл физиологического раствора и споровую суспензию в количестве 1 мл вносят в 100 мл стерильной среды следующего состава: Глюкоза, г30
Кукурузный экстракт (сухой вес), г 5
Пептон, г3
Дрожжевой автолизат, г3
КН2РО4, г5
Вода водопроводная, мл
рН 6,8-7,2.1000
Первый инокулят выращивания в конических колбах емкостью 0,75 л на круговой качалке при 220 об/мин при 26-28°С. Через сутки содержимое четырех колб (400 мл) переносят в 4 л среды того же состава. Выращивание трансформирующей культуры осуществляют в стеклянном ферментере (рабочая емкость 6 л); подача воздуха 0,5 л/л/мии, число оборотов мещалки в 1 мин 400, температура 28°С. Через сутки роста вносят первую порцию ацетопида 6а.-фторпрегнен-4-триол-16а, 17а, 21-диона-3,20 в количестве 0,5 г в 100 мл диметилформамида; вторую порцию стероида
в количестве 1 г в 20 мл диметилформамида вносят через 5 час после первой; через 8 час после второй вносят третью порцию стероида - 0,5 г в 10 мл диметилформамида.
Трансформацию проводят при том же ре жиме, что и выращивание культуры.
Продолжительность процесса составляет 20-27 час и контролируется методом хроматографии на пластинках «Silufol. При содержании исходного стероида не более 5% опыт заканчивают, культуральпую жидкость отфильтровывают от мипелия и экстрагируют 4 л хлористого метилена. Экстракт промывают водой, сущат безводным сульфатом натрия, растворитель упаривают в вакууме. Остаток ацетилируют 7 мл уксусного ангидрида, 0,87 г ацетата бария и 15 мл уксусной кислоты. Реакционную массу оставляк)т па ночь при комнатной температуре, затем выливают в 150 мл воды.
После перекристаллизации из хлористого метилена и метанола получают 1,68 г 21-ацетата ацетонида 6а-фторпрегнен-4-тетрол-11р, 16сс, 17а, 21-диона-3,20; т. кип. 267-268°С; а о +132° (СНС1з); log е 4,17; Я ,„„е 236- 238 мм), что мало отличается от литературных данных (т. пл. 261-263°С; а о + 135 (CHCls); loge 4,18; Л,,,,, 236-238 мм).
Предмет изобретения
Способ получения 21-ацетата ацетонида 6а-фторпреп1еи-4-тетрол-11р, 16сс, 17а, 21-диона-3,20 путем микробиологического превра35 щепия ацетонида 6а-фторпрегнен-4-триол-16а, 17а, 21-диона-3,20 с последующим ацетилированием, отличающийся тем, что, с целью упроп1.еиия процесса, в качестве мпкроорганизма используют штамм культуры Absidia orc« hidis.
