Производные 5-(2,4-диэтиленимино)-(симм. триазинил-6) амино-1,3 диоксана, проявляющие противоопухолевую активность , и способ их получения Советский патент 1977 года по МПК C07D319/06 C07D203/06 C07D287/12 

ния. Первый из них слишком хорошо растворим в воде, второй не может быть растворен в требуемом количестве не только в воде, но и в физиологически приемлемых органических растворителях.

Цель изобретения - получение соединений с противооп)аолевой активностью, обладающих повышенной жирорастворимостью при малой водорастворимости и поэтому пригодных для зндолимфатического введения в виде растворов в физиологически приемлемых гидрофобных жидкостях.

Производные 5- (2,4-диэтиленимино) -симмтриазинил-6 -амино - 1,3 - диоксана формулы I получают конденсацией производного 2,4 - дихлор - 6 - амипо - симм-триазина формулы П

СН2-ОН

-ссн„-он

где R имеет указанные значения, с соединением формулы 1П

к ,х

дгх VY

где R1 и R имеют указанные значения,

X и Y - каждый оксигруппа или вместе образуют кетогрулпу,

в присутствии кислотного катализатора в среде органического растворителя и образующееся производное 5-(2,4-дихлор) - симмтриазинил-6 - амино - 1,3 - диоксана формулы IV

в

1

1/Нг-О К

-С с

сн,-о V

где R, R и R имеют указанные значения,

аминируют этиленимином в присутствии третичного алифатического амина, например триэтиламина, в среде органического растворителя или в случае взаимодействия соединения П с альдегидом образующиеся пространственные изомеры формулы IV разделяют дробной кристаллизацией с последующим аминированием.

В качестве кислотного катализатора исдользуют «-толуолсульфокислоту, хлористый цианур или катионит КУ-2 в Н-форме.

Эти соединения содержат замещенное гидрофобными радикалами мета-диоксановое кольцо, придающее им повышенную жирорастворимость, не лишены при этом некоторой

гидрофильности, проявляющейся, однако, в гораздо меньшей степени, а остаток 2,4-диэтиленимино-симм-триазина сообщает им свойства биологических алкилирующих веществ. Они проявляют высокую противоопухолевую активность в эксперименте на прививаемых опухолях грызунов (50-100% торможения роста), обнаруживая некоторые различия в спектре антинеопластического действия

и в степени влияния па различные ростки кровотворения.

Пример 1. Получение 2,2 - диметил - 5(2,4 - диэтиленимино) - симм - триазинил-6 амино - 1,3 - диоксана.

Смесь 0,015 моль 2-(диметилолметил)-амино - 4,6 - дихлор - симм - триазина, 0,045 моль 2,2 - диэтоксипропана, 0,3 г обезвоженного катионита КУ-2 (в Н-форме) и 35 мл сухого бензола кипятят 10-15 мин с обратным холодильником (с хлоркальциевой трубкой). Образовавшийся раствор отделяют от смолы, которую затем промывают 15 мл этилацетдта декантацией на фильтре. Объединенный фильтрат упаривают в вакууме (температура баИИ не выше 40°С) до почти полного удаления растворителя и остаток растворяют 15-20 мл гексайа. Образовавшийся остаток отфильтровывают, промывают на фильтре 3-5 мл гексана и получают 3,6 г сырого продукта, который кристаллизуют из 15 мл абсолютного спирта, оставив на ночь при температуре от -5 до -0°С. Выход чистого 2,2-диметил-5(2,4-дихлор) - симм - триазинил - 6 -амино1,3-диоксана 3,0-3,05 г (69-70%).

Вещество растворяется в бензоле, этилацетате, эфире, ацетоне и низших спиртах. Плохо растворимо в воде и незначительно в гексане, т. пл. 135-.136°С с разложением. .Найдено, %: ,N 20,46; 20,34; С1 25,0; 25,2.

Ci9Hl2Cl2N4O2.

Вычислено, %: N 20,07; С1 25,41. 0,01 моля 2,2 - диметил - 5-(2,4 - дихлор)симм - триазинил - 6 - амино - 1,3 - диоксана растворяют в 40 мл безводного диоксана и

при охлаждении до 10-11°С в интенсивном механическом перемешивании прибавляют по каплям в течение 15-20 мин раствор 0,3 моль этиленимина и 0,03 моль триэтиламина в 20 мл диоксапа, предохраняя реакционный

сосуд от попадания атмосферной влаги. Смесь перемешивают 3-4 ч без охлаждения и еще 1 ч при 40-45°С, после чего осадок гидрохлорида триэтиламина отфильтровывают, промывают на фильтре 10 мл диоксапа и объединенный фильтрат выпаривают в вакууме (при температуре бани не выше 40°С) до возможно более полного удаления растворителя. Остаток растирают с 5 мл абсолютного эфира и разбавляют 30 мл гексана. Образовавшийся

твердый продукт отфильтровывают и получают 2,3-2,5 г вещества, которое кристаллизуют из абсолютного эфира. Для этого на каждый грамм препарата берзТ 100-120 мл эфира. Смесь кипятят с обратным холодильНИКОМ (без доступа влаги и зглекислоты) 15-

20 мин, .после чего фильтруют от нерастворившейся части и раствор сгущают в вакууме до 1/8 первоначального объема. После стояния в течение ночи при минусовой температуре в герметически закрытом сосуде образуется кристаллический осадок, который фильтруют, промывают на фильтре 2-3 мл смеси эфира с гексаном (1:1) и сушат в вакууме над твердой пделочыо. Получают 1,75-1,80 г (60-62%) 2,2 - диметил - 5 - (2,4-диэтиленимино)-симм-триазинт1Л - 6 - амино - 1,3 - диоксана, который после повторной кристаллизации плавится при 125,5-126,5°С.

Препарат хорошо растворяется в низших спиртах, ацетоне, этилацетате, хлороформе, хлористом метилене, бензоле, четыреххлористом углероде, несколько хуже в эфире, циклогексане и воде и почти не растворим в гексане.

Найдено, %: Н 29,0, 29,1. Эквивалент по этилениминовой группе 148,0, 149,0.

Cl3H2oNgO2.

Вычислено, %: П 28,75. Эквивалент по этилениминовой группе 146,17.

Пример 2. Получение 2,2,5 - триметил-5(2,4 - дизтиленимино) - симм - триазинил-6 амино - 1,3 - диоксана.

В 60 мл смеси сухих ацетона и бензола (155 мл) вносят 0,015 моль 2,4 - диХлор - 6(1,1 - диметилолэтил) - амино - симм-триазина, 0,0225 моль 2,2 - диэтоксипропана и 40 мл п - толуолсульфокислоты и смесь нагревают с обратным холодильником (с хлоркальциевой трубкой) на кипящей водяной бане в течение 1,5 ч, после чего ацетон отгоняют в вакууме, а оставшийся раствор (около 3/4 первоначального объема) нейтрализуют встряхиванием в делительной воронке с водным раствором КПСОз, а затем с чистой водой. Бензольный слой отделяют и сушат над безводным сульфатом магния или натрия. Фильтруют от осушителя и растворитель отгоняют в вакууме. Остаток обрабатывают 10 мл гексана, что приводит к кристаллизации продукта реакции. Его отфильтровывают и получают 2,7- 2,9 г неочищенного продукта. Дополнительное количество его выделяют из маточника путем отгонки в вакууме 2,2-диэтоксипропана и обработки остатка гексаном. После кристаллизации из циклогексана получают очищенный 2,2,5 .- триметил - 5 - (2,4-дихлоримино-симм-триазинил - 6)-амино - 1,3 - диоксан с т. пл. 157-159°С, выход 2,8 г (64%). Вещество хорошо растворяется в бензоле, этилацетате, ацетоне и эфире, но мало растворимо в гексане и воде.

Пайдено, %: Н 19,7, 19,6; С1 24,0, 23,9.

С1оНиС 2Н4О2.

Вычислено, %: П 19,12; С1 24,19.

0,01 моль 2,2,5 - триметил - 5- (2,4-дихлоримино) - симм - триазинил-6 - амино-1,3-диоксана вводят в реакцию с этиленимином в словиях, описанных в предыдущем примере, и таким же образом выделяют продукт реакции. После кристаллизации из эфира получают 1,6-1,7 г (52-55%) 2,2,5 - триметил - 5(2,4 - диэтиленимино) - симм - триазинил-6 амино - 1,3 - диоксана с т. пл. 142- 144°С, хорошо растворяющегося в больщинстве органических растворителей.

Найдено, %: N 27,6; 27,5. Эквивалент .по этилениминовой группе 156,0, 155,0. CuHssNeOa.

Вычислено, %: N 27,44. Эквивалент по этилениминовой группе 153,2.

Пример 3. Получение 2,2 - диметил - 5этил - 5-(2,4 - диэтиленимино) - симм - триазинил - 6 - 1,3 - диоксана.

Смесь 0,015 моль 2-(1,1 - диметилол)-пропил - амино - 4,6 - дихлор - симм - триазина и 0,045 моля 2,4 - диметоксипропана нагревают в присутствии 0,3 г обезвол енного катионита КУ-2 в Н-форме в 35 мл кипящего сухого бензола в условиях, приведенных в прИМере 1. Аналогичным образом выделяют также продукт реакции - 2,2 - диметил - 5 - этил-5(2,4 - дихлор) - симм - триазинил - ,3-диоксан, т. пл. 148-Г50°С (из циклогексана). Выход 3,25 г (70%). Найдено, %: С1 22,90, 22,80.

CuHi6Cl2N4O2.

Вычислено, %: С1 23,10.

0,01 моль полученного 2,2 - диметил-5-этил5-(2,4 - дихлор) - симм - триазинил - ,3диоксана аминируют этиленимином аналогг.чно тому, как описано в примере 1, и после подобной обработки реакционной смеси после окончания реакции выделяют твердое вещество, которое очищает кристаллизацией из циклогексана. Выход 2,20 г (69%), т. пл. 119- 121°С (из циклогексана).

Соединение хорощо растворимо в большинстве органических растворителей.

Найдено, %: N 26,8, 26,7. Эквивалент по этилениминовой группе 158,0, 159,0.

С15Н24Мб02.

Вычислено, %: N 6,23. Эквивалент по этилениминовой группе 160,2.

Пример 4. Получение 2,2-диметил - 5-оксиметил - 5 - (2,4-диэтиленимино)-симм-триазинил-6 - амино - 1,3 - диоксана.

0,0315 моль хлористого цианура растворяют в 60 мл сухого ацетона в трехгорлой колбе, снабженной механической мешалкой и термометром и защищенной от доступа атмосферной влаги хлоркальциевой трубкой.

Полученный раствор охлаждают до -f 10°С и при этой температуре при энергичном размешивании постепенно (в течение 1-2 мин)

загружают 0,06 моль 2 - метилол - 2 - аминопропандиола - 1,3 (триметилоламинометана), предварительно растертого в тонкий порошок и высушенного при 105°С. Размешивание при + 10°С продолжают еще 1-2 ч, после чего

охлаждение прекращают и выдерживают при комнатной температуре (насколько это возможно при продолжающемся перемешивании) до тех пор, пока содержание ионного хлора в пробе осадка не будет точно соответствовать

гидрохлориду триметилоламинометана (молекулярпый вес его 157,5), на что требуется 50-60 ч. После завершения реакции ацетоновый раствор отфильтровывают от осадка гидрохлорида исходного амина, который иромывают на фильтре 20 мл ацетона и объединенный фильтрат выиаривают в вакууме, предварительно прибавив в него 10 мл безводного бензола. Остаток смачивают 10 мл бензола н снова вынаривают в вакууме, добиваясь этим более нолного удаления воды. Полученный технический нродукт растворяют в 60 мл кипящего дихлорэтана (не содержащего следов хлористого водорода), мутный раствор фильтруют горячим через тонкий слой активированного угля, оставляют для кристаллизации нри температуре от -2 до на 3-4 ч (в закрытом сосуде) и получают 6,0-6,2 г продукта. Из маточника после сгущения в вакууме на 2/3 объема и охлаждения получают еще около 0,6 г. Общий выход 2,2 - диметил5 - оксиметил - 5 - (2,4 - дихлор) - симм-триазинил-6 - амино - 1,3 - диоксана 6,5-7,0 г (70-75%). Пренарат хранят над твердой щелочью в вакууме. 0,02 моль 2,2 - диметил - 5 - оксиметил-5(2,4 - дихлор) - симм - триазинил-6 - амино1,3 - диоксана вводят в реакцию с 0,06 моль этиленимина в смеси с 0,06 моль триэтиламина в среде дноксана (80 мл) в условиях, описанных в примере 1. После заверщения реакции и отделения осадка гидрохлорида триэтиламина в фильтрат добавляют 20 мл безводного толуола и выпаривают в вакууме до возможно более полного удаления летучих компонентов при температуре бани не выще 40°С. Остаток после выпаривания обрабатывают 20 мл толуола, который снова отгоняют в вакууме. Полученный сырой продукт, представляющий собой в основном кристаллогидрат с диоксаном (1 : 1), очищают кристаллизацией из ацетона с применением обесцвечивающего угля. Чтобы избежать осложнений при горячем фильтровании от последнего (вещество легко закристаллпзовывается на фильтре), берут некоторый избыток ацетона, а разбавленный фильтрат упари-вают в вакууме до начала интенсивной кристаллизации. Выход очищенного 2,2 - диметил - 5 - оксиметил5 - (2,4 - диэтиленимино) - симм-триазинил6 -1,3 - диоксана 4,5-4,8 г (70-75%). При нагревании он разлагается и определенной температуры плавления не имеет. Очень хорощо растворим в низших спиртах, ацетоне и диоксане. Из последнего растворителя выделяется в виде устойчивого кристаллогидрата (1:1). Найдено, %: N 26,00, 26,50. Эквивалент -по этилениминОВой группе 161,0, 161,0. CnnsaNgOg. Вычислено, %: N 26,07. Эквивалент по этилениминовой группе 161,18. Пример 5. Получение стереоизомерных 2-(к - фурил) - 5 - оксиметил - 5-(2,4-диэтиленим11но) - симм - триазинил-6 - амино-1,3ЛноКСанов. 0,068 моль 2-(триокси - трет-бутил)-амино4,6 - дихлор - симм - триазина вносят в раствор 17 мл (0,2 моль) свежеперегнанного фурфурола в 90 мл очищенного безводного тетрагидрофурана, содержащий 0,25 г /г-толуолсульфокислоты. Смесь оставляют на сутки, периодически встряхивая. Образовавщийся раствор нейтрализуют 0,5 г порошкообразного бикарбоната калия, фильтруют и фильтрат выиаривают в вакууме при температуре бани не выще 40°С. Остаток обрабатывают 60 мл бензола и охлаждают до начала замерзания растворителя. Выделившийся кристаллический осадок отфильтровывают и полз чают 17,6 г смеси стереоизомеров, которую разделяют дробной кристаллизацией, а бензольный маточник упаривают в вакууме почти досуха и разбавляют 200 мл бензола, что приводит к выделению 2,7 г кристаллического осадка транс-(2-Н; 5-СН2ОП) изомера, 17,6 г первой фракции кристаллов обрабатывают 200 мл хлороформа, фильтруют от нераствориБШихся примесей и фильтрат выпаривают в вакууме досуха. Остаток кристаллизуют из 120 мл бензола и получают 9,5 г кристаллического цис-(2-И; 5-СН2ОН) изомера. Маточник сгущают в вакууме до объема 15-20 мл, нагревают до кипения и разбавляют 70 мл четыреххлоркстого углерода. После охлаждения выделяется еще 2,6 г г нс-изомера, таким образом общий выход его составляет 5,3 г (22,5%). Выход Т;оа«с-изомера 9,5 г (40,5%). Чистоту разделенных изомеров контролируют хроматографически, так как они не имеют определенной температуры плавления (при нагревании разлагаются). Па пластинках силуфол с закрепленным тонким слоем силикагеля в системе хлороформ-этилацетат (1 : 1), каждый из изомеров должен давать только одно пятно ,7-0,75 и 0,6-0,65 для транс- и г мс-изомера, соответственно. Пайдено, %: в г/оанс-изомере N 16,3, 16,4; С1 20,3, 20,7; в г мс-изомере N 16,3, 16,25; С1 20,3, 20,6. Cl2Hl2Cl2N4O2. Вычислено, %: N 16,14; С1 20,43. 0,01 моль чистого изомера растворяют в 120 мл сухого диоксана и к полученному раствору в условиях, приведенных в примере 1, постепенно приливают раствор 0,03 моль этиленимина и 0,03 моль триэтиламина в 30. мл диоксана. После заверщения реакции осадок гидрохлорида триэтиламина отделяют, а фильтрат упаривают в вакууме до объема 20-30 мл, разбавляют 20 мл циклогексана и отфильтровывают выделившийся продукт реакции. Аминирование 1 «с-изомера можно проводить без раз.бавления циклогексаном. Для очистки в обоих случаях применяют кристаллизацию из 20-25 мл абсолютного метанола. Получают 1,9 г (53%) цис- и 1,7 г (47,5%) г/ анс-изомера 2-(а - фурил) - 5 - ОК симетил - 5 - (2,4 - диэтиленимино) - симм: триазинил-6 - 1,3 - диоксана. Оба изомера

9

практически нерастворимы в воде, хорошо растворяются в низших спиртах, ацетоне и хлороформе и несколько различаются по растворимости в бензоле, диоксане и некоторых других растворителях.

При кристаллизации из метанола транс-изомер с экваториально расположенной оксиметйльнон группой в пятом положении 1,3-диоксанОВОго кольца выделяется в виде пластинок, а цис-изомер с аксиальной оксиметильной групиой образует мелкие призмы.

Найдено, %: тро.чс-изомер N 23,0, 23,2; цисN 23,1, 23,2. Эквивалеит по этилениминовой группе транс-изомер 184,0, 183,0; цис- 182,0, 183,0.

С-1бН2оКб04.

Вычислеио, %: N 23,32. Эквивалент по этилениминовой группе 180,18.

Пример 6. Получение стереоизомерных 2- (3,4 - диметоксифеиил) - 3 - оксиметил-4(2,4 - этиленимино) - симм - триазинил-6 амино - 1,3 - диоксанов.

В раствор 0,03 моль вератрового альдегида и 75 мг хлористого цианура в 30 мл сухого тетрагидрофурана загружают 0,02 моля 2(триокси - трет - бутил) - амино - симм - триазина и смесь оставляют на 2 сут в закрытом сосуде, периодически встряхивая. Из образовавшегося раствора отгоняют в вакууме тетрагидрофураи, остаток растворяют в 60 мл четыреххлористого углерода и разбавляют 60 мл циклогексаиа. Образовавшийся осадок отфильтровывают и обрабатывают 100 мл хлороформа. Нерастворившиеся примеси отделяют фильтрованием, фильтрат сгущают в вакууме до 1/5 первоначального объема и разбавляют 20 мл гексана, что приводит к выделению смеси стереоизомерных 2-(3,4 - диметоксифенил) - 5 - оксиметил - 5-(2,4-дихлор)симм - триазииил - 6 - амино-1,3 - диоксанов, которую отфильтровывают, промывают на фильтре смесью хлороформа с гексаиом (1:1) и разделяют дробной кристаллизацией из ацетона и четыреххлористого углерода аналогично тому, как это изложено в предыдущем примере.

Каждый из разделенных стереоизомеров

10

вводят в реакцию с этиленимином (см. пример 5) и получают соответствующие стереоизомерные 2-(3,4 - диметоксифенил) - 5 - оксиметил - 5 - (2,4 - диэтиленимино) - симмтриазинил-6 - амино - 1,3 - диоксаны, которые кристаллизуют из метанола. Выход при загрузке 0,01 моль составляет 2,6-2,65 г (60-62%). Оба стереоизомера не имеют определенной

температуры плавления, так как при нагревании разлагаются, различаются по растворимости в некоторых органических растворителях и по форме кристаллов. Изомер с экваториально расположенной оксиметильной группой в пятом положении 1,3диоксаиового цикла (транс-изомер) кристаллизуется из метанола в виде коротких игл, в то время как его аксиальный аналог (ц«с-изомер) образует в тех же условиях пластинки

в форме трапеций.

Найдено, %: в транс-изомере Н 19,5, 19,7; в ц«с-изомере Н 19,9, 19,6. Эквивалент по этилениминовой группе в транс-изомере 218,5, 219; в цис-изомере 217, 218.

СгоНзбНбОй.

Вычислено, %: Н 19,53. Эквивалент по этилеиимииовой группе 215,23.

Эти соединения обладают повышенной активностью при прямом контакте с опухолевыми клетками, что имеет место при лечении асцитиых форм новообразований (около 100% торможения роста), а также увеличенной избирательностью цитотоксического действия иа опухоли при введении в виде масляных растворов.

Подобный комплекс биологических и физико-химических свойств удовлетворяет основным требованиям, предъявляемым к противоопухолевым препаратам, предназначенным

для эндолимфатического введения в виде растворов в физиологически приемлемых гидрофобных жидкостях, поэтому препараты, получаемые предлагаемым способом, могут найти применение для указанной цели.

В таблице приведены результаты биологического тестирования предлагаемых соединений.

11

T/CH,-0 /R

-c( c

,

12