среде при температуре от -5 до -10° С. Моно-. ли- и триаиилпроизводные тр.иокси-грег-бутиламида (2-хлорэтил) амино фенилуксусной кислоты получают ацилирован.ием соединения указанной обидей формулы, где R, RI и R2 - водород, хлорангидридами (ангидридами) карбоновых кислот в среде .пеподярного растворителя, предиочтителыю бензола, или без раетворителя.
Циклические про.изводиые триокси-грегбутила1М,ида (2-хлорэтил) амшю фенилуксусной кислоты образуются в результате обработки соединений указанной общей формулы, где R, RI II R2 - водород или ацил, кетонами, альдепидами или их ацеталями в присутствии кислотных катализаторов.
Синтезированные соединения: триокеигрег-бутиламид (2-хлорэтил) амино фенилуксусной кислоты, его ацил- и циклические О,О-алкилпроизволмые гредставляют собой устойчивые бесцветные кристаллические вещества, которые хорошо растворимы в тетрагидрофуране, хлороформе, умеренно растворимы в низилих спиртах, трудно растворимы в гексане, эфире и воде.
Состав и строен.ие полученных соединений доказаиы элементным анализом (на С, Н, С1, N), определением эквивалента по хлору методом Фолгарда после кипячения (25- 30 мин} навески вещества в водно-органическом (4:1) 1 и. растворе едкого натра. 1IKir УФ-спектра.ми.
В ИК-спектрах суспензий веществ в вазелиновом масле (спектрофотометр LR-10) обнаружены для соответетвующих соединений полосы поглощения, хара1ктеризующие группы ОН и NH (3200-3390 ел/-). С-ОН и С-О-С (1030-1230 С.1Г-), С О сложноэф.ирную (1750 ), полосы ароматического кольца (в области 1530 ), а также полосы «амид-1 (1645-1675 ) и «амид-Н (1560-1630 ел/-).
УФ-спектры предлагаемых соединений в спирте (спектрофотометр СФ-8) характеризуются налич-ием двух абсорбционных по тсс; 261-262 нл; (е 2,1 .,4 10) и 300 нм (плечо) (е 2- Ш).
В настоящее время общепринятым является деление молекулы противоопухолевого алкилирующего препарата на цитстоксические группы и их носитель. За счет первых осуществляется хи1мическое взаимодействие с биополи1мерам1И клетки, а носитель способствует транспорту препаратов через клеточную оболочку. В последнее время эти свойства носителя стали связывать с гидрофобно-гидрофильны.м балансом, находящимся в прямой зависимости от структуры молекулы препарата. В то время, как гидрофобные участки последней способствуют связыванию с липидными фрагментами клетки (за счет так называемых гидрофобных взаимодействий), полярные группы придают всей молекуле в целом большую или меньшую степень гндрофильности. Липофильность облегчает препарату преодолеваиие клеточной мембраны даже в отсутствие активного транспорта. Гидрофильность затрудняет этот процесс, но зато обеспечивает дальнейшее продвижение препаратов в цитоплазме и внутри ядра до точки приложения его действия. Таким образом, оптимальное сочетание обских указанных свойств не только благоприятствует транспорту препарата, мо и может решающим образом влиять на избирательность его действия, так как хуже организованные клеточные мембраиы опухолевых клеток легче могут быть преодолены молекулами несвойственного организму чужеродного соединения. Проведенные исследования показывают, что к числу црепаратоВ, обладающих выгодным для реализации противоопухолевого действия балаисом гидрофобно-гидрофильных свойств, могут быть отнесены предлагаемые производные амидов (2-хлорэтил) амино фенилуксусной кислоты с незамещенной и замещенной различными радикалами триокси-грет-буппльной группой.
Из предлагаемых веществ наилучшим балансо.м гидрофильных и гидрофобных свойств обладают триожси-грет-бутиламид (2хлорэтил) амино фенилуксусной кислоты (R, RI и R2-Н) и его циклические производные
R-водород, Ri + (СНз)2 и CJCHz),,,
где /2 4 или 5. В .молекулах этих соедипеиий наряду с гидрофобным ароматическим фрагментом (остатком 4- i5wc-(2-хлорэтил) амиио фепилуксусной кислоты) имеются и
резко выражеины.е гидрофильные участки - незамещенная триокси-трег-бутильная группа и 1,3-ди€ксановые циклы. Носледние содержат наряду с неполярными С-С- поляр -:ые С-О-связи, также придающие соедииеПИЮ определенную степень гидрофильноети.
Большую ЛИПОФИЛЬНОСТЬ имеют все ацетильные производные соединения указанной общей формулы и, следовательио, относительно меньшуЕО противоопухолевую актпвность
(см. табл. 1).
Результаты испытаний свидетельствуют о том, что все синтезированные соединения о.бладают высокой биологической активностью, проявляют способность полностью или почти
полностью подавлять развитие ас1М)тной опухоли Эрлиха и тормозить рост ряда плотных перевиваемых опухолей у мышей и крыс (см. табл. 1). Лофецал, например, тормозит рост асцитной опухоли Эрлиха всего па 60,9%.
Особый интерес представило действие предлагаемых соедииеиий па линейных мышей CC.-,7W с сиигениой для этой линии опухолью НРК (плоскоклеточпый рак кожи). Данная опухоль отличается крайне низкой
чувствительностью к известным противоопухолевым препаратам, поэтому получение на такой модели высоксдостоверного и хорошо воспроизводимого эффекта (см. табл. 1) значительно иовышает ценность этих соединений
в качестве противоопухолевых агентов и, кроРезультаты биологического тестирования некоторых из предлагаемых соединении
Таблица 1
Плоскоклеточный рак кожи на мышах CCsrW (сингенная опухоль). все остальные показатели торможения достоверны. Одним из основных до.стоинств полученных соедииений является их низкое токсиче- 5 ское действие и высокий терапевтический индекс (ЛД50/МПД 2,5-10 для крыс и 10-21 для мышей). В отличие от большинства известных преВлияние некоторых из предлагаемых соединений на содержание лейкоцитов в периферической
крови мышей |И крыс с опухолями Разница с исходным недостоверна. Предлагаемые соединения можно вводить в организм двумя путями: парэнтерально (в виде суспензий в физиологическом растворе) и перорально. При пероральном введении наблюдается та же картина, что и при внутрибрюшинном: адекватное торможение роста опухолей и отсутствие повреждающего действия на кроветворение. Например, соединение указанной общей формулы, где R - водор. В дозе 80 . при
Таблица 2 паратое, в том числе н от хлорамбуцила - 4-б«с-(2-хлорэтил)аминофенилмасляной кислоты, данные соединения не вызывают у животных лейкопении (см. табл. 2) и не действуют на лимфоцитариую тка«ь. введении внутр.ибрюшинно и перорально тормозит рост саркомы 37 .на 69%. В обоих случаях препарат не снижает числа лейкоцитов и не действует на лимфоцптарную ткань. Таким образом, крайне важным является тот факт, что кроме использования указанных соединений в клинике, их можно примен: ть и амбулаторно. Пример 1. Триокси-трег-бутиламид (2-хлорэтил) амино фенилуксусной кислоты. К раствору 0,138 г моль триокси-грегбутиламина в 47 мл воды и 23 мл ацетона при -10° С и интенсивном перемешивании добавляют за 30 мин раствор 0,046 г моль гидрохларйда хлорангидрида (2-хлорэтил)амино фенилуксусной кислоты в 85 мл ацетона. Смесь перемешивают 15 мин при - 10° С .и выливают в 100 мл ледяной воды. Выдавший осадок отфильтровывают, промывают водой, затем гексалом с добавкой небольшого количества этанола. Из фильтрата после отгоики ацетона в вакууме выделяют дополнительное количество веш,ества. Обе порции сырого продукта объединяют и сушат в вакуум-эксикаторе над едким кали. После перекристаллизации из дихлорэтаиа и этилацетата с углем получают 8,7 г (50% от теоретического) чистого веш:ества, т. пл. 143-144° С. Соедниен.ие растворимо в тетрагидрофуране, умеренно paiCTBOpinMO в хлороформе, спиртах, црудно растворимо в воде. Найдено, %: С 51,10; Н 6,29; С1 18,73; N 7,35. Ci6H24Cl2N204. Вычислено, %: С 50,62; Н 6,38; С1 18,75; N 7,38. Эквивалент по хлору: найдено 189,7; вычислено 189,6. Пример 2. Триацетокси-трег-бутиламид 4-(2-хлорэтил)амино фенилуксусной кислоты. 0,001 г моль триокси-трег-бутиламида (2-хлорэтил) амино фенилуксусной кислоты кипятят в 5 мл хлористого ацетила 2 час. Затем смесь упаривают в вакууме досуха. Следы хлористого ацетила удаляют отгонкой в вакууме последовательно с 3 и 5 мл безводного бензола. Остаток перекрнсталлизовывают из бензола, получают 0,39 г (78% от теоретического) бесцветных кристаллов, т. пл. 122-123° С. Веш,ество растворимо в тетрагидрофура.не, хлороформе, хуже растворимо в спиртах, нерастворимо в гексане, воде. Найдено, %: С 52,47; Н 5,68; С1 14,13; N 5,53. CsaHsoCbNaOy. Вычислено, %: С 52,28; Н 5,98; С1 14,06; N 5,54. Эквивалент по хлору: найдено 251,0; вычислено 252,7. Пример 3. (5-Окоиметил-2,2-диметил1,3-диоксан - 5 -ил)1амид (2-хлорэтил) а.мино фенилуксусной кислоты. 0,01 г моль триокси-трет-бутиламида 4. бис- (2-хлорэтил) aiMMHo фенилуксусной кислоты и 0,012 г моль диэтилацеталя ацетона кипятят до растворения (1 час) в 30 мл безводного бензол1а в присутствии нескольких кристалликов п-толуолсульфокислоты. Затем добавляют активированный уголь, смесь нагревают до ки1П1ения и фильтруют через слой 0,5 см окиси алюминия. К фильтрату приливают 1,5 объема гексана. После охлаждения и фильтрации получают 3,11 г (74,5% от теоретического) бесцветных кристаллов, т. пл. 106-107° С. Вещество растворимо в хлороформе, тетр,алидрофуране, умеренно раствоимо в спиртах, нерастворимо в гексане, воде. Найдено, %: С 54,97; Н 6,54; С1 17,13; N 6,68. C,9H28Cl2N204. Вычислено, %: С 54,42; Н 6,73; С1 16,91; N 6,67. Эквивалент по хлору: найдено 213,1; выислено 209,7. Пример 4. (5-Оксиметил-2,2-диметил1,3-диоксан-5-ил)амид 4 - бис - (2-хлорэтил) амино фенилуксусной кислоты. 0,01 г моль триокои-грет-бутиламида (2-хлорэтил) амино фенилуксусной кислоты и 0,012 г моль диэтилацеталя ацетона в 30 мл безводного бензола кипятят до растворения в присутствии 0,4 г катализатора КУ-2 в Н+ - форме. Катализатор отфильтровывают, реакционную массу далее обрабатывают, как указано в примере 3. Выход и константы продукта совпадают с приведенными в примере 3. Пример 5. (5-Оксиметил-2,2-диметил1,3-диоксан - 5 - ил) амид (2-хлорэтил) а.мино фенилуксусной кислоты. Смесь 0,005 г . моль триокои-грег-бутиламида (2-хлорэтил)амино фенилуксусной кислоты и 100 мг л-толуолсульфокислоты в 15 мл безводного ацетона выдерживают при 20-25° С до полного растворения, затем подщелачивают спиртовым раствором едкого кали до рН 8, фильтруют и упаривают в вакууме досуха. Остаток перекристаллизовывают из смеси бензола и гексаиа. Получают 0,9 г (50% от теоретического) вещества, конCTaiHTbi которого совпадают с константами (5-окси|Метил-2,2-ди|Метил - 1,3 - диоксан-5-ил) амида (2-хлорэтил)амино фенилуксусной кислоты, полученного способами, приведенными в примерах 3 и 4. Пример 6. (5-Окоиметил-2,2-иентаметилен-1,3-диоксан-5-ил) амид (2-хлорэт1ил)амино фенилуксусной кислоты. Смесь 0,005 г моль триокси-грег-бутила.мида (2-хлорэт1ил) амино фенилуксусной кислоты и 0,0065 г моль диэтилацеталя циклогек-санон.а кипятят до растворения в присутствии нескольких кристаллов п-толуолсульфокислоты или КУ-2 в Н+ - форме. Катализатор отделяют, бензол удаляют в вакууме, остаток перекристаллизовывают из смеси безводного этанола и гексава. Получают 1,58 г бесцветных кр|ИСТ;аллов (70% от теоретического), т. пл. 134-135° С. Продукт растворим в тетрагидрофзфаие, хлороформе, умеренно растворим в спиртах, эфире, четыреххлористом углероде, нерастворим в воде, циклогексаие. Найдено, %: С 57,95; Н 7,22; С1 15,70; N 6,03. C22H82C12N204. Вычислено, %: С 57,50; Н 7,02; С1 15,41; N 6,09. Эквивалент ио хлору: найдено 230,0; вычислено 229,7.
Формула изобретения
tea ОН 1
СН2СОЫН-(;,-СН20Рг
(С1СНгСН2 К
СНрОБ
где R, RI и Rj - одинаковые или различные и означают водород или ацетил или два радикала R и Rj означают груипу
сн-с.н.5 2/y7w e CH)j,
(Ш
Х
/
(« 4 или 5) а Кг - водород или ацетил, обладающие противоопухолевой активностью. 2. Способ получения соединений по п. 1,
о т л и ч а ю щ и и с я тем, что гидрохлорид хлорангидрида (2-хлорэтил)амино фенилуксусной кислоты конденсИруют с триокси-грег-бутиламином в водно-ацетоновой среде при (-5) - (-10)° С и целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде аи.гтильных производных, или в виде циклических ацеталей.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:
