Способ получения цитидин-5-дии трифосфатов Советский патент 1976 года по МПК C12D13/00 

1

Изобретение относится к получению био логически активных соединений, которые могут найти применение в медицине, биоХ№. мни, биологии, генетике.

Известен способ получения цитидин 5- -ди и трифосфатов путем биохимического „ фосфорилирования из нуклеотида-нцитидин-З-монофосфата в среде, состоящей из сахара, толуола, неорганических фосфатов; хло ристого калия, хлористого магния и источника ферментов - пивных дрожжей Недостатком известного способа является ограниченность сырьевой базы и недостагочно высокий выход целевого продукта.

Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта и расширение сырьевой базы.

Для достижения этой цели, в качестве .исходного сырья используют нуклеозидцитидин, а в качестве катализатора - ферментатибную систему пивных дрожжей первой генерации.

Пример 1. 2ОО мг цитидина растворяют в 7,6 мл воды. К раствору прибавляют i,0 г неорганических фосфатов.

0,014 г. КС1, 0,0144 , 2,6г пивных дрожжей первой генерации, 0,6 мл толуола, 0,4 г сахара.

Время ферментации мин при37°С и рН 6,Э.-.7,О. Д га прекращения реакцииц пшбавдают 2 г трихлоруксусной кислоть прт ip С. Осадок отцентрифугируют. К фипьеграту прибавляют 10-кратный объекГЬтйповЬГоспир та. Осадок разделяют на ионообменной колонке. Степень фосфорилирования 97%. Выход ОД г ЦДФ и 0.15 г ЦТФ.

П р и м е р 2. 2ОО мг цитидина рао. творяют в 7,6 мл воды.. К раствору прибавляют 1,0 г неорганических фосфатов,

0,014 г КС1, 0,144 г f . 2,6 г пивных дрожжей первой генерации, 0,6 МП толуола, 0,4 г сахара. Время ферментации ЗО-60 мин при и рН 6,Й7,О.Для прекращения реакции прибавлякгг

2 г трихлоруксусной кислоты при О°С Oca-i док отцентрифугируюг. К фпльтрату прибав-ляют Ю-кратный объем метилсжого спирта.

Осадок разделяЮТ на ионообменной колонке. Степень фосфорили ЕрВ|ания 99%, Вы

ход 0,12 г ЦДФ и 0,18 г ЦТФ. S

Формула иэобрет я 1|ч а ю ш и и с я тем, что, с аепью иоСпособ получения дитядлн 5-д11 и трй вышения выхода целевого п| одукта в расАоофатов путем биохимического фосфорили ширения сырьевой базы в кйчестае вюходjpOBoratf в среда, состоящей из сахара, то- /ного сырья используют нуклеозидадатвдшн, луола, иесргаиических фосфатов, хл Ч Я1сто- ; в « в качестве катализатора - ферментатив-;

го калия, хл истстго в присутствииНУ« систему шшнрых дрожжей гене-f

катапизат - пивных дрснкжей, о т л .

521310