Способ получения молокосвертывающего ферментного препарата Советский патент 1976 года по МПК C12D13/10 

(э4) СПОСОБ тотчЕшт молокосвЕггывАюащго

ФЕРМЕНТНОГО ПРЕНЛРАГ А биологических, матрасах, содержащих соответственно 100,200 и 150 мл питательной среды состава,г/л: Глюкоза}0 )5 It. S 04-Т Май0,001 )оо5 Среду готовят на водопроводной воде. йсходашгй рН до стерилизации t среды 5,6. СтерилИ задаю проводят кри давлешш ,2 атм в течение 45 ми Посевной мицелий выращивают на сусле-агаре. Гейиератур ишсубаццн поддерживают в предеЯах 25-26°С.. По.досишеяии иакс1€мальной активности культурадьнуиэ жидасость отделяют от мицелия, фильтрат охлаждают до 4°С, осаждение белков проводят охлаж до - 15°С 96%-ным этиловым сго$ртом в соотношении 1:3. Гмесь выдерживают в течение суток при -15°С, Ессле чего декантируют недостаточную жидкость. Оеадок от оставшейся i яоодкости отделяют центрифугированием при 4 00-5000 об/мин при 0°С в течение 5-8 мин. Для удаления С(СтатЬчной влап и спир та стаканы с осадком помещают в морозильную камеру при -5°С на 24-48 час, порле чего осадок экстрагируют бидистшширотатаой водой иj«j на цен трифуге. Водньш экстракт высушивают лиофильно, а нерао творимый осадок откидывают. После иисфильной сушки препарат имеет вид порошка кремового даета, хорошо растворимого в- воДе. . ...... Активность препарата в среднем составляет 500000 ед. Определяют ее по следующей методике. В 1{Ю мл молока вносят 1 мл 15%-ного раствора GtCS g , берут 10 мл в пробирку, нагревают до 35 и вносят 5 мл нативной культуральной жидкости. В мов«ент втесешя культуральной жидкости включают секундомер и активность фермента определяется по времени образования плотного cryctKaj, Таким же способом определяют активность препарата, при этом к 10 мл молока добавляют 1 мл 0,1%- ного водного раствора препарата. Пересчет активности молокосвертьшающего фермента в условные единицы проводят по методаке Д. Я. Типографа и Т. А. Петшюй . За одну усповуую единицу актавности принимают количество фермента, необходимое для свертывания 100 мл молока 1 мл культуральной жидкости или 1 мл 0,1%-ного водного раствора препарата при и рН 6,0 за 40 мин. Препарат сохраняет активность в замороженном состоянии около года, при - более четырех месяцев. При нагревании до активность падает в 10 раз. П зедлагаемый штамм базидиального гриба HossuCa decoEo.ran.s 2 может быть использован для получеНИН молокосвертьшающего препарата Руссулин, который может заменить ферментный препарат аналогичного действия Реннин животного происхождения. Формула изобретения 1.Способ получения молокосвертьшающего ферментного препарата путем культивирования его продуцентов на жидкий питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, споследующим выделением фермента из куЛьтуральной жидкости, отличающийся тем, что, с целью более активного фермента из продуцентов спользуют базидкальные грибы вида R у s 5 и € а decoCorans. 2.Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что извида Iu$su6o decoSoraiTis используют штамм 2. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе: L Прикладная биохимия и микробиология, 1966, т. 2, , с. 417.