Способ получения вакцины против чумы плотоядных "вакчум" Советский патент 1977 года по МПК C12K5/00 

Иэобрегение относится к биологической промышленности.

Известен способ-получения- вакцины против чумы плотоядных, включающий адаптацию вакционного вируса к культуре ткани и выращивание на ней вируса с последующим (Высушиванием защитной среде.

Недостатком известного способа является использование культур тканей почек собак или куриных f эмбрионов, так как вакцина, приготовленная ни культуре ткани почек собак, может быть контамирована вирусами, патогенными для пушных : зверей. Кроме того оба вида вакцин не обладают высокой стандартностью, что связано с отсутствием возможности получать от одной культуры (т. е. от культуда, полученной от одного животного) крупные сборы совершенно однообразной по своим характерисгиЛам вакцины с минимальными затрата- ми на проведение биологической контрольной проверки пригодности каждого источника культур ткани.

Целью изобретения является получение вакцины с высокой стандартностью, не содержащей вирусов, патогенных для пушных зверей, а также повышение выхода вакцины.

Достигается это путем использования вируса штамма Рокборн, адаптацию и выррщивание которого проводят на культуре клеток почечной ткани зеленых мартышек с двух - пятикратным сбором вируссодержа щей культуральной жидкости и с последукх. щейее стабилизацией. Способ осуществляют следующим образом.

-Адаптацию агтенуированного штамма Рокборнвируса чумы плотоядных к куяьтуре почечной ткани зеленых мартышек проводят в течение 8-1О пассажей njM температуре 34+0,2 С, поводя инкубационный период развития вируса до 4-5 дней. На основе адаптированного ,1 вируса готовят посевной вирус.

Система посевного вируса предусматривает приготовление в большом объеме вакц11Нного вируса, отвечающего всем требованиям аттенуированного штамма, сохранение его в жидком азоте и использование по мере необходимости для изготовления пакцины. Для производства вакцины испояь:э уют культуру клетюк почечной ткани зеленых мартышек, как свежегрипсинизироввнную, гак и после охранения i в жидком азоте. Выращивание вакционвого виутуса в уха- аанных культурах ведут при т-емпературе 34+0,2 С на подходящих средах, таких как О,5%-мый гидролнзат лактвльбумина на растворе Эрла с добавлением 5% коровьей сыворотки. Вируссодержаигую жидкость удаляют 3-5 раз, -заменяй ее свежей питательной средой, причем первое удаление производят после . тэявления цитопатолсги ческих изменений в ЗО-40%клеток, и повторяют 8гу операцию до полной дегенерании клеток. Сборы вирусе о держащей жидкости объеди няют, освобождают or детрита любым известным методом, HanpiMep, методом остаивания с последующей декантацией, или на сенарагоре, или с помощью низкоскоростного центрифугирования. Для стабилизации вируса к полученной вируссодержащей жидкости добавляют полхо дящий стабилизатор, HanpiMep 4,5-5,5 вес,% сорбита и 1,4-1,66 вес,% желатозы, и ее лиофильной сушке Все этапы процесса изготовления вак- цины (Вакчум) проврдят в стерильньгх усао ВИЯХ. Препарат, полученный после лиофилизаций подвергают биологическим испытаниям, и при получении благо Пи лучн1,1х результатов рат считают .вакциной, готовой к йспользованиЕО. Высокая иммуногенносгь и низкая реактогеннос1ъ вакцины гарантируются благодаря условиям адаптации, при которьгх ИОЛНОСТЬЮ СОХРАНЯЮТСЯ ЯТТ«Н Я «1ВТНт е свойства штямма, его высокая иммурюпо- гивеская э Ы1ективность и низкая ряяктогенВысокая стандартность Вакуума обеспечивается способом его получения, дающим большой выход ггрепарата - ог 100 тысяч до 2 миллионов прививочных , доз в одной серии. Полученная вакцина содержит минимвЛ1 ное количество посторонних белков, что исклкочает аллергические реакции у жнвоттлх, и не содержит вирусов контаминантов, патогенных для зверей. Преимуществом предлагаемого способе производства является возможность йспользова1шя культур клеток почечной теани зеленых мартышек, по разнь М причинам отбракованных при изготовлении прогивополиомиелитной вакцины, но вполне пригодных для производства Вакчум; это значительно снижает себестоимость препарата. Формула изобретения -Способ получения вакцины против чумы плотоядных, включающий адаптацию вакцио& ного Biipjca к культуре ткани и выращивание на Ней вируса с последующим высушиванием S защитной среде, отличаю щи йся тем, чтор с целью повыщениа стандартности, им му ноге иное ги и выхода вакцины, для ее получения используют вирус.штамма Рокборн адаптацию и выраашвание которого проводят на культуре клеток почечных тканей зеленых мар1-ышек-с тик ратным сбором ви Ссодергкащей кугЕыуральной жидкости и с иоследу-ощей ее стабилизацией.