Способ выделения аденозина Советский патент 1977 года по МПК C07H19/16 

(54) СПОСОБ ВЫДЕПЕНИЯ АДЕНОЗИНА

1

Изобретение относится к способу выделения нуклеозидов. Аденозин является предшественником биологически важных соединений и как составное рибонуклеиновых кислот входит в состав живых организмов. Аденозин применяется для синтеза физиологически активных веществ.

Известны способы вьщеления аденозина из гидропизатов РНК хроматографическим способом { i Известны также способы получения аденозина селективным осаждением его из смесей с другими нуклеозидами в виде серебряных солей, пикратов 2.

Известен способ вьщеления аденозина ионообменной хроматографией и после осаждения из водного раствора гидролизата РНК остальных нуклеозидов в виде труднорастворимых солей кальция при рН 12,5 добавлением гидроокиси натрия. Выход аденозина 78%, чистота 96,5% З.

Недостатками известных способов вьщеления аденозина являются сравнительно низки выходы, низкая чистота целевого продукта и сложность проведения процесса вьщеления.

Цель изобретения - упрощение процесса.

Для этого по предлагаемому способу выделения аденозина, в раствор смесей пуриновых и пиримидиновых нуклеозидов вводят гидроокиси щелочных металлов или аммония до установления рН среды 9,3 - 11,3 и выдерживают при О-(+5) С Е течение 48-72 ч. В этих условиях образуются растворимые соли гуанозина и уридина, а аденозин выпадает в осадок.

Предлагаемый способ изменяет последовательность осаждения: при переводе гуанозина в ионную форму, т.е. в форму легко растворимых солей натрия, калия, аммония, разница растворимости аденозина-гуанозина увеличивается настолько, что становится возможным осаждение хроматографически чистого аденозина, а в растворе остаются соли гуанозина, уридина и цитидина. Щелочные агенты - гидроокиси калия, натрия и аммони выступают в качестве образующих растворимые соли гуанозина и уридина. Питидин растворим в нейтральной форме из-за хорошей растворимости в воде. рН среды 9,311,3 обеспечивает осаждение чистого аденозина, при рН выше 11,3 начинается образование его солей. Образование системы избирательного осаждения аденозина обеспечивает увеличивание выхода и чистоты целевого продукта, упрощает процесс вьщеления. Предлагаемый способ позволяет вьщелить аденозин с 88- 90%-ным выходом и с 99,6-99,8%-ной чистотой. Пример 1. К 5О МП водного раствора, содержащего 4,5 г аденозина и 0,5 г гуанозина добавляют 2О%-ный водный раствор гидроокиси натрия до установления рН в интервале 9,3-9,5 и вьщерживают 48 час при 0-(+5) С. Осадок фильтруют, промывают деминерализованной водой, этиловым спиртом к диэтиловым эфиром. Получают 4,05 г (90%) хроматографически чистого аденозина содержание основного вещества 99,6-99,8% R 0,75,SjfiufoB UV 254 (изопропиловый спирт: концентрированная гидроокись ам мония: вода 7:1:2 (система А). Пример 2. К 100 мл водного раст вора гидролизата РНК после отделения основного количества гуанозина, содержащего 11,4 г аденозина и примесей гуанозина, цитидина и уридина добавляют концентрированную гидроокись аммония и устанавливают рН в интервале 10,0-10,3 и вьщерживают в закрытом сосуде 72 час при 0-(+5)°С. Осадок фильтруют, промывают деминерализированной водой, этиловым спиртом и диэтиловым эфиром. Получено 10,2 (87,0%) хроматографически чистого аденозина, содержание основного вещества 99,6%, R 0,74, SigufoO UV 254 (система А). Формула изобретения Способ вьщеления аденозина из водного раствора смесей пуриновых и пиримидиновых нуклеозидов в присутствии щелочных агентов, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, увеличения выхода и чистоты продукта, в раствор вводят гидроокиси щелочных металлов или аммония до установления рН среды в интервале 9,311,3 и выдерживают при (О)-(+5) в течение 48-72 час. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе: 1.C.Waetehnack, H.ReJubothe. ЪеинuMg voH NucBeinsaurebausteiiien und ihren Sti uktuhcfHoBogen аи Sephadex G-IO. J.&i omoitogf., 1970,48(3), 551. 2.H.5.Lohiiig,J.L.,H.W.Bortnefi,H.L. SeagKan. Aspecifiophotometn-ic method forthe 01иа6уй 3 of the риише and pyt lnJidine coMipoMChtS of f ifconucfie c acid .Chein., 19г(а,809,195а. 3. Патент Японии № 6063-71,кл. 16Е461. 15.11.68.