Способ получения смеси рибонуклеозид-2 @ и 3 @ -монофосфатов Советский патент 1989 года по МПК C07H19/20 

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения смеси рибонуклеозид-. и 3 -монофосфатов щелочным гидролизом природной РНК и может быть использовано в биохимии, медицине и фармацевтике.

Цель изобретения - упрощение процесса, повышение его безопасности и защита окружающей среды использованием гидроокиси кальция в качестве реагента для гидролиза в установленном молярном соотношении.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Смесь рибонуклеозид-2 и 3 -монофосфатов.

Суспендируют 100 г РНК (содержание органического фосфора 7,5%) в 250 мл воды и при перемешивании прибавляют суспензию 35,8 г (2 моль)

гидроокиси кальция в 50 мл воды. Реакционную смесь выдерживают 1 ч при . Охлаждают до 5-10°С, отфильтровывают образовавшийся осадок и промывают на фильтре 30 мл насыщенного раствора гидроокиси кальция. Выход 8А,ОА г (содержание основного вещества, определенное по методу А.С. Спирина, ) .

Анализ смеси рибонуклеозид-2 и 3 -монофосфатов на содержание аде- нозин-2 (3)-монофосфата, гуанозин- -2 (3)-монофосфата, цитидин-2 (З )- -монофосфата и уридин-2 (3)-монофосфата проводился на жидкостном хроматографе Varian 8500 на анионообмен- ной колонке Micro Pak АХ-5, элюент - фосфатный буфер/ацетонитрил (2S нм) путем расчета компонентов по площади

СП

to

ел

о:

регистрируемых пиков (по сравнению со стандартами).

Осадок содержит, ммоль: гуанозин- -2 (3 )-монофосфата б5 ммоль, аденр- зин-2 (3)-монофосфата 60 уридин-2 (3 )-монофосфата 67 цитидин-2 (3 )- -монофосфата 50

Примеры 2-4, в которых выяснялось влияние температуры времени и количества реагента на выход и качество целевого продукта, осуществляли в аналогичных условиях (см.таблицу) .

Пример 5.В 50-литровый стеклянный реактор Simax загружают 30 л деминерализованной воды и при перемешивании дозируют 10 кг РНК (содержание органического фосфора в РНК 7,5) К суспензии по порциям прибавляют 1,1 кг (2,29 моль) гидроокиси кальция, выдерживают при перемешивании 1б ч при 20°С. Реакционную смесь подают на нутч-фильтр и отфильтровы- вают образовавшийся осадок. Осадок промывают на фильтре 2,5 л воды и сушат при . Выход 8,32 кг (содержание основного вещества 95%).

Пример 6. Суспендируют 100 г РНК-содержащего материала, полученного экстракцией биомассы дрожжей белково-витаминного комплекса (содер

5

о

5

0

жание органического фосфора 1,3, РНК 13,8%) в 250 мл воды. К суспензии добавляют при перемешивании 6,58 г (2 моль) гидроокиси кальция, суспендированной в 20 мл воды. Реакционную смесь выдерживают 1 ч при 1 ч охлаждают до 5-10 С, выдерживают при этой температуре 6 ч, осадок отфильтровывают. Выход 1б,15 г (содержание основного вещества 90%).

Таким образом, данный способ позволяет в несложных технологических условиях достигать высокого выхода и чистоты целевого продукта при исключении операций сорбции на угле и упаривания, а также работы с токсичным метанолом. Формула изобретения

Способ получения смеси рибонукле- озид-2 , и 3 -монофосфатов путем обработки водной суспензии исходного сырья, содержащего рибонуклеиновую кислоту (РНК), щелочным агентом, о т- личающийся тем, что, с целью упрощения процесса, повышения его безопасности и защиты окружающей среды, в качестве щелочного агента используют гидроокись кальция в молярном соотношении гидроокиси кальция к органическому фосфору РНК, равном 2-2,5:1.

Изобретение относится к нуклеозидам, в частности к получению смеси рибонуклеозид-2¹, и 3¹-монофосфатов, которые могут быть использованы в биохимии, медицине и фармацевтике. Цель - упрощение процесса, повышение его безопасности и защита окружающей среды. Получение целевой смеси ведут обработкой водной суспензии исходного сырья, содержащего рибонуклеиновую кислоту /РНК/ гидроокисью кальция. Процесс ведут в молярном соотношении гидроокиси кальция и органического фосфора РНК : 2-2,5:1. Способ позволяет в несложных технологических условиях получить продукт высокого выхода и чистоты при исключении сорбции на угле и упаривания, а также работы с токсичным метанолом. 1 табл.