Способ получения диагностикума Советский патент 1977 года по МПК A61K35/18 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИКУМА

Изобретение относится к медицине, а именно иммунологии.

Известен способ получения дифтерийного диагностикума, заключающийся в том, что эритроциты обрабатывают формалином, отмывают физиологическим раствором, обрабатывают дубильной кислотой, отмывают танизированные эритроциты, сенсибилизируют анатоксином и фиксируют формальдегидом 1.

Известен также способ получения столбнячного диагностикума, заключающийся в тех же операциях 2. Способ получения столбнячного диагностикума отличается от способа получения дифтерийного диагностикума только технологическими режимами в соответствии со специфическими особенностями препарата.

Однако эти способы не обеспечивают высокой чувствительности, специфичности и стабильности .препарата.

Целью изобретения является повышение чувствительности, специфичности и стабильности препарата.

Для этого формалинизированные эритроциты обрабатывают детергентом до и после танизации, а для сенсибилизации используют прогретую фракцию анатоксина, выделенную путем молекулярного фильтрования через мембраны ХМ-300, XAVIOOA и РМ-30 «Диафло.

Повышение способности сенсибилизировать эритроциты у коммерческих очищенных препаратов анатоксинов и их специфических компонентов достигается в результате предварительного прогревания их при температуре 60 65° С в течение 30-60 мин с последующим быстрым охлаждением при 0° С в смеси воды и льда.

В качестве сенситинов используют молекулярнооднородные белковые компоненты дифтерийного или столбнячного анатоксинов, извлеченные из препаратов анатоксинов посредством молекулярной фильтрации с мембранами ХМ-300, ХМ-100А, РМ-30 «Диафло.

Пример. Формалинизированные эритроциты барана или лошади последовательно отмывают нейтральным 0,85/о.,-ным раствором хлорида натрия, затем раствором твина, снова 0,85% ным раствором хлорида натрия. Полученный осадок ресуспендируют и соединяют с изотоническим раствором, в котором растворена дубильная кислота. После контакта эритроциты осаждают, осадок промывают 0,85%-ным раствором хлорида натрия с детергентом (твином), затем без детергента. Ресуспендированные эритроциты соединяют с анатоксином или специфическим ко.мпонентом его для взаимодействия в тепле в течение 4-5 ч. Затем в смесь

добавляют формальдегид, последующее отмывание эритроцитов и хранение готового препарата производят в присутствии формальдегида. Аналогичным образом, минуя ли1иь обработку эритроцитов анатоксином, готовят контрольный препарат.

После проверки готовой серии диагностикума в РПГА со стандартной сывороткой эритроциты осаждают, доводят до 10-50°/о-ной густоты наполнителем, быстро замораживают и лиофилизируют. Наполнителем служит раствор «Гемодез, разведенный до концентрации поливинилпирролидона ,5°/о, с добавлением сахарозы до концентрации 7,5°/о. Температура замораживания будет - 60, 70° С. Продолжительность высушивания - 30-35 ч при постепенном повышении температуры до 20° С. Ампулы и флаконы герметизируют под вакуумом.

Перед употреблением содержимое ампулы (флакона) разводят нейтральным 0,85/о-ным раствором хлорида натрия с формалином и проверяют специфическую активность готового препарата в РПГА со стандартной противодифтерийной или противостолбнячной антитоксической сывороткой.

Формула изобретения

Способ получения диагностикума, заключающийся в том, что эритроциты обрабатывают формалином, отмывают физиологическим раствором, обрабатывают дубильной кислотой, отмывают танизированные эритроциты, сенсибилизируют анатоксином и фиксируют формальдегидом, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности, специфичности и стабильности препарата, формалинизированные эритроциты обрабатывают детергентом до и после танизации, а для сенсибилизации используют прогретую фракцию анатоксина, выделенную путем молекулярного фильтрования через мембраны ХМ-300, XM-IOOA и РМ-30 «Диафло.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

2.Лабораторный регламент № 13, 1974.