Способ получения дидезоксинуклеозидфосфатов Советский патент 1978 года по МПК C07H19/06 

R-СНз; -ОСоН,; -ос сн.

сн. заключающийся в том, что защищенный соответств ющий дезоксинуКлеозид подвергают взаимадействию с фасфорилирующим агентом общей формулы II В-Р()2 О ОЕ1li в среде абсолютного диоксана и в присутствии следов пир.идина с последующим снятием защитных групп. Реакцию проводят при комнатной температуре в течение 1-2 ч в среде абсолютного диокеана. В результате реакции в качестве побочного продукта образуется этилацетат, который не взаимодействует с исходным нуклеозидом .и не дает ника.ких побочных продуктов. Образов.--С -3 - 5 природной межнуклеотидной связи достигается за счет различной реакционной способности двух а-алкоксивиниловых групп фосфорилирующего агента. Выход динуклеозидфосфата 80-85%. Строение лолученных веществ подтверждено хроматографическими данлыми. Наличие 3 природной м.ежнуклеот.идной связи в синтезированных динуклеозидфосфатах подтверждается ферментативным гидролизом фосфодиэстеразой змеиного яда. Пример. 51 мг (0,1 ммоль} монометокситритилдезокситимйдйна растворяют в 2-3 мл абсолютного диоксана, добавляют раствор

5 0,1 .«.моль сНзГ{ОС СНг)2 в абсолютном диоксане и 1-2 капли абсолютного пиридина и перемещивают при комнатной температуре в течение 20 мин. Затем в реакционную смесь добавляют 24 мг (0,1 ммоль) дезокситимидина в 5 ли абсолютного диоксана. Смесь перемещивают 1,5 ч при комнатной температуре. Диоксан упаривают, остаток обрабатывают 2%-ным раствором трифторуксусной кислоты в абсолютном бензоле для удаления монометокситритильной защиты. Остаток трифторуксусной кислоты удаляют многократным упариванием с метанолом на роторном испарителе. Остаток разбавляют водой и хроматографируют. Выход дидезоксинуклеозидфосфатя после элюции соответствующих веществ с хроматограммы водой 82%. Соединения II-IV (приведены в таблице) получены в аналогичных условиях. Для получения соединения П. при использовании ди- (а-алкокоивин,ил) -изопропенилфосфата, изопропенильная группа удаляется действием 0,01 н. раствора фосфорной кислоты при комнатной температуре в течение 5 м.ин. Хроматографические данные и данные ферментативного гидролиза полученных динуклеозидфосфатов приведены в таблице.

И И

IV

.Примечание. Система А: изопропанол - аммиак - вода 7:1:2; В: бутанол сусная кислота - вода 5:2:3; С: этанол - 1М ащетат аммония 7:3. Литературные данные: Система А: RfO,34;B: RfO,32.

Фор мул а изобретенияi

Способ получения дидезоксинуклеозидфосфатов общей формулы

ук®®

-f-Oo II

-р-огде N - тимин или аденинрадикал;

,

сн,

iвзaимoдeйcтвиeм защищенных соответствующих дезоксинуклеозидов с фосфорилирующим агентом, с последующим снятием защитных групп, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса и иовышения выхода цел-евого продукта, в качестве фосфорилирующего агента используют соединение общей формулы

к-р(ос ш,ь

о OEi.li

где R имеет приведенные выше значения,

и процесс ведут в среде абсолютного диоксана в присутствии следов пиридина.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

ЖОХ, 4, 379, 1973.

3.G. Reitz, W. Pfleiderer, Chem. Ber. «Синтез и свойства О-бензилзамещенных диуридилфосфатов. 108, 2878, 1975.