Прлизводные 3- ( -бензохинонилимино) -4-оксо-3,4-дигидротиено (2,3- ) пиримидина, обладающие противовирусным дествием Советский патент 1980 года по МПК C07D495/04 A61K31/519 

VrY, (п) Кг $ N Нз где RI и 2 имеет указанные выше значения, подвергают взаимодействню с п-бензохиноном и уксусной кислоте. Исходные соединения,используемые в данном процессе,описаны в литературе или их получаю известными способами. Конденсацию вышеуказанных исходньи соеди нений можно проводить как при Комнатной тем пературе, так и при нагревании до 118° С. В данном процессе обьино используют уксусную кислоту с концентрацией от 40 до 100%. Предпочтительно процесс проводить при8090°С с использованием 60%-ной водной уксусной кислоты. При этом выход целевых продуктов ;составляет 60-86%.v . Использование уксусной кислоты в данном процессе является необходимым условием, т.к. она играет спе1щфическу1о роль, поскольку в других растворителях некислотного характера, например, диоксане, водном диоксане, дихлорэтане, реакцию провести не удается. Реакция про ходит с наибольшим Вькодом при использовани 60%-ной водной уксусной кислоть, при проведении реакции в ледяной уксусной кислоте выход производных 3- (п-бензохинонилимино) -4-оксо-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидина общей формулы 1 снижается до 30%, а при использовании более разбавленной уксусной кислоты (40%,50%) до 20-30%.. При проведении кон а;енсации производных 2:-метш1-3-амино-4-рксо-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидина общей формулы II с п-бёнзохино, ном целесообразно брать избьггок последнего, предпочтительно трехкратный. В случае использования молярных соотношений исходных соеди нений или двз кратного избытка п-бензохйнона вьтход конечного продукта понижается соответственно до 50-55%, а при использовании четырехкратного избытка п-бензохйнона выход не пЬйы1и1ается. Нижейтёдующие примеры иллюстрируют получение соединений формулы . Пример 1. Ацетат 2,5,6-трИметип-3-(п-.бензохинонилимино) -4-оксо-3,4-дигидротиено . (2,3-d) пиримидина. , К раствору 8,1 г (0,075 мол.) п-бензохинон в 30 МП уксусной кислоты при перем шивании при 80-90° С прибавляют раствор 5 г (0,025 мол) 2,5,6-триметил-3-а|мошо-4-оксо-3,4-дигидротиено (2,3-d)пиримидина в 50 мл 60% ной уксусной кислоты, нагретьш до 80-90° С, Реакционную массу оставляют стоять 20 часов при комнатной Температуре. Вьщелившийся осадок вышеуказанного ацетата отфильтровывают, промывают 60%-ной уксусной кислотой, сушат. Выход целевого продукта 6,6 г (72%). т.пл. 190-191°С с разложением (уксусная кислота). Спектр ПМР: (CDCIj) 5 м.д. 2,37; 2,41; 2,47; (9Н, синглеты, 2,5,6-СНз), 2,06 (4Н, синглет, СНзСООН), 6,48; 6,69; 6,9; 7,47 (4Н, квартеты, 3-хинонилимино). ИК-спектр, Imax, 1690 (). Уф-спектр, rnax, нм (IgE) : 221(4,38); 270(4,41), 445(3,19) . Найдено%: С 56,46; Н 4,84; N 11,68; 39,25, С,7Н17Мз8О4. ВычисЛено%: С 56,81; Н 4,77; N 11,69; S 8,92. П р и м е р 2. Ацетат 2-метил-З- (п-бензохинонилимино)-4-оксо-6-этил-3,4-дигидротиено. (2,3-d) пиримидина. К pacTiBopy 30,2 г (0,28 мол.) п-бензохинона в 200 мл 60%-ной уксусной кислоты при переМееиивании при 80-90° С прибавляют раствор 20 г (0,096 мол.) 2-метил-3-амино-4-оксо-б-этил-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидина в 200 мл60%-ной уксусной кислоты, нагретый до 80- 90°С. Реакцию и выделегше вещества проводят в условиях примера 1. Выхой целевого продукта 28,6 г (83%), т.пл. 161-162° С с разложением (уксусная кислота).., Спектр ПМР: (ССЦ), б м.д: 7,08 (1Н, синглет, 5Н), 2,87 (2Н, квартет, б-СПг), 1,32 (ЗН, триплет, 6-СНз), 2,41 (ЗН, синглет, 2-СНз), 1,9 (4Н, синглет, СНзСООН), 6,46; 6,93; 7,59; 8,03 (4Н, квартеты, 3-хинонилимино). ИК-спектр, imax : 1690 (). . Уф-спектр, Хтах, нм ( ): 221 (4,43); 270(4,43); 430 (3,21). НайденЬ,%: С 57; Н 4,78; N 11,29; S 8,85. С,7Н17Мз504. Вычислено,%: С 5ё,81; Н 4,77; N11,69; S 8,92. Примерз. Ацетат 2-метил-З-(п-.бензокинонилимино) -4-оксо-5-фенш1-3,4-дигидротиено (2,3-d)пиpимидIffla. К раствору 9,72 (0,09 мол) п-бензохинона в 36 мл 60%-нОй уксусной кислоты при перемегш1вании при 80-90°С прибавляют раствор 6,75 г (0,03 мол.) .2-метш1-3-амшю-4-оксо-5-фенил-3,4дигидротиено (2,3-о) пиримидина в 70 мл 60%ной уксусной кислоты, нагретый до 80-90° С. Реакцию и вьщ(глениё вещества проводит в ВИЯХ примера 1.. Выход целевого продукта 7,3 г (60%), т.Ш1. 121-122°С с разложением (уксусная кислота). Спектр ПМР: (ССЦ) 5 м.Д: 7,38 (Ш,,синглет. -Н), 7,26 -г- 7,49 (5Н, мультиплет, 5-Ph),2;42

(ЗН, синглег, 2-СНз) 6,41; 6,69; 7,11; 7,53 (4Н, квартеты, 3-хинонилимино), 1,89 (4Н, синглеты, СНзСООН).

ИК-спектр, Сщах, 1690 ().

УФ-спектр, Хтах, нм ( ) : 252 (4,43); 5 270 (4,40); 436 (3,21).

Найдено,%: С 64,05; Н 4,15; N 10,70; S8,3g.

C2iHi7N3SO4.

Вычислено,%: С 63,64; Н 4,03; N 11,13; S 8,49.10

П р и м е р 4. 2-метш1-3-(п-бензохинонилимино)-4-9ксо-5-фенил-6-метил-3,4-дигидротиено(2,3-d) пиримидин.

К раствору 9,72 г (0,09 мол) п-бензохинона в 36 мл 60%-ной уксусной кислоты при переме- 15 шивании при 80-90° С прибавляют раствор 8 г (0,03 мол) 2-метил-3-амино-4-оксо-5-фенил-6-мегил-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидина в 160 мл 60%-ной уксусной кислоты, нагретый до 80-90°С. Реакцию и выделение вещества про- 20 водят в условиях примера 1.

Выход целевого продукта 11,7 г (83%) ,Т.ГО1. 179-180°С с разложением (уксусная кислота)/

Спектр ПМР: (CDCIa), 5 м.д.: 2,35 (ЗН,синглет, 2-СНз), 2,45 (ЗН, синглет, 6-СНз), 6,36; 25 6,59; 6,83; 7,43 (4Н, квартеты, 3-хинонилимино), 7,3-,5 (5Н, мультиплет, 5-Ph).

ИК-спектр, fmax. 1700 ().

Уф-спектор, Хтах. нм (5- ) : 228 (4,43); 268 (4,43); 272 (4,21); 440 (3,20).

Найдено,%: С 66,35; Н 4,40; N ll,07; 88,70. - СгоНиНзЗОг.

Вычислено,%: С 66,46; Н 4,18; N11,63; 88,87.

П р и м е р 5. Ацетат 2-метил-3-(п-бензохинонилимино)-4-оксо-5,5-тpимeтшIeн-3,4-диrидpoтибнo (2,3-d) пиримидина.

К раствбру 4,2 г (0,039 мол) п-бензохинона в 20 мл 60%-ной уксусной кислоты при переме- i шивании при 80-90° С прибавляют раствор 2,9 г (0,013 мол) 2-метил-3-амино-4-оксо-5,6-триметилен-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидина в 35 мл 60%-ной уксусной кислоты, нагретый до 80-90С. Реакцию и выделение вещества проводят в условиях примера 1..

Выход целевого продухста 3,9 г (80%), 1.пл. 198-199 С с разложением (уксусная кислота). Спектр ПМР: (СОС1з),5 м.д.: 2,47 (ЗН, сйн- глет, 2-СНз), 2,06 (4Н, синглет, СНэСООН), 2,95 (6Н, триплет, 5,6-(СН2)з, 6,43; 6,76; 6,97; 7,48 (4Н, квартеты, 3-хинонилимино).

ИК-спектр, tmax. 1690 ().

УФ-спектр, Xmax, нм ( ) : 218 (4,33); 273 (4,39); 446 (3,17).

Найдено,%: С 58,37; Н 4,10; N 11.69; 88,37

C,8Hj7N3S04.

Вь1ЧИслено,%:-С 58,21; Н 4,61; N11,31; 88,63.

П р и м е р 6. Ацетат 2-метил-3-(п-бензохйнонилимино)-4-оксо-5,6-тетраметилен-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидина.

К раствору 9,72 г (0,09 мол) п-бензохинона в 36 мл 60%-ной уксусной кислоты при переме шивании при 80-90° С прибавляют раствор 6,63 г (0,03 мол) 2-метил-3-амино-4-оксо-5,6-тетраметилен-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидина, в 66 мл 60%-ной уксусной кислоты, нагретый до 80-90°С. Реакцию и выделение вещества проводят в условиях примера 1. .

Выход целевого продукта 9,9 г (86,7%); т.пл. 164-165°С с разложением (уксусная кис-лота).

Спектр ПМР: (СОС1з), 5 м.д. 1,84; 2,75; 2,95; (8Н, мультиплеты, 5,6 (СН2)4, 2,46 (ЗН, синглет, 2-СНз), 6,46; 6,69; 6,94; 7,46 (4Н, квартеты, З-хинонилимино); 2,06 (4Н, скнглет, СНзСООН).

ИК-спектр, Imax, 1690 ().

УФ-спектр, Хтах нм (S) : 221 (4,35); 270 (4,38); 300 (4,25); 446 (3,19).

Найдено,%: С 58,99; Н 4,98; N 10,70; 88,31.

C,9Hi9N3S04.

Вычислено,%: С 59,20; Н 4,97; N 10,90; 8 8,32.

Все соединения - производные 3- (п-бензохинонштимино)-4-оксо-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидина обладают противовирусным действием

Соединения этой группы бьти изучены в опытах in. vitro с вирусом гриппа A/PR 8/34 (HON1).

Вещества в концентрации 1000 : 100 и 10 мкг/мл соединяют с 1,10 и 100,50%-ными змбриональными инфекционными дозами вируса (ЭИДзо). После часового контакта в пробирках при +14° С смесями заражают 9-ти дневные суриные эмбрионы в аллантоиснзто полость. Через 48 часов инкубации при 37° С результаты учитьюают в реакции гемагЫютинации. Результаты испытаний приведены в таблице .

Как видно из таблицы все вещества зтой групы обладают выраженным противовирусным (вируцидным) действием в концентрации от 10 до 1000 мкг/мл и инактивируют 3,6-10 . ЭИД50 вируса гриппа.

Токсичность веществ изучена на 135 белых беспородньи мыЩах весом 20 г.

Вещества вводят per os в 0,5 мл 1% крахмаль кого геля ежедневно 1 раз в день в течение 5 дней. Вещества (1,2,3,5,6) переносятся без побочных явлений и не вызьгаают гибели живоФ ных в дозах 125-2000 мг/кг. L PSO для мышей составляет 4000 мг/кг веса животного.

Для соединения N 4 - полуацетат 2-метил-3(п-бензохинониламина)-4-оксо-5-фенил-3,4-дигидротиено- (2,3-d) пиримидина-максимально переносимая доза составляет 500 мг/кг. L DJ.Q 1000 мг/кг. Таким образом, большинство изученных соединений этой химической группы мало токсичны Химиотерапевтическая активность веществ in vivo изучена на модели гриппозной пневмонии мышей, вызванной вирусом гриппа А 2 (Бетезда (Н2 N2). Вещества вводят per os в объеме 0,5 мл 1%-ного крахмального геля за 1 час до заражения и далее ежедневно 1 раз в день в течение 4 даей. Так, пр1гдварительное изучение соединения № 3 - ацетат 2-метил-3-(п-бензохинонилимино)-4-оксо-6-этил-3,4-дигидротиено (2,3-d)пиримидина, проведенное на 100 мышах, зараженны одной 80%-ной летальной дозой гриппа (lUUg о), показало, что вешество, введенное вышеуказанным способом, обеспечивает 100%-ную выживаемость мышей при использовании вещест ва в дозе 2000 мг/кг и 50%-ную выживаемость в дозе 1000 мг/кг. Предварительное изучение соединения № 1 ацетат 2,5,6-триметил-З- (п-бензохинонилимино) -4-оксо-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидина, проведенное на 140 мышах, показало, что вешество в дозе 2000 мг/кг предохраняет от гибели 50% мьш1ей при зарам ении ILfljo. в меньших дозах (1000, 500 и 200 кг/кг) не оказывает химиотерапевтического действия. Соеплнение № 6 - 2,6-диметил-З-(п-бензохиноншшмино) - 4-оксо- 5- фенил- 3,4-дигидрртиено (2,3-d) пиримидина в дозе 4000 мг/кг химиотерапевтического действия не оказывает. При сравнении с известным противовирусным Препаратом теброфеп (3,5,3 5-тетрабром-2,4-24-тетраоксидифенил) заявленные соединения обладают меньшей токсичностью. Максимально переносимая доза теброфена для белых беспородных мышей при внутримышечном введении 1 раз в день в течение 7 ;щей составляет 60 мг/кг - L Ддо равна 125 мг/кг. Вирушвдная активность заявляемых соединений сходна с вируш1дной активность теброфена 4. Кроме того, теброфен в опытах in vivo с лечением пневмонии мышей, вызванной вирусом гриппа, не обладает химиотерапевтическим дей-, ствием при введении его в максимально переносимой и меньших дозах. Среди заявленных соединений 2 вещества N 3 (Ацетат 2-метил-З- (п-бензохиионилимино)-4-ок сй-6-этил-3,4-дигидротиено (2,3-d) пиримидин и № I (Ацетат 2,5,6-триметил-3-(п-бензохинонилимино) -4-оксо-3,4-дигидротиепо (2,3-d) пиримидина V оказывают химиотерапевтическое действие при гриппозной пневмонии мышей, что является их важным преимуществом перед теброфеном.

№N

Химическое на звание соеданения пп

Действующая концентрация соединения

100 мкг/мл

10 мкг/мл

1000 мкг/мл

Количество нейтрализованных ЭИДзо В1фуса григ1па

10

10

не акт.

10

не акт.

не акт.

10

10

10

10

не акт.

не акт.

3,6

не акт.

не акт.

10

10

не акт.

Формула изобретения

Производные 3- (п-бенэохинонилимино)-4-оксо-3,4-дигидротаено (2,3-d) пиримидина общей формулы

ИГ

гдеп 1,,

RI - водород, метил,

R2 - мепш, этил,

R, - фенил,

RI и R2 вместе могут озн тетраметилен, или п 1/2,

RI - фенил,

Ra - водород, ИЛИ п 0

fO

4

.R, - фенил, RZ - метил, обладающие противовирусным

действием.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе ,

5.Заявка ФРГ № 2429923, кл. С 07 D 207/50, 1975.