Штамм н1вт-2 Советский патент 1979 года по МПК A01N15/00 

Физиологическиепризнаки. Органическая среда для размножения - сухой питательный агар (СПА) в концентрации 3,5-5,0%. Колонии в R-форме, слегка выпуклые кремового цвета. Диаметры колоний 5-суточной культуры могут достигать 0,8-1,2 см. Пигмента не образует.

Питательный бульон. Помутнение слабое, затем просветление с образованием вуали через 48 ч, иногда на четвертые-шестые сутки.

Молоко лакмусовое. Пептонизация с- подшелачиваиием на поверхности (25-48 ч) , затем подкисление и редукция цвета. Коагуляция непостоянная, на третьи-четвертые сутки с частичным перевариванием. Переваривание сильное на шестые-восьмые сутки.

Картофель ломтиками. Культура сухая серо-кремовая.

Агар-желатина. Зона гидролиза 2-3 см через 48 ч.

Агар-казеин. Через 24 ч зона просветления частичная, но хорошо заметная.

Регламент ная дрожжеполисахаридная (ДОС) жидкая питательная среда, используемая для производства энтомоп.атогенных бактериальных препара- ; тов.Интенсивный рост наблюдается к i 10-14 ч культивирования при 28-30C.i Спорообразование наблюдается к 2Q-u 32 ч роста. Высыпание завершается к 36 ч роста без снижения подачи в ферментер воздуха. Титр жизнеспособных спор в культуральной жидкости; к концу культивирования на обедненштамма

ной ДПС (2% БВК +1% кукурузной муки) достигает 2-4 млрд/1 ш.

Отношение к источникам углерода. Усваивает глюкозу.,сахарозу,маннозу, целлобио ЗУ,глицерин,цитраты,оксалаты с выделением газа.Не усваивает маннит, дульдит инулин, арабинозу, лактозу, сорбит, ацетаты.

Отношение к фагам. Собственные фаги не продуцирует. Устойчив.к 5 основным производственным фагам , а также к вирулентным фагам типа , , , , И Fg 1.

Проявляет антогонизм к BaciEtus tkac nStCHSi thu Mflf n серотипам 2,4 и 5,

Для получения штамма Н1ВТ-2 использовали принцип фаговой конверсии. Ё качестве исходного штамма применяли интродуктивный штамм 5-го серотипа 69/6, на который воздействовали гомологичным фагом методом четырехкратной суперинфекции, следующих друг за другом четырех клеточных .поколений. Суперинфициро)вание осуществляли в условиях глубйнного культивирования в качалочных колбах с ДПС. Заражение фагом вели из расчета 2 фаговые частицы на 1 клетку в первом поколении, 20 фаговых Частиц на 1 клетку во втором 0 поколении, 50 фаговых частиц в

третьем поколении и 70 фаговых частиц в четвертом поколении.

В таблице представлены данные по лродуктивности штамма Н1ВТ-2 в сравне5 НИИ с данными по продуктивности штам 1ОВ 69/6 (родитель) и Е-61 (международный, эталон). Сравнительная характеристика продуктивности Н1ВТ-2 и штаммов 69/6 (родитель) и Е-61 (международный эталон)

3,0-4,0 1,2-1,8

1,5-2,0 1,2-1,8

0,008

ЧувсггвиFa-1Л . О,, 5 телен

Го же

0,3

Не проверяли

Fi 0,9 Как видно из таблицы, штамм Н1ВТ-2 отличается от родителя при.надлежностью к серотипу по Н-антигену и формой белковых кристаллов. Кроме того, штамм Н1ВТ-2 продуцирует на обедненной дрожжеполисахаридн среде до 3,0-4,0 млрд/мл КЖ жизнесп собных спор, т.е. вдвое более чем родитель-прототип и эталон. Штамм Н2ВТ-2 является фагоустойчивым, не продуцирует собственный вирулентный фаг и активнее штамма-эталона в 37 раз. Формула изобретения Щтамм. BcttiKus thwrtnoj-iensis var-l ifiUN-n9iewii HlBT-2 используется для Изготовления энтомопатогенны е5а1стериальньгх препаратов инсектина и Комби,применяемых против насе комых-вредителей сельскохозяйственных культур и леса. Хранится в колл ции ВНИИбакпрепарат. Морфологические признаки. Величи на клеток в экспоненциальной фазе азвития на агаре типа СПА равна 4,5x2,0 мк. Преобладающая форма палочковидная. На жидких питательных средах в условиях глубинного культивирования клетки подвижны, BCipeчаются в виде коротких и длинных це пей, Перитрихи гpa шoлoжитeльны. В стационарной фазе развития образуют овальные споры размером 2,0x0,15 мк и такого же размера белковые кристаллы в виде правильных ромбов. По Н-анткгену штамм н1вт-2 относится к 1-му серотипу. Bqcifeeus thurificjiensls VQr.ihvrinqiemis. - - Физиологические признаки. Органи ческая среда для размножения-сухой питательный агар (СПА в концентрации 3,5-5,0.%) . Колонии в R-форме выпуклые кремового цвета. Диаметр к лоний 5-суточной культуры может дос тигать 0,8-1,2 см.Пигмента не образует. Питательный бульон. Помутнение слабое, затем просветление с образо ванием вуали через 48 ч, иногда на четвертые-шестые сутки. Молоко лакмусовое. Пептонизация с подшелачиванием на поверхности (24-48 ч), затем подкисление и редукция цвета. Коагуляция непостоянная, на третьи-четвертые сутки с частичным перевариванием. Переваривание сильное на шестые-восьмые сутки. Картофель ломтиками. Культура сухая серо-кремовая. Агар желатина. Зона гидролиза 2-3 мм через 48 ч. Агар-казеин. Через 24 ч зона просветления частичная, хорошо заметная. Регламентная дрожжеполисахаридная жидкая питательная среда, используемая для производства энтонопатогенных бактериальных препаратов. Интенсивный рост наблюдается к 10-14 ч. культивирования при 28-30 С. Спорообразование наблюдается к 28-32. ч роста. Высыпание завершается к 36 ч роста без снижения подачи в ферментер воздуха. Титр жизнеспособных спор в культуральной жидкости к концу культивирования на обедненной ДПС (2% БВК+1% кукурузной муки) достигает 2-4 млрд/мл. Отношение к источникам углерода. Усваиваетглюкозу, сахарозу, маннозу, целлобиозу, глицерин, цитраты, оксалаты с выделением газа. Не усваивает маннит,рамнозу,дульцит,инулин,арабинозу, лактозу, сорбит и ацетаты. Отношение к фагам. Собственные фаги не продуцирует. Устойчив к 5 основным производственньм фагам, а также к вирулентным фагам типа , , , Fg 6, FQ 4 И Проявляет антогонизм к BaciPfuS tku tnctenSl.S . серотилам 2,4 и 5. Источники информации, принятые о внимание при экспертизе 1.Алешина О.А. и др. Биологический метод борьбы с вредителями и болезнями сельскохозяйственных растений, М.: Знание, 1975, с.33-37. 2. Авторское свидетельство СССР №343674, кл.А 01 N 15/00, 1963.