Штамм н5вт-121 Советский патент 1979 года по МПК A01N15/00 C12K3/00 

(54) ШТАММ BaciElos thurinp-iensis vcurg aeteriae НБВТ - 121 I-l5BT-.1.21s отвечающий всем тробопа-1ШЯМ, предъявляемым к лроизтзодствен ным штаммам-«лродуцентам энтобактерппа, т.е. в условяях глуб 1нного культи вировашш он не продуцирует вирулентны н позволяет получать продукцию вы сокого качества, Получешхый штамм Bc4CiE.K-U9 ttiuvin igr-iensis JQr-gfatbev-iae H5BT-121 пме ет следующие морфологическую и физио логическую харак1 еристики.. Морфологические признаки,. Величина клеток в экспонешшаяъиой фазе развития на агаре тина СПА равна 3,8 - 2,5 X Is - 2,0 мк„ Преобладающая форма палочковидная, На жидких питательных средах в условиях глубинног культивирования клетки подвижные, встр чаются в виде коротких и длинных цепей Перитрихиграмположительны, В период ста циочарной фазы развития образуют слоры ве Ч1-ГНОЙ в 1,5 - 1,8 мк и округлые энто моцидные кристаллы по H-anTHreiiy .штамм Н5ВТ-121 относится к се ротгагу, 5a-5б Физиqпoгичecкиe признаки. Органическая среда д;ш поддерживаю щей селешнии и размножения клоновых популяций - сухой питательный агар ти«па СПА. Колоши в К-форме плоские с неровными краями. Диаметр колонии 5-ти суточной ку;гьтуры 0,4 Оэб см Пигмент не образует. Питательный бульон. Всюду помутне.™ ние значительное, ос-адок на 3 - 5 сутк Молоко лакмусовое К 24 ч пептошь- зация и подщедачнванне, затем нодкисле ние и редукция молока. Коагуляция на 3-4 сутки, переваривание сильное коа1у лированная. сыворотка розовая., Картофель ломтиками, Ку/штура сухая бело Кремовая Агар с желатиной. Зона гидрого1за 6-8 мм. Агар - казеин. Просветле ше полное, Агар - крахмал. Зона гидролиза 255 Дродокеполисахаридная регламентная питательная среда, используемая для производства энтомопатогенных бактери« альных препаратов. Интенсивный рост наблюдается к 9 - 11 ч 1с льтивирова1-шя при 28 - 30°С, Спорообразованле и вы сьтание завершается к 36 ч роста. Титр жизнесдособных спор в культуральной жидкости к концу культивирования на обед ненной ДПС (2% БВК f 1 % муки) . достигает 2,5 - 3,5 мл.рд/MJu Отношение к углеводам. Усваивает без выделения газй глюкозу, целпобиозу, мальтозу, трегалозу, глиuepifH и оксалаты, Ие усваивает маннозу, сахарозу, лактозу, ар абинозу, инулин, cop6HTj дульнит, ацетат. Отношение к фагам, Собствегшые фаги не продуцирует. Устойчив к фагам типа FT-2; r-D-Ъ-, F-i -Гб, Fa-12. Антагонизм проявляет к BopiEtus tlnuringfiensis 1, 3, 4-серотшюв. s Для получения штамма Н5ВТ-121 испога зовали принцип рекомбинации генов, . перераспределение детерминант генома клеток к ряду клеточных поколений родительской популяиии, В качестве фпк- тора, индуцирующего это перераслреде- . ление, использовали разницу температур paBiiyjo -10 и +90°С, В качестве исходной сультуры, из которой был получен штамм Н5ВТ-1-21, служил штамм 4нго серотипа , находящийся на хранении воВНИИ-бакпрепарат, и1таммН5ВТ-121 отличается от род11теля принадлежностью к серотипу и в связи с этим является продуцентом другого энтомопатогенного препарата. Кроме того, штамм H5BT-J21 в сравне ши со штаммом-прототипом продуцирует на обедненной ДПС вдвое больше слорокристаллического комплекса, что позволяет значителькс снизить расход сырья на производство энтобактерина, а в связи с этим и его себестоимость. Штамм Н5ВТ-121 является фагненроду- цируюшей культурой и превосходит штаммпрототип но своей вирулентности более чем в пять раз. о р м у л а изобретения Штамм BaciLtus thuringiensis oirgcitte iQe Н5ВТ-121, используемый Для изготовления энтомопатогенного бактериального препарата энтобактерина, применяемого против насекомьк-вредктелей сельскохозяйственных культур и леса, хран-ится в коллекции ВНИИбакпрепарат. Морфологические признаки. Величина клеток-в экспо иешша ль ной фазе развития на обьпном агаре типа СПА равна 3,8 4,8 х 1,7 - 2 мк. Преобладающая форма палочковидная. На жидких питательных средах в условиях глубинного культивирова1шя клетки нодвю шые, встречаются в виде коротких и длинных цепей, Перитрихи грамположиельны В перирд стационарной )азы развития образуют споры величиной в 1,5 - 1,8 мк и округлые этпомоциДны кристаллы. По Н-аытигену uiTaN-fM М5ВТ 121 относится к 5-му соротипу, 5а- 56. Физиологические признаки, Оргопическая среда для поддерживаю щей селекции и размножения клоповых популяций - сухой питательный агар ти па СПА. Колонии в Г -форме, плоские с неровными краями. Диаметр колоний 5-ти суточной ку/гьтуры 0,4 - 0,6 см. Пигмент не образует. Питательный бульон. Всюду помутие 1ше значительное, осадок на 3-5 сутки. Молоко лакмусовое. К 24 ч пептонизация и подщелачивание, затем подкис ние и редукция молока. Коагул5щия на 3-4 сутки, переварива1ше сильное, коагулированная сыворотка розовая. Картофель ломтиками. Культура суха бело-кремовая. Агар с желатиной. Зона гидролиза 6-в мм, Агар казеин. Просветление полное. Агар - крахмал. Зона гидролиза 2,5 3 мм. Дрожжелога1Сахарид11,-1Я мет-иля питательная среда, нспо;1ьзуомая для производства энтомопатогенпьк бпктори- альных препаратов. Интепсивиьи. рост наблюдается к 9 - 11 ч культивироаэ- ния на обедненной ДПС (2% БВК + 1% муки) достигает 2,5 - 3,5 млрд/мл. Отношение к углеводам. Усваивает без выделегош газа глюкозу, целлобиозу, мальтозу, трегалозу, гшгцерин и оксалаты. Не усваивает макиозу, сахарозу, лактозу, арабинозу,, инулин, сорбит, j.iy7rb дит, ацетаты. Отношение к фагам, Собстпеплые фаги не предуцирует, Устойчив к фагам типа rd-2;Pd-i; Fi- -Г-Ь; Fa-Vl. Антагонизм проявляет к BaciEEus tiiuin -iensis и 4 - серотипов, Источшпш инфop ;aцu)f принятые во В1шмаш1е при экспертизе 1.Чевердш М, Г, CfSMonmvT Л, А, Использование мя1(роорган1 зм(т в жнпотноводстве дгш растений, Л«, 1968, с. 123-126. 2,Фрейман В. Б, Результаты селекции производствеш1ых штаммов Вас, ttiuin iensiu Тр« ВНИИбакпрепарат, в. 2, 1973, с. 74-84, (прототип).