Значение витамина РР (никотиновой кислоты) для организма общеизвестно. Никотиновую кислоту применяют как обогатитель ряда пищевых продуктов и широко используют с лечебными целями и т. п.
В связи с этим количественное определение никотиновой кислоты имеет исключительно большое значение.
На практике помимо микробиологического способа применяется и цианогенбромидный способ определения никотиновой кислоты. Но этим способом пользуются редко, так как он требует применения на производствах пищевых продуктов цианистого калия, что совершенно недопзстимо.
предлагаемый колориметрический способ количественного определения никотиновой кислоты не имеет недостатков цианогенбромидного способа и в то же время не уступает ему по точности.
По предлагаемом} способу анализируемую жидкость подщелачивают и добавляют к ней специа.чьно приготовленный роданбромидный раствор и спиртовый раствор анилина: по появлению окраски и ее интенсивности судят о количестве присздствующей никотиновой кислоты. Роданброхмидный раствор представляет собой насыщенную бромом до устойчивой желтой окраски смесь раствора роданистого калия, бромата калия и соляной кислоты.
Механизм реакции никотиновой кислоты с бромцианом и анилином может быть объяснен следующим образом.
Никотиновая кислота под действием брома окисляется с разрывом пиридинового кольца в по;шжении 4-3: к освободившимся связям присоединяются группа CN и анилин. Образуется цепочка полидиенового кра сителя, щиффово основание которого, образованное анилином через третичный азот пиридинового кольца никотиновой кислоты, обладает яркокрасной окраской (в слабых концентрациях- желтой окраской). Окраска тем интенсивнее, чем 6oJibmee количество веществ вступает в реакцию; следовательно, реакция образования полидиеноБого красителя-
319
количественная и подчиняется закону Ламберта-Бера.
В предлагаемом способе применяют не цианистый, а роданистый калий, исходя из тех соображений, что в присутствии КВгОд группа CNS роданистого калия окисляется с отщеп.юиием свободного CN, который в присутствии брома в реагирующей смеси образует in statu hascencli бромциан - BrCN.
Пример. К 1 мл испытуемой вытяжки добавляют 0,1 лл 2 N водного раствора КОН, 2 мл еще теплого роданбромидного раствора (охладившиеся растворы к употреблению мало пригодны) и 4 мл спиртового раствора анилина (1 часть анилина -f +3 части 98%-ного этилового спирта). Смесь энергично перемешивают и оставляют в покое на часа, после чего интенсивность образующейся окраски измеряют в колориметре Дюбоска со стандартным раствором никотиновой кислоты. Если нужно, растворы предварительно отфильтровывают через обычный фильтр.
Указанная реакция была испытана 8торалш для концентраций никотиновой кислоты от О, I тиг до 2 мг; ииже 0,1 мг при реакции образуется чрезвычайно слабая окраска, выше 2 мг - слишком интенсивная, в обоих случаях трудно поддающаяся коло.риметрическому определению.
Приготовление, роданбромидного раствора
К Ю мл IN раствора роданистого калия прибавляют 1 г кристаллического бромата калия. После полного растворения добавленного бромата к раствору приливают 1 мл раствора на (1 часть НС1 уд. в. 1,19 -Ь 1 часть воды); при этом смесь приобретает едва уловимую розовую окраску. Полученный раствор оттитровывают концентрированным бромом по каплям, постоянно взбалтывая титруемый раствор до образования устойчивой желтой окраски раствора (раствор при ЭТОЙ1 разогревается). Его немедленно используют для реакции.
Предмет изобретения
Колориметрический способ количественного определения никотиновой кислоты, от;1ичающийся тем, что анализируел1уюжидкость подщелачивают и к ней добавляют сначала раствор, полученный смешением раствора роданистого калия, бромата калия и соляной кислоты с последующим насыщением бромом до устойчивой желтой окраски, а затем спиртовый раствор анилина, после чего по появлению окраски и интенсивности ее судят о наличии никотиновой кислоты и количестве ее.
