Изобретение относится к усовершенствованному :сносо6у получения амидов нуклеозид-5-моно- или полифосфатов по концевой фосфатной группе, которые широко применяются в качестве реагентов в аффинной хроматографии. Известен способ получен1Ю амидов нуклеозид-5-моЕГо- и нолифосфатов по ко цевой фосфатной группе, основанный на активации концевой фосфатной группы превращением ее в смешанный ангидрид при действии избытка хлорангидрида 2,4,6-триметилбензойной кислоты в сухом пиридине в течение 10-20 мин.Г. Выход смешанного ангидрида для 5-мо- 1Ю-, ди и трифосфат нуклеозидов достигает 60-9О%. Последующая обработка смешанного ангидрида аминами в водном растворе или сухом диметилформа- МИДе приводит к получению соответствую щих амидов с выходом . Синтез рованнь е соединения выделяют хроматографией на бумаге. Недостатками существующего способа являются ; а) двух стадийность процесса, б) проведение каждой стадии процесса в определенном растворителе, в) значительная продолжительность реакции смешанного ангидрида с аминами; 2-3 суток в воде или 18-2О ч в сухом диметилформамиде, г) очистка синтезированных соединений хроматографией на бумаге, что усложняет выделение целевого продукта. Целью изобретения является упрощение процесса. Поставленная цель достигается использованием ко1щенсирующего агента: трифенилфосфина-2,2 -диниридилдисульфвда, б-Ю-кратного избытка амина (), что позволяет провести процесс в одну стадию и уменьшить время прю- цесса до 1-2 ч, и веделением целевого продукта осаждением. Предлагаемый способ получения амидов нуклеозид-5 моно- или полифосфатов HQ концевой фосфатной группе заключается в том, что реакцию проводят в смеси 5-моно- или поли х сфатов нуклео- зидов в сухом полярном апротопном растворителе ( диметилформамид, димети сульфоксид, ацетонитрил, пирвдин), 3-5-кратного избытка конденсирующего агента-трифенилфосфина-2,2-дипиридилдисульфвда и 5-10-кратного избытка амина (рКа75) при комнатной температуре в течение 1 ч для 5-моно и дифосфатов нуклеозидов и в течение 2 ч для трифосфатов нуклеозидов. Соотве-рствующие Л, J&, J -амиды образуются с выходом 8О-9О%. Выделяют целевой продукт осаждением эфиром из реакцио ной смеси. Пример 1 . Синтез тимидин-5-фосфопиперидина. К раствору 26 мг (0,О8 ммоль) тимидин-5-фосфорной кислоты в 1 мл диметилформамида добавляют О,03 мл пиперидина (0,3 ммоль), 5О мг (0,23 ммоль) 2,2 -дипиридилдисульфида и 6О мг (О,23 ммоль) трифенилфосфина, Через 1 ч отбирают аликвоту и хрома- тографируют на пластинке SicufoB сначала в системе СНСР - (9:1), затем до 1/2 длины в системе ,O (4:1), Результаты анализа показывают количественное образование тимидин-5-фосфопиперидида. Реакционну смесь разбавляют 2 мл пиридина и выливают по каплям в 20 мл эфира. Осадок растворяют в 1 мл пиридина и снов осаждают в 20 мл эфира. Осадок центр фугируют, промывают дважды эфиром, .высушивают в вакуум эксикаторе. Анализируют продукт тех на пластинке -Siifiufoe в системе СНзСН-Н,О (4:1 Продукт хроматографически однородный ( О,45), выход 92% (810 ОЕ ), Пример 2 , Синтез уридин-5 -бензиламидофосфата. К раствору О,1 ммоль уридин-5Клонофосфорной кислоты в 1 мл сухого пиридина добавляют 0,5 ммоль бензиламина, О,3 ммоль трифенилфосфина и О, ммоль 2 -, дипиридилдисульфида и выдерживают в течение 1 ч при комнатной температуре. Превращение количественн (по данным тех). Реакционную смесь по каплям выливают в 2О мл эфира, осадок отделяют центрифугированием, промывают эфиром, (3x10 мл), высушивают в вакууме. Продукт анализируют тонкослойной хроматографией на пластин ках в системе изопропанол: аммиак: вода-7:1:2. По результатам анализа пр дукт гомогенный (Р( О,73), выход 80% (760 OEisS- ). Пример 3 , Синтез f) -морфолида урндин-5-дифосфата, К раствору 4О мг триэтиламмонийной соли уридин-5-дифосфата (О,О 56 ммоль) в 1 мл диметилформамида добавляют О,030 мл (0,45 ммоль) морфолина, 50 мг 2,2-дипиридилсульфида (О,23 ммоль) и 6О мг трифенилфосфина (0,23 ммоль). Смесь встряхивают до образо- вания прозрачного раствора. Через 1 ч аликвоту реакционной смеси анализируют бумажной хроматографией в системе этанол 1 М CHjCOONH, рН 7,5(7:3). Анализ показывает количественное образование -морфолида уридин-5-дифосфата. Реакционную смесь по каплям выливают в 2О мл эфира, осадок центрифу- , промывают дважды эфиром, сушат в вакуумэксикаторе. Анализируют продукт Р-ЯМК-спектроскопией (два дублета с центрами при+ 3,7 м.д. и+ 1О,6 м.д., соотношение интенсивностей 1:1) и бумажной хроматографией в системе этанол 1М СН СООННд, рН 7,5 (,7:3). Продукт однородный (,65), Выход 450 90%. (Пример 4. Синтез аденозин5 - трифосфо-у-бензиламида. К раствору ЗОО (О,О2 ммоль) триэтиламмонийной соли аденозин-5 -три- фосфата в 1 мл диметилформамида добавляют 0,1 ммоль бензиламина, 0,075 ммоль трифенилфосфина и 0,О75 ммоль 2,2-дипиридилдисульфида, встряхивают до образования прозрачного раствора и выдерживают в течение 2 ч при комнатной температуре. Анализ аликвоты.на пластинке SiCufoP в системе изомасляная кислота :NHi : Н2О-66;1:33, показывает количественное образование продукта. Реакционную смесь по каплям выливают в 20 мл эфира, осадок отделяют центрифугированием, промывают эфиром (3x10 мл) высушивают в вакууме. Выход 26О OE2go 85%, Продукт гомогенный (R, 0,65 в системе изомасляная кислоа:ЙН :Н2.О-66:1:33, изобретения О р М у Л а 1 Способ получения амидов нуклеоид-5-моно- или полифосфатов по концеой фосфатной группе в сухом полярном протонном растворителе в присутствии амина (), отличающийся ем, что, с целью упрощения процесса.
5 7214536
реакцию проводят в смеси нуклеозид-Источники информации,
5-моно- или полифосфата, 3-5-кратногопринятые во внимание при экспертизе избытка трифенилфосфин -2,2-дипиридилдисульфида и 5-10-кратного избытка1. «MucBeic Aciofe RftSeat4 Il976,
амина с последующим выделением целе-5 3, № 4, р. 903 - 916 (протовых продуктов, осаждением.тип).
