Изобретение относится к способу |получения новых производных олеандомицина, обладающих ценными фарма кологическими свойствами. Цель изобретения - получение . новых полезных соединений, расширя щих арсенал средств воздействия на живой организм, достигается путем синтеза последних, Основанного на известной реакции восстановления эпоксидной группы 1. Описывается способ получения ол домицинов общей формулы , где R, Rj,Rj, - водород или алканоил имеющий от 2 до 3 ат мов углерода, заключающийся в том, что соединение общей формулы И Ста TjfiCHs), О. где К-Нд имеет приведенные выйе|значения, или его соль подвергают взаимодействию с хлоридом хрома in situ в среде, инертного органического растворителя, в качестве которого обычно используют смешивающийся с водой растворитель, например,ацетон,низший ал«аноил, тетрапидрофуоан или их смеси. Хлорид хрома получают in situхлористого хрома восстановлением. Фармацевтически пригодные присоединенные соли кислот полусинтетических олеандомицинов могут быть получены путем контактирования раствора соединения формулы I в растворителе, таком как ацетон, со стехиометркчески эквивалентным количеством минеральной кислоты, такой как хлористоводородная; бромистоводородная, фосфорная HJUi серная кислоты; или органической кислоты, выбранной из группы, включающей аспаргиновую, лимонную, винную, глюконовую, янтарную стеариновую кислоты или алкилсерную кислоту, такую как лаурилсерная кислота. Соль осаждается в виде осадка после реакции нейтрализации или,если необходимо, после частичного выпари-, вания реакционного раствора. Продукт может быть извлечен путем фильтрации, центрифугирования или лиофилизации.
Олендомициновые соединения являются эффективными ингибиторами роста микроорганизмов и в особенности
грам-положительных микроорганизмов, Высокая активность против грам-полоительных микроорганизмов, демонстрируемая этими соединениями, находится в некотором контрасте по отношению к меньшей активности против грам-отрицательных микроорганизмов. В проводимой далее таблице указаны данные, иллюстрирующие антибиотический спектр соединений, являющихся предметом настоящего изобретения
в условиях in vitro (т.е. в пробирке) . Испытания проведены в соответ;:твии с методикой, основанной на использовании минимальных ингибиторных концентраций, разработанной Эриксоном и Шеррисом. Результаты даны в таблице.
- Грам-положительный. 4-- Грам-отрицательный. Способность олеандомицинов противостоять инфекции в живом организме (т.е in vivo) установлена путем ввода подкожно и во внутрь мышам, зараженным золотистым стафилококком (Staph.aureus 01А005). Используя методику испытаний, описанную Restema et al., установлено, что соединения, в особенности формул II и III, в которых R, Rj и Rg - каждый водоро оба они обеспечивают защиту от инфек ции, которая по своей эффективности сравнима с защитой, обеспечиваемой природным олеандомицином. .. Для эффективного профилактическог и йротивоинфекционного использования в живом организме полусинтетические олеандомициновые соединения, являющиеся предметом изобретения,, могут быть введены в чистом виде или в сочетании с фармакологическими пригодн лми носителями как при подкожном парэнтеральном вводе, так и при приеме ;через рот. Выбор того или иного типа приема лекарства и его дозировк определяются врачом, исходя из состо яния пациента. Однако обычная дозировка для людей составляет примерно от 500 до 2000 мг/день и предпочтительное коли чество приемов от одного до четырех раз. Однако эта дозировка может изме няться в зависимости от веса пациента и может составлять в общем случае от 10 до 40 мг на 1 кг живого веса в день. Для использований соединения, полученных по изобретению, они могут быть соединены с инертными фармацевтическими пригодными наполнителями, такими как лактоза, маннитол (маннит) и крахмал. Эти препараты могут быть приготовлены в виде различных дозировок, т.е.в форме таблеток, капсул и т.д. Для парэнтереального применения соединения могут быть приготовлены вместе с инертныгли, парэнтерально пригодными носителями, такими как вода,соляной раствор, кунжутное (сезамовое) масло, пропиленгликоль и т.д. Пример 1. 8,8а-Деокси8, 8а-метилен-2, 4-диацетилолеандомицин. Трёхгорлую колбу с круглым основанием емкостью 5 л загружают цинковой пылью в количестве 200 г и хлоридом ртути в количестве 20 г. После того, как твердые компоненты хорошо перемешаны, добавляют 1 н. раствора соляной кислоты в количестве 50 мл и смесь подвергают интенсивному перемешиванию в течение 15 мин. Верхний водный слой отделяют и производят добавление свежего однонормального раствора соляной кислоты в количестве 500 мл и колбу помещают в атмо;сферу двуокиси углерода.Отфильтрованный раствор треххлористого хрома (в количестве 1 кг и 1300 мл одно- нормальной СОЛЯН.ОЙ кислоты) быстро добавляют к амальгаме цинка. Смесь подвергают перемешиванию в атмосфере двуокиси углерода в течение 1 ч, за это время смесь окрашивается в светло-голубой цвет, что свидетельствует о присутствии хлорида хрома (CrCI). Перемешивание прекращают спустя 1 ч и цинковую амальгаму подвергают осаждению в нижней части колбы.
Раствор 2,4-диацетилолеандомицина гидрохлорида .в количестве 500 г в ацетоне (3,5 л) и в воде (1,75 л) помещают в воронку с капельницей, присоединенную к трехгорлой колбе с круглым основанием емкостью 12 л, оснащен зой механической мешалкой. В эту колбу производят добавление в атмосфере двуокиси углерода и при перемешивании раствора 2, 4-диацетилолеандомицина гидрохлорида и предварительно полученного раствора хлорида хрома. Растворы добавляют одновременно с такой скоростью подачи,чтобы полностью вводить к одному и тому же моменту времени. Период ввода указанных растворов занимает примерно 12 мин. Спустя 35 мин после перемешивания при комнатной температуре вода, в количестве 2 л и этилацетат также в количестве 2 л добавляются к реакционной смеси и перемешивание продолжают в течение 15 мин, Этилацетатный слой отделяют и промывают водой в количестве 1600 мл. Этилацетат далее отделяют и водные экстракты смешивают и промывают свежим этилацетатом в количестве 2 л. Этилацетатный слой отделяют и промывают водой в количестве 1,7 л. Органическую фазу отделяют, водные экстракты смешивают и обрабатывают хлоридом натрия,в количестве 1500 г. Дополнительный этилацетат, который отделяют выводят с помощью сифона и смешивают с другими этилацетатными экстрактами Воду добавляют к соединенным этилацетатным экстрактам, и величину водородного показателя рН .доводят до 8,5 добавлением бикарбоната натрия. Органический слой отделяют промывают водой, насыщенным хлоридом натрия и сушат безводным сульфатом натрия. Фильтрация и выпаривание растворителей при пониженном давлении позволяет получить белый твердый продукт, который кристаллизуют,из смеси этилацетат - гептана в результате . получают соединение в количестве 237 г; т.пл. 184-186°С.
Вычислено, % : С 61,96; Н 8,67; N 1,85.
Найдено, % : С 61,78; Н 8,54, N 1,87.
С помощью аналогичной методики . могут быть получены другие 2, 4-ациловые э.фиры 8, 8а-метиленолеандомицина из соответствующих 2, 4-ациловь1х эфиров природных эпоксидных соединений, имеющих от двух до трех атомов углерода в ацильной группе.
Пример 2. 8,8а-Деокси-8,8аметилен-2, 4, 11-триацетилолеандомицин.
Раствор 2,4J11-триацетилолеандомицина в количестве 500 г, в ацетоне (3,25 л) и воде (1,73 л) подвергают обработке раствором хлорида хрома, приготовленного в соответствии с методикой, описанной в примере 1 из треххлористого хрома (1000 г) цинковой пыли (200 г) и хлорида ртути (20 г), в атмосфере двуокиси углерода, как описано в примере 1. Конечные этилацетатные экстракты, в количестве 2500 мл подвергают концентрированию до 800 мл и производят 0 добавление 3 объемов гептана и далее в течение ночи проводят процесс кристаллизации. В результате получают в виде двух порций соединение в количестве 426 г; т.пл.132-134 С. Вычислено,%: С 61,71; Н 8,46; N 1,76.
Найдено,%: С 61,59; Н 8,42;N 1,72.
Пример 3. 8,8а-Деокси-8,8аметилен-2-ацетйлолеандомицин.
Раствор 2-ацетилолеандомицина (29,2 г) в ацетоне в количестве 200 мл и воде (100 мл) подвергают перемешиванию с раствором хлорида хрома, полученного в соответствии с методикой, изложенной в примере 1 из треххлористого хрома (50 г) , цинковой пыли (10 г) и хлорида ртути (1 г) в атмосфере двуокиси углерода. Конечные этилацетатные экстракты подвергают концентрированию до получения 0 сухого продукта при пониженном давлении и остаток кристаллизуют из эфира (пётролейного) с последующей рекристаллизацией из этилацетата - пётролейного эфира. В результате г получают соединение в количестве .8,4 г; т.пл. 183,5-185°С.
Вычислено,%: С 62,16; Н 9,02; N 1,95.
Найдено, % : С 61,97; Н 8,91; N 2,01.
С помощью аналогичной методики
получены другие 2-ациловые эфиры 8,8а-метиленолеандомицина из соответствующих 2-ациловых эфиров природного эпоксидного соединения,содержащего от двух до трех атомов углерода в ацил-ьной группе.
Пример 4. 8,8а-Деокси-8,8аметиленолеандомицин.
Раствор олеандомицина (5 г) в воде
(25 мл) подвергают добавлению 1 н. соляной кислоты с тем, чтобы довести величину рН 3,5, далее этот раствор смешивают с раствором хлорида хрома (полученного в соответствии с методикой, изложенной в примере 1, из
13 г треххлористого хрома, ё г цинковой пыли и 700 мг хлорида ртути). Этот процесс npOBOflHT.ja атмосфере двуокиси углерода. Примерно через половину последующей стадии переме.шивания (общее время которой составляет 45 мин) к смеси добавляют ацетон в количестве 20 мл, перемешивани продолжают. Спустя 45 мин от начала перемешивания при комнатной температуре производят добавление метиленхлорида (100 мл). Величину рН доводят до 8,5 путем мСбавления 8 н. раствора гидроокиси натрия. Органическую фазу далее отделяют, водный слой экстрагируют второй порцией метиленхлорида в количестве 100 мл.
Экстракты метиленхлорида подвер11 а.ют перемешиванию, промывают водой (в количестве 100 мл), насыщенным хлоридом натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия и выпаривают при пониженном давлении. Остаток кристаллизуют из хлороформа путем вытеснения гептаном и в результате получают соединение, указанное в названии, в количестве 2,28 г; т.пл.120-123°С.
Строение полученных соединений подтверждено данными ЯМР-,УФ- и ИКспектров.
Формула изобретения
ЖСНа)
ВяО
(I)
-OR,
ОСИ,
где R, R,R2, означает водород или члканоил, имеющий от 2 до 3 атомов „глерода,
отличающийся тем, что соединение общей формулы П
,0fOtiV
«оу.
0- п-О
.о.
т ORj
ОСНз
где R - Н имеет приведенные выше значения,
или его соль подвергают взаимодействию с хлоридом хрома in situ в среде инертного органического растворителя.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
40 i- Бюлер К., Пирсон Д. Органические синтезы, М., 1973, т.1. с.116.
