При осуществлении данного процес са обычно может применяться от 1 до 10 молей гщетата аммония или соли с1мина, а количество восстанавливающ го агента -цианборгидрида натрия со тавляет 2 моля на моль применяемого кетона. Время реакции при восстанов лении продукта колеблется в пределах 2-3 ч при комнатной температуре. Но вые производные 4-деэокси т4-г юноолеандомицина представляют собой смесь двух эпимерных аминов, хотя такая смесь может быть разделена из вестными методами, но из Практически целей удобно использовать смесь в том виде, в котором она выделена из реакции. Оба эпимера данного ;соединёния. проявляют один и тот же тип активнос ти, т.е. оба являются антибактериал ными агентами. Они обладают активностью In vitro против различных 1рамположитвльных микроорганизмов, таких как Staphylpcoccus aureus и Streptococcus {jyogenes, и прйтив некоторых грамотрицательных микроорганизмов, имеющих сферическую и эллипсоидную форму (кокки) . Также многие соединения являются активными против грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов in vivo. П р и м е p. 1. 2-Ацетил-4-дезокси -4-оксоолеандомицин, Диметилсульфид (0,337 мл) добавляют к мутному раствору. 467 мг Ы-хло Сукцинимида в 20 мл толуола и б мл бензола, охлаокденному до -5°с и находящемуся в атмосфере азота. После перемешивания при 0°С в течение 20ми смесь охлаждают до -25°С и добавляют 1,46 г 2-ацетилолеандомицина и 15 мл толуола. Перемешивание продолжают в течение 2 ч при с последующим добавлением 0,46 мл триэтиламина Реакционн5гю смесь выдерживают при 20°С в течение еще 5 мин и затем нагревают до 0°С. Смесь переливают ..при перемешиваний в 50 мл воды и 50 мл этилацетата, рН вс)дной смеси устанавливают равным 9,5 добавлением водного раствора гидроокиси натрия. Затем органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме до белой пены (1,5 г). Растирание в порошок с диэтилевым эфиром дает 864 мг сырого продукта, который дваяуэл перекристал лизовывают из хло1жстого метилена и диэт шового эфира и получают 212 мг чистого продукта, точка плавления 183-185,. Найдено,%: С 60,9;Н 8,43 N 1,9. Вьмйслено,%: С 61,1|Н 8,5,N 1,9. Спектр ЯМР (ГсОС1з): 5,60 (1 Н) мультиплет, 3,50 (Зй)сйнглет, 2,73 (2Н) мультиплет, 2,33 (6Н) синглет и 2,03 (ЗН синглет. Пример 2. 4-Дезокси-4-оксоолеандомицин. Раствор 1,0 г 2-aцeтил-4 -дeзoкcи-4-oкcooлeaндoмицинa в 20 мл метанола оставляют на ночь при перемешивании при комнатной температуре. Раствор концентрируют в вакууме и получгиот желаемый продукт в виде белой пены, выход 937 кг. Спектр ЯМР (tf, COCK): 5,бО(1Н)м, 3,50(ЗН)с, 2,85(2Н)м и 2,26 (бН)с. Пример 3. 11,2-Диацетил-4-дезокси-4 оксоолеандомицин. А. Путем ац тилирования. К 4,0 мл уксусного ангидридзр в атмосфере азота и охлажденного до 0°С на ледяной бане, добавляют 727 мг 2-ацетил-4-дезокси-4-Ьксоолеандомицина. Через 5 мин добавляют 0,158 мл пиридина и слегка мутноватую суспензию оставляют 1ри перемешивании на ночь при комнатной температуре. Полу- . ченный раствор выливают в воду с находящимся над ней слоем этилацетата и рН последовательно устанавливают равным 7,2 добавлением твердого бикарбоната натрия и затем равнь1м 9,5, используя 1н. раствор гидроокиси натрия. Оиганический слой отделяют, обильно промывают водой и насьаценным соляным раствором и сушат над сульфатом натрия. Удалением растворителя при пониженном давлении получают 588 мг желаемого продукта. ЯМР ( (-,СОС1э): 3,45 (ЗН)с, 2,63 (2Н)м, 2,26 (6Н)с и 2j06 (6Н)с. Путем окисления. К 4,5 ir N-хлорсукцинимида, 50 мл бензола и 150 мл толуола в сухую колбу,; снабженную магнитной мешалкой и отверстием для ввода азота и охлажденную до -5°С, добавляют 3,36 мл диметилсульфида. После перемешивания при в течение 20 мин содержимое охлаждают до -25°С и обрабатывают 5,0 г 11,2-диацетилолеандомицина в 100 мл толуола. Охлаждение и перемешивание продолжают в течение 2 ч с последующим добавлением 4,73 мл триэтиламина. Реакционную смесь перемешивают при в течение 15 мин и затем переливают в 500 мл воды, рН устанавливают равным 9,5 1н. водным гидратом окиси натрия и органический слой отделяют, промывают водой и раствором соли, сушат над сульфатом натрия. После удаления растворителя под вакуумом получают 4,9 г желаемого продукта,идентичного продукту, полученному в примере ЗА, в виде пены. Спектр ЯМР ( б,СОС10: 3,43 (ЗН)с, (2Н)м, 2,23 (бН)с и 2,01(ЗН)с. 580 П р и м е р 4. 11-Ацетйл-4-дезокси-4 оксорлеандомицин. Раствор 4,0 г 11,2-диацетил-4-дезокси-4 -оксоолеандомицина в 75 м метанола оставляют при перемешивании при комнатной температуре на ночь. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и получают продукт в виде пены. После обработки остатка последовательно эфиром гек саном получают 2,6 г продукта в виде белого твердого вещества, точка плавления 112-117с. ЯМР-спектр ( б .qocio ): 3,48 (ЗН)с 2,61 (2Н)м 2,23 (бН)с и 2,03 (бН)с. П р и Mj е р 5. 11,2-Диацетил-4-дезокси-4-оксоолеандоглицин. Реакционную смесь, содержащую 1,0 г и 11,2 -диацетил-олеандомицина 7,09 мл диметилсульфоксида и 9,44.мл уксусного ангидрида оставляют на 4 дня при перемешивании при комнатной температуре. Полученный желтый раствор добавляют в воду со слоем; бензола над ней,рн постепенно устана вливают равным9,5 1н, водной гидроокисью натрия и органический слой отделяют,сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме досуха. Желтую маслянистую пену (1,14 г)хроматографируют на 20 г силикагеля, используя в качестве элюата смесь хлороформа и ацетона в отношении 9:1 После удаления растворителя из фракций получают 800 мл желаемого продук та и 110 мг побочного продукта. Пример 6 , . 2-Ацетил-8,8а-; -дезокси-8,8а-дигидро-4-дезокси-4-оксоолеандомицин, В сухую колбу,снабженную магнитной мешалкой и отверстием для подачи азота, содер1жсицую 11,6 г N-хлорсукцинимида, 750 мл толуола и 250 мл бензола и охлажденную до -5°С, добав ляют 6,0 мл диметилсульфида и- полученный раствор оставляют при перемешивании на 20 мин. Далее температуру понижают; до -20°С и добавляют 25 г 2-сЩетйл-8,8а-дезокси-8,8а-дигйдроолеандомицина в 500 мл толуола. После перемешивания в течение 2 ч при добавляют 11,4 мл триэтиламина И реакционную смесь постепенно нагревают до . Затем ее переливают в 1500 мл воды и рН доводят до 9/5 1н-раствором гидроокиси натрия. Органический слой отделяют, обильно промывают водой (трижды)- и насыщенным солевым раствором (однократно) и сушат над сульфатом натрия. После удаления растворителя при пониженном давлении получают пену которая после перекристаллизации из диэтилового эфира дает 13 г чистого продукт точка плавления 197-199°С, Спектр ЯМР (f, CDC1,): 5,11(1н)м, 3,51(ЗН)с, 2,25(6Н)с и 2,03(ЗН)с. П р и м е р 7, 11,2-Диацетил-8,8а-дезокси в,8а метилен-4-дезокси-4-оксоолеандомицин, В сухую колбу, снабженную отверстием для подачи азота, вводят 18 мл метиленхлорида и 1,97 мл диметилсульфоксида и полученный раствор охлаждают до . Постепенно добавляют ангидрид трифторуксусной кислоты ,. (3,9 мл) и продолжают перемешивание на холоде в течение 10 мин. Реакционную смесъ далее охлаждают до -70°С и добавляют 5,34 .г 11,2-диацетил-8,8а-дезокси-8,8а-мётилейоолеандомицина в 27 МП хлористого метилена по каплям с такой скоростью, что температура не повышается более-50 с. После того, как реакционную смесь снова охладят до , добавляют 9,69мл триэтиламина и.продолжают охлаждение в течение 10 мин. Реакционную смесь нагревают до -10®С и затем переливают в 75 мл воды, рН устанавливают равным 9,5 1н, раствором гидроокиси натрия и отделяют метиленхлоП р к м е р 8, 11-Ацетил-4-дезокси-4-аминоолеандомицин, К суспензии из 10 г 10%-ного палладия на угле в 100 мл метанола добавляют 21,2 г ацетата аммония и полученную взвесь обрабатывают раствором 20 г 11-ацетил-4-дезокси-4-оксоолеан омицина в 100 мл того же растворителя. Суспензию взбалтывают при комнатной температуре в атмосфере водорода при начальном давлении 3,515 кг/см Через 1,5 ч катализатор отфильтровывают и фильтрат добавляют к смеси 12QO мл воды И 500 мл хлороформа при перемешивании. Значение рН поддерживают равным от 6,4 до 4,5 и отделяют органический слой. Водный слой после дальнейшей экстракции 5013 мл хлороформа обрабатывают 500 мл этилацетата и рН доводят до 9,5 1н, ГИДРООКИСЬЮ натрия, Этилацетатный слой отделяют, а водный слой снова экстрагируют этилацетатом. Экстракты этилацетата объединяют, сушат над сульфатом натрия и концентрируют .до желтой пены (18,6 г), к рис-;, таллизация которой из диизопропилового эфира дает 6,85 г (34,2%) чистого продукта, точка плавления 157,5-160 С. Спектр ЯМР (.COCli): 3,41 (ЗН)с, 2,70 С2Н)м. 2,36(бН)с и 2,10 (311) с, Другой эпимер, который присутствует в сырой пене в количестве 20-25%, получают постепенным концёнтрирова-нием и фильтрацией маточной жидкости. П р и м е р 9, Применяя процесс, описанный в примере 8, и используя в качестве исходного материала соответствующий. 4-дезокси-4-оксоолеандЬ мицин, получсиот следующие ш«ины: ,,У(г), U 0(iH5 Cneirt:p ЯЯР { , CDCl 3,43(ЗН)с, 2,70(2Н)м, 2.,30(6Н)си2ДО(бН-)с 5,б(1Н)м, 3,Зб(ЗН)с, 2,83(2Н)ми 2,30(6Н)с Н- сн с- 5,50(1Н)м, 3,43(ЗН)с 2,80(2Н)м, 2,30(бН)с и 2,10(ЗН)с. Приме Р..10. 11-Ацетил-4-деэок си-4-аминоолеандомицин.ч К перемешиваемой суспензии из 50г 11-ацетил-4-дезокси-4-оксоолеандомицина и 53 г ацетата аммония в 500 мл метанола, охлажденной до -10°С, в те чение 1 ч по кaплям добавляют раствор 3,7 г 85%-ного цианборгидрида натрия в 200 МП метанола. После перемешивания в течение 2 ч на холоде ре.акционную смесь переливают в 2,5 воды и 1 л хлороформа. Значение рН поддерживают равным от 7,2 до 9,5 до бавлением 1 н. гидроокиси натрия и отделяют органический слой, водный слой отмывают один раз хлороформом и органические слои объединяют. Хлороформный раствор продукта обрабатываю в 1,5 л вода при рИ 2,5 и водный слой отделяют, рН водного слоя подде живают от 2,5 до 7,5,а затем до 8,25 с последукадей экстракцией этилацетаТом. рН водного слоя повышают до 9,9 и водный слой экстрагируют (2x825 мл) этилацетатом. Экстракты объединяют и сушат над сульфатом нат рия. После удаления растворителя при пониженном давлении получают 23,9 г (47,7%) продукта в виде пены. Спектр ЯМР ( tf.CDCU); 3,41 (ЗН)с, 2,70(2Я)м, 2,36(бН)с и 2,10(ЗН)с. Пр и ме р 11. 4-Дезокси-4 амино олеандомицин. Раствор 20 г 2-aцeтил-4-дeзoкcи-4-oкcooлeaндoмицинa в 125 мл метанола и после перемешивания при ком натной температуре в течение 1 сут обрабатывают 21,2 г ацетата аммония Полученный раствор охлс1ладают на водя ной бане и обрабатывают 1,26 г цианборгидрида натрия. Затем охлаждающую ванну удаляют и реакциэнную смесь оставляют при перемешивании при комнатной температуре на 2 часа. Реакционную смесь переливают в 600 мл воды и 600 мл диэтилового эфира и устанавливают рН 8,3-7,5. Эфирный слой отделяют,.а водный экстрагируют этиладётатом. Экстракты отбрасывают, а рН воды поддерживают равным 8,.25. Повторные экстрс1кты диэтилового эфира и Ътилацетата, полученные при этом значении рН, также отбрасывшот, и рН повышают до 9,9, Полученные при этом рН экстракты диэтилового эфира и этил ацетата объединяют, промывают доследовательно водой (1 раз) и насыщенным солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Последние экстракты, полученные- при рН 9,9 концентрируют до получения пены и хроматографируют на 160 г силикагеля, используя хлороформ в качестве заполняющего растворителя и начального элюента. После получения 11 фракций j объемом 12 мл к 1ЖДая, элюент заменяют смесью из 5%-ного ме танола и 95%-ного хлороформа. При получении 370 фракций элюент заменяют смесью 10% метанола и 90% хлороформа, а после фракции 440 используют смесь из 15% метанола и 85% хлороформа. Фракции 85-260 объединяют и концентрируют в вакууме досуха Получают 2,44 ,9%) желаемого продукта. Спектр ЯМР (if, CDC U. 5,56 (1Н}м, . . 3,36(ЗН)с, 2,9(2Н)м и 2,26(6Н)с, Пример 12. Раст.вор из 300 мл 2 -ацетил-4-де5окси-4-аминоолеандомицина в 25 мл метанола оставляют на ночь при перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют в .вакууме и получают 286 мг(100%) желаемого продукта в виде белой -пены. Спектр ЯМР (6, С DC Ut 5 ,6 1Н) м, з,зб(зн;с, 2,90(2Н)м и 2,26 (6Н)с. П р и м е р 13. 11-Ацетил-В,8а-дезокси-8,8а-дигидро-4-дезокси-4-аминооЛеандомицин. Раствор 2,15 г 11-ацетил-8,8а-дезокси-8,8а-дигидро-4-дезокси-4-оксоолеандомицина и 2,31 г ацетата аммония в 15 мл метанола при 20 С обрабатывают 136 мг цианборпедрида натрия. После перемешивания в течение 45 мин при комнатной температуре реакционную смесь выливают в 60 мл воды и 60 мл диэтилового эфира и поддерживают рН 8,1-7,5. эфирный слой отделяют и выбрасывают, а рН водного слоя повышают до 8,0. Добавляют свежего эфира, взбалтывают с водным слоем и сливают. Повышают рН до 8,5 и повторяют процесс. В заключение устанавливают рН равным 10,О и добавляют 60 мл этилацетата. Водный СЛОЙ удаляют а этилацетат обрабатывают 60 мл этилацетата. Водный слой рН водного слоя устанавливают равным 6,0 1н. соляной кислотой и обрабатываютСЛОЙ этилацетата. Вод ный слой последовательно экстрагируют при рН 6,5, 7,0, 7,5, 8,0 и 6,5 этилацетатом (60 мп) и органические экстракты удаляют. Наконец, рН устанавливают равны}. 10,0 и водный слой экстрагируют этилацетатом. Экстракты полученные при рН 8,0, 8,5 и 10,0| объединяют и концентрируют под вакуумом. Получают 585 мг (27,72%) белой пены, состоящей иэ двух 4-эпимеров. Спектр ЯМР ( (У-, CDCU: 3,38 и 3,35 (ЗН)2 синглетга, 2,31 и 2,28 (бЮ 2 сингле та и 2,03 (ЗН) . П р и р 14. 8,8а-Дезоксй-8,8а -дигидро-4-дезокси-4-аминоолеандомицин. . Цианборогидрид натрия 126 мл добавляют к раствору 1,86 г 8,8а-диэок си-8, 8а-дигидро-4-дезокси-4-оксоолеандомицина и 2,1 г ацетата аммония в 10 мл метанола при комнатной темпеЧерез 1 ч реакционную смесь ратуре охлаждаю до и оставляют при перемешивании на 2,5 чi. Реакционную смесь переливают в 60 мл воды и 60 м диэтилового эфира и рН доводят до 7,5. Эфирный слой удаляют, а рН водного слоя доводят постепенно повышают до 8,0 и 8,5, экстрагируя эфиром при этих значениях рН. рН водного слоя повышают до 10,0 и экстрагируют этилацетатом. Добавляют свежу воду к этилацетату и рН устанавливают равным 6,0. Этилацетатный слой удаляют,, а рН водного слоя последова тельно увеличивают до 6,5, , 8,0 8,5 и 10,О,при каждом значении экстрагируя водный слой этилацетатом. Экстракты этилацетата, полученные при рН 7,5, 8,0 и 10,О,объединяют и концентрируют до пены, которую раство-. ряют снова в этилацетате и экстрашруют свежей водой при рН 5,5. КяслаЯ водный слой последовательно подщелачивают, как и прежде, до значений рН 6,0 6,5, 7,0, 8,5, 8,0 и 10,0 экстрагируют при каждом из этих значений диэтиловым эфиром. Эфирные экстракты при рН 7,5 8,0 и 10,0 объединяют и концентрируют в вакууме досуха,получая 166 мг (8,9%) желаемого продукта. Спектр ЯМР ( S-f СОСТз ). 5,48(1Н)м. 3,40(ЗН)с и 2,30(6)с. П р и м е р 15. 11-Ацетил-8,8а-дезокси-8, 8а-метилен-4-дезокси-4-аминоолеандомицин. К раствору 5,0 г 11-ацетил-8,8а-дезокси-8,8а-метилен-4-дезокси-4-оксоолеандомицина и 5,2 г ацетата аммония в метаноле (30 мл) при 20°С , добавляют 300 мг 1щанборгидрида натрия. Реакционную смесь остсшляют при переманивании при комнатной тегтературе на 1 ч и затем переливают в 120 мл воды и 120-мл диэтилового эфира. Водный слой постепеИнб подщелачивают до рН 7,5, 8,0, 8,5 и 10,0, экстрагируя при каждом значении рН этилацетатом. Конечный органический экстракт, полученный при рН 10,О, обрабатывают водой и рН устанавливают 6,0. Водный слой снова обрабатывают, как описано выше, доводя рН до , 7,5, 8,0 и 8,5 и 10,0, последовательно экстрагируя этилацетатом до изменения рН. Экстракты этилацетата, полученные рри изменении рН 8,0, 8,5 и 10,0 объединяют, концентрируют в вакууме и получают 1,5г (30%) желаемого продукта. Спектр ЯМР (,СРСК) 3,38 (ЗН)с, 2,ЗОСбН)с, 2,05 .и 0,65(4Юм. П р и м е р 16. 4-Дезокси-4-этиламиноолеандомицин. К 25 мл метанола, содержащего 4,59 г 4-дезокси-4-оксоолеандомицина, 6,6 мл 5 М раствора этиламиНа в этаноле и 1,89 мл уксусной кислоты, прибавляют 365 мг цианборгидрида порциями по 50-60 мг. После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч реакционную смесь выливают в 110 мл воды и 120 мл этилацетата.1 Величину рН водного слоя последовательно доводят до 7,5, 8,0, 8,5 и 10,0 и проводят экстракцию этилацетатом после каждого изменения уровня величины рН. Конечный органический экстракт, доведенный до рН 10,0, обрабатывают водой « величину рН устанавливают на уровне 6. Водный слой . снова обрабатывают, как это описано выше, и величину.рН устанавливают на уровне 7,0, 7,5, 8,0 и 8,5 и 10,0, проводят экстракцию этилацетатом после каждого изменения рН. Экстракты в этил&цетате, полученные после изменений величины рН до 8,0, 8,5 и 10,0, объединяют и концентрируют в вакууме для получения пены. Продукт после этого очищают хроматографированием на 75 г силикагеля, с испол зованием ацетона в качестве элюента. фракция 62-104, каждая из которых имеет объем 4 мл,объединяют и концентрируют при пониженном давлении для получения 910 мг целевого продукта.
