Способ получения 1,4-ди-N-окиси 6-хлор-2,3-бис-(оксиметил)хиноксалина Советский патент 1993 года по МПК C07D241/52 A61K31/498 A61P31/04 

Предлагается новый способ получения 1.4-ди-Ы-окиси 6-хлор-2.3-бис-(оксйметил)хиноксалина Формулы 1

то , - ,А

CHjOH Кг СНгШ

J,

которая являетс$Г высокоактивным антибактериальным средством и п|зедставляет интерес как потенциальное лечебное вещество при острых инфекционных заболеваний - . -,. - -Известен способ получения 1,4-ди-Ышсиси 6-хлар-2.3-бис-{оксиметил)хиноксалиtta путем дбзаиетилирования 1Л-ди-Мокиси6-хдор-2.3-бисЧзцетдксиметил}хйно(ссалина tt. , . ,

Исходное соединение tl подвергают гидролизу соляной кислотой в водно-спиртовой среде при температуре 80-84°С в течение 4-6 мин. Выход целевого продукта составляет 44-45%. т.пЯ. t45.5-146°C.

Схема известного способа I-...,

3$ф

О /- YY HCt

СОЕДИНЕНИЕ 1

СНгОСОСНз 80ЙЙ II

ОМ,. .

Недостатками известного способа являются сравнительно низкий выход целевого продукта и строго регламентированное время нагрева, что усложняет технологию лгроцесса. Низкий выхад 1,4-ди-М-окиси б-хлор-2,3-бис-{оксиметил)хиноксалина в условиях известного способа {кислая среда, температура 80-84 С) обусловЛенналичием окислитепьно-босстан01витёльных реакций. протекающих интенсивно при незначительном увеличении времени нагрева (сШше 46 мин) реакционной массы, что приводит к осмолейию целевого продукта и снижению выхода его.

Цель изобретения - упрощение технологии процесса и повышение выхода целевого продукта.

Поставленная цель достигается описываемым способом получения 1.4-ди-Ы-окиси 6-хлор-2.3-бис-(оксиметмл}хиноксалииа путем микробиологического дезацетилиро.вания 1,4-Ди-М-окиси 6-хлор-2.3-бис-(ацетоксиметил)хиноксалина в водной среде с помощью бактерий Carynebactertum mediolanum или Mycobacteriym meklolanum при концентрации исходного соединения 0,3-0,5 г/л или с помощью грибов пбрядка Mocorales при концентрации исходного соединения 0,5-t г/л.

Отличие способа состоит в том, что дезацетилирование проводят микробиологическим путем в водной среде с помощью названных бактерий и грибоб при указанной концентрации исходного соединения.

Трансформирующие культуры, в качестве которь(хиспользуют названное грибы и бактерий, вьфащйвают на среде, содержащей углеводы, органические источники азота, причем для выращивания грибов добавляют дополнительно соли фосфора, К выращенной в течение 24 ч культуре добавляют исходное соединение - 1,4-ди-М-окись 6-хл ор-2,3-бис-(а цетоксиметил)хи но ксаяи на (II). Окончание процесса контролируют с помощью тех на пластинке Silufol UV-254, Вь|деляют целевой продукт из культуральной жидкости путем экстракции галоидалкилами, например хлороформом, хлористым метиленом, дихлорэтаном. Выход продукта 67-70% ,57, т.пл. 145,5-146 С.

П р и м е р 1, Культура Tieghemella orchldis поддерживается на сусло-агаре. 1 мл водной Суспензии спор вносят в колбу на 750 мл со 100 мл водной среды (рК 7), содержащей, мас.%:

Глюкоза2

Пептон0,5

Дрожжевой автолизат0,3

KHaPO/i ,0,5

Выращйеание мицелия и стадию трансФормации проводят на качалке (200 об/мин) при 27-28 С. Через 24 ч отфильтровывают мицелий от среды, промывзют водой и переносят в 100мл воды, куда предеарительно вносят 50 мг(0,1456 ммоль) 1,4-ди-Ы-окиси 6-хлор-2,3-бис-(ацетоксиметил}хиноксалина (II). Конец трансформации определяют с помощью тех на пластинках Silufol UV-254 по исчезновению исходного вещества И.

Процесс ведут одновременно в 20 колбах. По окончании трансформации (черзе 24 ч) мицелий отфильтровывают и из объединенных фильтратов целевой продукт извле1 ают горячим хлороформом в экстракторе жидкость-жидкость. После удаления , хлороформа остаток перекристаллизовываЮт из спирта и получают 500 мг (1,96 ммоль, 67%) 1.4-ди-М-окиси б-хлор-2,3-бис-(оксиметил)хинокса/1ина, т,пл. 145.5-146°С, Rf 0,57, Пример 2. В условиях примера 1 с использованием 100 мг (0,293 ммоль) t,4ди-М-окиси б-хлор-2,3-б1лс-(ацетоксиметил)хиноксалкна ведут процесс одновременно в tO колбах, получают 527 мг (2,05 ммоль , 70%) целевого продукта, ТгЛл. 145,5-146°C;RfO,57.

Примерз. В условиях примера 1 с исНользованием культуры Theghemelta hyaiospora и 100 г (0,293 ммоль) 1,4-ди-Ыокиси 6-хлор-2,3-бис-(ацетоксиметил)хиноксалина ведут процесс одновременно в 10 колбах, получают 512 мг (1,99 ммоль, 68%) целевого продукта,т.пл. 145,5-146°С, Rf 0,57,

Прим ер 4. В условиях примера 1 с использованием культуры Rhizopus nigrlcans и 100 мг (0,293 ммрль) 1,4-ди-Мокисиб-хлор-2,3-бис-(ацетоксиметл)хинЬксалина процесс проводят одновременно в 10 колбах, получают 527 мг (2,05 мМОль. 70%) целевого продукта, т.пл. 145,5-14бС, RfO.57,

Пример 5. Культура Corynebacterlurn mediolanum поддерживается на кукурузноглюкозном агаре. 0,1 мл водной суспензии культурь вносят а 100 мл воДной среды (рН 7), содержащей, мае.%;

Глюкоза /;.. .,: : .1

Кукурузный экстракт. 1

Выращивйнйе культуры и стадию транс-, формации проводят «а качалке (200 об/мин) при 27-28°G. Процесс ведут Рдноврёменно в 20 колбах. . , . : ,/ .V:,

В 24-часовую культуру BHOCJtf 30 мг (0,088 МмоЛ) 1.4-дй-М-окиси 6-хлор-2,3-бис(ацетЬксиметил)хиноксали на и после окончания грансформации (через 24 ч) биомассу отфильтровывают. Объединенные фильтраты экстрагируют горячим хлористым метиленом в экстракторе жидкость -жидкость. После удаления хлористого метилена остаток перекристаллизовыйагот изспирта и

. сЬ о р мул а и 30 б рутения

. СПОСОБ получения м-ди-ы-окйСИ „ б-хлОР-2,з-шс:дас 1МЕ-тл)х№

ЙОКСАЛИНА путем дезацетилированйй t ,4-ди-М-окиди 6-хлЬр-2,3-биcфцeтpкcимerил)xинoкc5лйнa, отличающийся тем, что, с целью упрощения техйЬяогмипрЬцессд и повышения вцхода целевого продукта,

получают 302,8 мг (1,178 ммоль. 67%) целевого продукта, т.пл. 145,5-:146°С, Rf 0,57,

П р и м е р 6. В условиях примера 5 с использованием 50 мг (0,146 ммоль) 1,4-диN-окиси 6-хлор-2,3.-бис-(ацетоксимётил)хиноксалинй ведут процесс одноб0бменно ё 20 колбах, получают 508 м г {1,99 ммоль, 67,5%) целевого продукта, т,(ггл, 145,5146°С, RfO,57. : ;. /

П р и мер 7, В условиях примера 5с использованием Mycobacterium album 726 ведут процесс оДноёрёмёнйо в 20 колбах, получают 504 мг (1,97 Ммодь, 67%) целевого продукта, т;пл. 145,5-146°С, Rf 0.57,

Положительный эффект ЪгтмСаннбгб способа состоит в том, что при получении 1,4- ди-Ы-окиси б-хлор-2,3-Ьис-{оксиметил)хиноксалина данным сЯрсобом отпадает необходимость iicпользования

агрессивной среды (соляной кислоты) и нагрева, что Г1бзв;0ляет избежать oCMbrteHvwi целевого продукта и дает возможность получать его С выходом на 23-25% выше, чем извёстньгм . ч ; : , 1 ,, :л

Следует отметить, что положйте/ ьнбй стороной предлагаемого сНособа является то, что для дёзацетилйрЬванйя исходного соедмнёния II ислользуют отечествеиныб культуры микроорганизмов, . - ;

(56) Авторское свидетельство СССР №2548913, кл; С,07О 241/52, 1977, непубПШ..;/:. . : .; ;..; .;V.:..;-: : . 35

дезацётилирование проводят микробиологическим путем в водной среде с помощью бактерий Coruneb cterfum mertftofahum или Mukobakterium medlolanam при конц нтра40 ции исходного соединения 0,3 -0,5 г/л или с помощью грибов порйДкаМисога1ё8 при

конценТраиии исходного соединения 0.5: 1т/л: -.;:;,,:,-:: о -..--