Способ получения культуры клеток Советский патент 1980 года по МПК C12K9/00 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК

1

Изобретение относится к области вирусологии и касается получения кпеточяых. купьтур.

Известен способ получения культуры клеток путем выращивания её на предметной поверхности с последующим съемом полученной клеточной культуры ClJ . В качестве поверхности для выращивания кугьтуры используют стекло, керамику, пластмассу.

Однако известный способ сложен в осуществлении, поскольку используемые поверхности либо тфедставляют собой бьющийся материал - стекло, либо являются дорогостоящими материалами кварцевое стекло, керамика, пластмасса.

Целью иэобрете1шя является упрощение способа.

Эта цель достигается тем, что культуру клеток вьфащивают на гофрированной поверхности алюминиевой (}юль1: и.

Алюминиевая фольга - безвредный субстрат, не растворяется под воздействием дезсредств, хороший проводник тепла и электрического тока, легко поддается гофрировке, что дает возможность повысить полезную площадь при вырашивании клеток.

, Способ иллюстрируется следующим примером .

Алюминиевую фольгу, используемую в пищевой промышленности, прокатывают валиками с рельефной поверхностью.

10 Алюминиевую емкость лк пластины подвергают Moe4Hbft процедурам в хорошо обезжиривак)ШТ1х растворах, например в

1%-ном растворе тринатрийфосфата, промывают в теплой водоттроводной воде,

.15 споласкивают 1-2 раза в 0,О1%-ном растворе соляной кислоты, 4-5 раз в водоттроводной воде и 4-5 раз в дистиллированной воде. Стерилизуют суузол жаром при 180-2ОО С в течение 1,5202,0 ч. На алюминиевой фольге можно получать органные, первично-трипсинизированные культуры клеток млекопитающих и птиц. В качестве питательной среды используют среду 199, Игла и др. Для посева используют взвесь клеток в питательной среде, которую вносят в соответствующие емкости, и выращивают при 37°С, Контроль роста клеток осуществЛ1ПОТ путем измерения величины рН. Клетки, вьфосшие на алюминиевой фольге окращивают 7срасками Романовского-Гимз спиртовым рас твором фуксина, раствором гематоксилин-эозина. Фольга окраску не воспринимает.. Для снятия клеток с поверхности алю миниевой фольги используют раствор вер сена 0,ОО2%. При этом из сосудов удаляется питательная среда и вносится достаточное количество версена. Вьщерживают в термостате при 37 С до появления белых конгломератов клеток в растворе {1О-15 мин.). Затем легким движением раствора смывают с фольги оставшиеся клетки. Взвесь клеток в версене центрифугируют 10 мин. при 5ОО об/мин, Надосадочную жидкость удаляют, клетки суспензируют в свежей 7 74. питательной среде для нового посева. Использование алюминиевой фольги в способе получения клеточных культур позволяет повысить выход клеток, упростить и удешевить получение клеточных культур, а также дает возможность изучать действие на них экстремальных условий. Формула из обр е т е н и я Способ Получения культуры клеток путем выраяшвашгя ее в жидкой питательной среде на предметной поверхности с последующим съемом полученной клеточной культуры, отличающийся тем, Ч7МЭ, с целью упрощения способа, культуру клеток выращивают на гофрированной поверхности алюминиевой фольги. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. ГГатент США №3850748, кл. 195-1.8, опублик. 1974.