Способ определения фузариотоксиновВ зЕРНЕ злАКОВыХ КульТуР Советский патент 1981 года по МПК G01N33/10 

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУЗАгаЮТОКСИНОВ В ЗЕРНЕ ЗЛАКОВЫХ КУЛЬТУР

I

Изобретение относится к определению качественных показателей злаковых культур, в частности к определению токсичности зерна.

Известен способ определения фузариотоксинов в зерне злаковых кулыур, включающи обработку навески зерна органическим растворителем и определение флоуресцирующей способности навески 1.

При зтом фузариотоксины определяют непофедственно в липидах, выделенных из токсичного зерна, что затрудняет точность определения из-за присутствия в исследуемой части навески балластных веществ.

Цель изобретенш - повышение точности определения.

Поставленная цель достигается тем, что из навески после обработки ее органическим растворителем удаляют микотоксин Т-2, оставшуюся часть омыляют этиловым спиртом, выделяют из нее неомыленную фракцию, а флуоресцирующую способность определяют в последней на пластинках Силуфол.

При этом в качестве органического растворителя используют ацетон 70%-концентрации.

Сущность способа поясняется примером.

Из 100 г исследуемого образца путем исчерпывающей экстракции 70%-ным водным раство-. ром ацетона извлекается микотоксин Т-2. Для его кон;;ентрирования отгоняется из водного раствора ацетон и из оставшейся смеси диэтиловым и петролейным эфиром 1:1 извлекается микотоксин 1-2. Раствор высушивается безводным сернокислым натрием, и после отгонки растворителей остаток перерастворяется в хлороформе, объем которого доводят до 5 мл.

Затем остаток мучки, после извлечения из нее микотоксина Т-2, обрабатывается при нагревании на кипящей водяной бане в колбе, соединенной с обратным холодильником, 100 мл этилового спирта в течение 1 ч, после чего слиртовый раствор отфильтровывается, и спирт отгоняется. Остающийся смолообразный остаток перерастворяется в хлороформу, который отгоняется. Остаток подвергается, омылению 2-н спиртовым раствором едкого калия в течение 3 ч. Выделенные неомыляемые ве3 , ,,.щэства содержат в своем cocjase ййКотоксин . Идентификация микотоксинов проводитоя методом тонкослойной хроматографии на плас тинках Силуфол, Для определения микотоксина Т-2 применяют систему растворителей: толуол-этилацетат-муравьиная кислота при соотношении 6 : 3 : 1 с последующим проявлением пластинки 20%-ной серной кислотой и прогреванием ее в сушильном ижафу при 80° С в течение 5 мин. Появление флуоресцирующего в УФ-свете (365 нм) голубоватым цветом пятна с Rf 0,24 свидетельствует о наличии в исследуемом образце микотоксина Т-2. Чувствительность способа 0,5 мкг в про Мйкотоксин СФ-1 определяется в системе растворителей: диэтиловый эфир-петролейный эфир-уксусная кислота 50:50:2. Появление флуоресцирующего в УФ-свете (365 нм) серозеленым цветом пятна с Rf 0,17 указывает на наличие в исследуемом образце микотоксина СФ-1. Чувствительность метода 5 мкг в пробе. Предлагаемьш способ, по сравнению с известным, является более чувствительным, так как разрзоиаются химические соединения продуктов жизнедеятельности других видов плесневых грибов, которые могут присутство вать в составе липидов и мешать определению фузариотоксинов. Формула изобретения 1.Способ определения фузариотоксинов в зерне злаковых культур, включающий обработку навески зерна органическим растворителем и определение флуоресцирующей способности навески, отличающийся тем, что, с целью повьщхения точности определения, из навески после обработки ее оргашетеским растворителем удаляют микотоксин Т-2, оставшуюся часть омыляют этиловым спиртом, вьщеляют из нее неомыленную фракцию, а флуоресдарующую способность определяют в последней на пластинках Силуфол. 2.Способ по п. 1, отличающийс я тем, что в качестве органического растворителя используют ацетон 70% - концентрации. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Олифсон Л. Е. и др. Хроматографический метод определения токсичности зерна, пораженного Fusarium Sporotrichiella.- Вопросы питания, 1975, N 2, а 83-86.