Способ количественного определения аде-НОзиНА и иНОзиНА или пРОизВОдНыХ АдЕНОзи-HA и пРОизВОдНыХ иНОзиНА пРи иХ СОВМЕСТНОМпРиСуТСТВии B СМЕСи Советский патент 1981 года по МПК G01N31/16 

(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АДЕНОЗИНА И ИНОЗИНА ИЛИ ПРОИЗВОДНЫХ АДЕНОЗИНА И ПРОИЗВОДНЫХ ИНОЗИНА ПРИ ИХ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ в СМЕСИ

тилцеллозольва, затем к раствору добавляют 50 мл пропиленгликолькарбоната и потенциометрически титруют 0,1 н. раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозольва и пропиленгликолькарбоната (1:8-10). На кривой потенциометрического титрования появляются 2 скачка потенциала.Первый скачок потенцисша соответствует количественному титрованию аденозин и его производных, а второй - количественному титрованию инозина и его производных.

Пример 1. Количественное определение аденозина с инозином.

Навеску анализируемой смеси 0,1208 г (О,0834.г аденозина и 0,0374 г инозина) помещают в стаканчик для титрования и при нагревании растворяют в б мл метилцеллозольва. Раствор охлаждают до комнатной температуры и добавляют 50 мл 1,3-пропиленгликолькарбоната, в раствор погружают пару электродов (стеклянный и каломельный) и потенциометрически титруют 0,0993 н. раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозолье-1,3-пропиленгликолькарбонат 1:8 до появления двух скачков потенциала на кривой титрования.

Расход титранта на титрование аденозина - 3,14 мл, а расход титранта на титрование инозина 1,41 мл

Содержание аденозина рассчитываю по формуле

X . 3,14.0,0993.0,267 , ,

и,X ио

Содержание инозина рассчитывают следующим образом

Y - ,09930,268 .лп-оо - 6ТТ208100-38%

Стандартное отклонение при определении аденозина составляет -it 0,9% и при определении инозина ± 0,9%.

Пример 2. Количественное определение смеси дезоксиаденозина с дезоксиинозином.

Навеску анализируемой смеси 0,1390 (0,0750 г дезоксиаденозина и 0,0640 г дезоксиинозина) при нагревании растворяют в 5 мл метилцеллозольва. После охлаждения к расвору добавляют 50 мл 1,3-пропиленгликолькарбоната и потенциометрически титруют 0,1058 н. раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозольв -1,3-пропиленгликолькарбонат .1:9 до появления, двух скачков потенциала на кривой титррвания |

Расход титранта на титрование дезоксиаденозина 2,83 мл, а на титрование дезоксиинозина 2,40 lui.

Содержание дезоксиинозина рассчитывают по формуле

2,83-0,10580,251

- 0,1390

стандартное отклонение составляет iO,6%. Содержание дезоксиинозина рассчитывают следукядим образом,

X - ,10580,252 . ис :0,1390

Пример 3. Количественое определение смеси 2 ,3-изопропиллидёнаденозина с 2,3-изопроп|1ллиденинозином.

Навеску ан ализируемой смеси 0,1984 г (0,0980 г 2 ,з-изопропиллиденадёнозина и 0,1004 г 2,3-изопропиллиденинозина) при нагревании растворяют в 4 мл метилцеллозольва. После охлаждения к раствору добавляют 35 мл 1,3-пропиленгликолькарбоната и потенциометрически титруют 0,1075 н раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозольв-1,3-пропилегликолькарбонат 1:10 до появления дву скачков потенциала на кривой титрования. Расход титранта на титрование 2 ,3-изопропиллиденс1деиозина составляет 2,86 мл, а на титрование 2,3-изопропиллиденинозина - 3,15 мл Рассчитывают содержание 2,3-изопропиллиденозина - 49,4% и 2, 3-изопропиллиденинозина - 50,8%. Стандартное отклонение при определении 2,3-изопропиллиденаденозина составило 0,7%,а при определении 23-изопропиллиденинозина ±0,8. 1,3, -пропиленгликолькарбонат оказывае высокое дифференцирующее действие в отношении слабых оснований, но обладает весьма низкой растворяющей способностью в отнсмиении аденозина, инозина и их производных.

Положительный эффект обеспечиваеся совокупностью растворяющих и дифференцирующих свойств, которыми обладает предлагаекый растворитель смесь метилцеллозольва и 1,3-пропиленгликолькарбоната в объемных соотношениях 1:8-10. Изменение этих соотношений приводит либо к уменьшению растворяющей способности,либо к уменьшению дифференцирующего действия.

Использование в качестве титрант раствора хлорной кислоты в смеси метилцеллозольв-1 ,3-пропиленгликолькарбонат (1:8-10) обеспечивает необходимые соотношения метилцеллозолва и 1,3-пропиленгликолькарбоната среды титрования во всем процессе титрования, а также обеспечивает образование pacтвopи ыx в данной сред продуктов титрования.

Упрощение процесса достигается тем, что предварительная обработка образца, т.е. окисление периодатом, восстановление раствора глюкозой в известном способе раздельного количественного определения смесей эденозина с инозином и производных дценоэииа с производными инозина

не требуется, так как на проведение анализа не влияет отсутствие --сЯ. гликольной группировки в рибозной части производных аденозина и инозина (дезоксиаденозин, дезоксиинозин и др.) расширяется область применения способа.

Формула изобретения

Способ количественного определения аденозина и инозина. или производных аденозина и производных инозина при их совместном присутствии в смеси путем потенциометрического титрования анализируемой пробы в среде органического растворителя, отличающийс тем, что, с целью упрощения определения и расширения области применени

способа, в качестве органического растворителя используют смесь метилцеллозольва и 1,3-пропиленгликолькарбоната, взятых в объемном соотношении 1:8-10, и титрование проводят раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозольва и 1,3-пропилангликолькарбоната, взятьпс в объемном соотношении 1:8-10.

Источники информации, принятые во внимание при экспертихе

1. F. .Craveri, G. Oondi Separationand determination of nucleosides in the presence of organ extracts Boll, Chim. Pharm. 1965, 104,

5 p. 574-579.

2. Авторское свидетельство СССР по заявке 2428028/23-04, кл. G 01 N 31/16, 1976 (прототип).