@ -Хлоралкил- или циклоалкилперхлораты,обладающие иммунодепрессивной активностью,и способ их получения Советский патент 1984 года по МПК C07C71/00 A61K31/02 A61K31/25 A61P37/06 

Изобретение относится к новым органическим /i-хлорперхлоратам, в част ности к биологаческй активным/5-хлор алкил- или циклоалкилперхпоратам, обладаияцим игшунодепрессивной актив ностью, и к способу их получения. Известно, что органические перхлораты находят применение в качестве алкилирующих или ацилирующих средств, а также в качестве окислителей flJv Сведения о биологической активности органических /J -хлорперклоратов в литературе отсутствуют. В литературе известен способ полу чения 2-йод-циклогексилперхлората, заключаювщйся в .том, что, смесь цикЛогексана и перхлората серебра обра батывают йодом. Постулируется (но н как не доказывается), что при этом образуется 2-йодциклогексилперхлорат, который не выделяют, а сразу гидаэолизом превращают в 2-йодциклогексанол. Недостатком этого способа-являет ся использование в качестве реагента перхлората серебра - очень взрыв опасного и труднодоступного соедине ния. Кроме того, сам целевой продукт не выделен и не охарактеризован, по этому можно считать, что образование его не подтверждено C2J. В качестве известного препарата, обладающего иммунодепрессивной активностью, используют циклофосфан, для которого доза эффективного дей|Ствия близка к токсичной Сз J. Целью изобретения является расширение ассортимента органических перхлоратов,- обладакяцих иммунодепрессив ;Ной активностью, и способ их получеПредпагаются |} -хлоралкил- или циклоалкилперхлораты общей формулы R- H-CH-R ОСШз С1 где R, - С -алкил; R - вбд л. - «бдород или R +Н -тетраме.тилен. Способ получения (J -хлоралкил- или циклогексилперхлоратов состоит в том что гептен или циклогексен подвергают взаимодействию с хлором и перхлоратом лития в инертном органическом растворителе - эфире или этилаце татепри температуре от (-78) до (+10)С с последующей обработкой водои. Реакция протекает по схеме: RCH-CH-R R,™-CHR,Zi«0, /I I I , ОСЮз С1 Согласно предлагаемому способу че рез раствор олефина и избытка перхлората лития в инертном растворителе пропускают сухой хлор до появле ния устойчивой желтой окраски.Предпочтительно применять 10-30-кратный избыток перхлората лития. Во время пропускания хлора реакционную смесь поддерживают при температуре от (-78) до {+10)С. Растворитель должен быть инертным по отношению к исходным реагентам и продукту реакции, поэтому применяют полярный ненуклёофильный органический растворитель, такой, как эфир иЛи этилацетат. Эти условия проведения реакции наиболее оптимальны с точки зрения выхода и степени чистоты целевого продукта. По окончании реакции смесь прогФлвают небольшим количеством воды для удаления избытка перхлората лития, органический слой сушат хлористым. Ксшьцием и растворитель упаривают в вакууме. Остаток подвергают хроматографическому разделению на колонке с силикагелем. Шлход целевых -хлоралкил(циклоадкил)-перхлоратов составляет 55-70%. В случае 2-хлорциклогексилперхлората были выделены |цис- и транс-изомеры. Полученные вещества представляют собой бесцветные маслообр азные жидкости, индивидуальные по данным тонкослойной хроматографии. По сравнению с другими известными пepxлopaтa ш эти вещества устойчивы при хранении в чистом виде при комнатной температуре в течение нескольких дней, а при температуре от (-5) до (-7) С - в течение неско{1ьких дней. Однако при нагревании выше 120с эти соединения взрываются. Это свойство затрудняет проведение элементного анализа соединений. Поэтому строение всех полученных веществ подтверждено данными ИК- и ПМР-спектроскопии. Ковалентный характер связи между углеводородным радикалом и перхлоратной группой подтверждается растворимостью полученных органических -хлорпёрхлоратов в неполярных органических растворителях, а также величиной химического сдвига 0 -протона по отношению к группе OClOj . Пример i. Через раствор 392 мг (4 ммоль) гептена-1 и 1,07 г (10 ммоль) перхлората лития в 2 мл абсолютного эфире при охлаждении до -78 С пропускают сухой хлор до появления устойчивой желтой окраски.Раствор промывают небольшим количеством воды, сушат хлористым кгш.ьцием и после упаривания растворителя остаток подвергают хроматографированию на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента пентан. Вииеляют фракцию с R 0,57, которая представляет собой после упариваниЯ пентана) индивидуальный по данным тонкослойной хроматографии 1-хлор-метилгексилперхлорат в виде маслообразной жидкости, раздагающейся при нагревании до . Выход мг (70%). ПМР-спектр (CCl, У, м.д.;: 5,07 (1Н, м, СНОСЮя), 3,85 (2Н д, СНС1) и 2,30-0,80 (11Н,м, протоны CfV. ) . Пример 2. В условиях приме1 при проведении реакции в этилацетате при температуре от О до 10 С и при использовании 2,14 г (20 в«оль перхлората лития получают 480 мг {S0%) 1-хлорметилгексилперхлората. Пример 3. Через раствор 205 мл (2,5 ммоль) циклогексена и 1,07 г (10 ммопь) перхлората, лития в 2 мл абсолютного эфира при охлгикдении до -. пропускают сухой хлор до появления устойчивой желтой окраски. Раствор пр ывают водой (5 мл), сушат хлористым кальцием, растворитель упаривают. Остаток хроматографируют на колонке; с силикагелем (элюент - смесь этилацетата и гексана, 1:4). Выделяют й акцию, име ющую Кг 0,55. Упариванием растворителя из этой фракции в вакууме получают 275 мг (51%) транс-2-хлорциклогексилперхлората, предстанляющего :собой маслообразную жидкость, разлагающуюся при нагревании выше ISO/C. ПМР-спектр (CCL, о, М.Д.): 4,95 {1Н, м, CHOClOjl, 4,05 (1Н, м, СНС1) и 2,9-1,1 (8Н, м, остальные протоны цикла). Из другой фракции,, имеющей ,43 после упаривания раствсфителя выделяют 85 МП (17%) цис-2-хлорциклогексилперхлората в виде бесцветного мас ла, разлагающегося при нагревании выше . ПМР-спектр (CCi, А,м.д.): 5,23 (м, 1Н, CHOClOj), 4,37 (м, 1Н, CHCl) и 2,8-1,3 (8Н, м, остальные протоны цикла). Пример 4. В условиях примера 3, используя 3,2 г (30 ммоль пер хлората лития, в качестве растворите ля этилацетата вместо эфира и пропус кая хлор при температуре от О до , получают 220 мг (40,5%) транс-2-хлорциклогексилперхлората и 70 мг (13%) цис-2-хлорциклогексилперхлората. ИммунотропНую активность предлага емых соединений определяют по их спо собности влиять на антителообразование (титры антител в сыворотке крови) и количество антиген-связывающих и розеткообразующих клеток (РОК) в селезенках алией, иммунизированных эритроцитами барабана (эталонньв тест антиген ). Эк пернменты проводят на белых мьвиах весом 18-20 г. Животных иммунизируют внутрибрюшинным введением 0,2 мл 10%-ноЯ взвеси эритроцитов барана: (5-10 клеток на Neaub). На седьмой день животных забивают и от каждой мькии в отдельную пробир ку собирают кровь. Пробирки помещают в термостат на 45 мин (37 С), а затем в холодильник на 1 ч (). После центрифугирования сыворотку, свободную от клеточных элементов, переносят в отдельные пробирки и затем в кюкротитраторе Такачи определяют тит{ж антител общепринятым методом. Одновременно из животных извлекают селезенки и готовят суспензии селезеночных клеток, в которых стандартньм способом выявляют клетки, связывающие эритроциты барана и формируюсше розетки, т.е. роэеткообразующие клетки. Результаты экспериментов по определению количества РОК обрабатывают статистически. Титры антител выражают в виде супрессивных индексов, которые получают делением средней величины log л титров антител в опыте на среднкио величину log 2 титров антител в контроле. Испытуемые. BebtecTBo вводят в течение грех дней перед иммунизацией в виде раствора в стерильном подсолнечном масле. Каждое вещество было исследовано в трех дозах, введенных в объемах 0,1, 0,2 и 0,4 мл масла на мыдь. Инвекцию антигена проводят через 24 ч после введения испытуемого вещества. Экспериментгшьные данные по исследованию иммунотропного дей-; ствия испытанных органических (Ь -перхлоратов приведены в таблице. . Средние величины числа РОК-10 и супрессивные индексы при исследовании иммунотропного действия / -хлор-; алкил(циклоалкил)-перхлоратов 1-Хлорметилгексилперчлорат 115 462 12 600 : Подсолнечное масло (контроль) Циклофосфан 150 Не характерно 0,46 Результаты экспериментов .свидетельствуют о том, что 1-хлорметилгексилперхлорат оказывает слабое иммунодепрессивное действие у мышей: это соединение незначительно снижает титры антител (,8) и умень-т шает количество РОК. Второе из изу.ченных веществ - 2-хлорциклогексилперхлорат обладает более выраженной нммунодепрессивной активностью: например, в дозе 600 мг/кг почти в 2 раза снижается число РОК,,3.

По сравнении) с известным иммунодепрессантом-циклофосфаном предлагаемые вещества обладают более низкой токсичн9стью: каждое из них не вызывает гибели.мышей в дозах 1000 мг/мг при внутрибрпшинном введении, в то время как для циклофосфаНа LD50 составляет 500 мг/кг, а доза эффективного действия его близка к токсичной.

1. |Э-Хлоралкил- или циклогшкил- перхлораты общей формулыi^r•^Н—CH-^2 ! ОСЮз С1где RT - Cj-алкил;R^ - водород или R Лн^-тетраме-тилен,обладающие иммунодепрессивной активностью.2.. Способ получения (J-хлоралкил- или циклоалкклперхлоратов общей формулыR-CH-CH-R^^: осюэ С1где R ^ - с ^-алкил fR- - водород или R^+Rj^-TeTpaMe-тилен,отличающийся тем, что, соответствующий олефин подвергают взаимодействию с хлором и перхлора- ' том лития в эфире или зтилацетате , 'при температуре от (-78) до (+10)'*С с последующей обработкой водой.(Лс:00 о со 00