Дигидрохлориды 9-замещенных 2(1-адамантил)имидазо (1,2- @ )бензимидазолов, обладающие иммунодепрессивным действием Советский патент 1990 года по МПК C07D487/04 A61K31/4188 A61P37/06 

цйи в концентрированной соляной лоте

Соединения формулы I получают с высокими выходами и вьщеляют обычными методами Строение синтезирован ных соединений подтверждают данными ИК спектров и элементного анализа

Пример :1, Дигидрохлорид 2-(1 адамантил)9 диэтиламиноэтил имидазо(I,)бензимидазола (1,а).

Смесь 4,9 г (10 ммоль) гидроброМИДа 3-( 1 адамантилкарбонилметил) 1 диэтиламиноэтил 2иминобензимида золина и 150 мл концлсоляной кислоты кипятят в течение ч, следя за протеканием реакции с помощью тонко слойнсй хроматогрфии Затем реакцион ную массу охлаждают и подщелачивают аммиаком до рН Выделивашееся масло экстрагируют хлороформом Хло роформ упаривают, а остаток раство ряют в ацетоне К ацетоновому раство ру прибавляют спирт,насыщенный хло ристым водородом до рН Выпавший осадок дихлоргидрата отфильтровывают, промывают ацетоном, эфиром Выход 4,15 г (90%) Белоснежные кристаллы 258-259°С (разл, из спирта, в запл капилляре) В ИК спектре ос нования (в хлороформе) наблюдаются полосы поглощения при 1500, 1530, 1593, 1622 см- (, ), характерные для этого гетероцикла

Найдено, %: С 64,5; Н 8,0; N 12,3; С1 15,1

25 J6 4---Z

Вычислено, %: С 64,8; Н 7,8;

N 12,1; С1 15,3

П р и м е р :2 Дихлоргидрат 2-.(1 адамантш1)9 морфолиноэтилимида зо(1,)бензимидазола (1,6).

Смесь 5 г (л/10 ммоль) гидробромида 3( 1 адамантилкарбонил)2 имино 1 морфолиноэтилбензимидазолина и 150 мл конц соляной кислоть кипятят ч, следя за реакцией с помощью тонкослойной хроматографии Затем ре акционную массу охлаждают, подщелачи вают аммиаком до рН , вьш,елившее ся масло экстрагируют хлороформом Хлороформ упаривают, а остаток крис таллизуют из петролейного эфира Бес цветные кристаллы 126, 27.Сл Кристаллы растворяют в адетоне и к полученному раствору прибав ляют спирт, насыщенньш хлористым во дородом до рН Осадок дихлоргид рата отфильтровьюают, промывают аце

тоном Выход 4,31 г (91%) Белоснеж ные кристаллы ,5 С (разл, из спирта, в запл капилляре) В ИК Спектре основания (в хлорофор ме) наблюдаются характерные полосы при 1500, 1530, 1593, 1622 см (, ).

Найдено, %: С 63,0; Н 7,4; N 11 ,6; С1 14,3.

C25-H:,,4NOCl2..

Вычислено, %: С 62,9; Н 7,2; N 11,7; С1

Биологическую активность заявляе мых соединений определяют по их спо собности влиять на иммунную систему организма животных

Опыты проводят на белых мышах самцах весом 2022:г Исследуемые соединения формулы I вводит внутри брюшннно по 50 мг/кг в день ежеднев но в течение 3 дней Соединение 1,а используют в виде раствора в 0,95%- ном растворе хлористого натрия, а соединение 1,6 в 2%-ном растворе ;крахмалав

{ Контрольным животным аналогичным образом вводят соответствующий объем растворителя Через сутки после по следней инъекции соединений животных иммунизируют эталонным антигеном - эритроцитами барана (по 0,5 мл 5% взвеси внутрибрюшинно)о На день после иммунизации животных забивают, собирают кровь и выделяют селезенки Селезенки взвешивают, гомогенизируют и известным методом Заалберга пиреде ляют количество антигенсвязывающих Или розеткообразующих клеток (РОК)

3

среди 10 мононуклеарных клеток се лезенки Результаты обрабатьшают ста тистически с использованием t кри терия Стьюдента В сыворотке крови определяют титры антител (гемагглюти нинов) к эритроцитам барана в микро ° титраторе Такачи (ВНР) общеприня тым методом В каждой группе по 10 jMbmieft Титры антител выражают в виде индекса депрессии (ИД): отношение средних титров антител, выраженных в log в опыте, к средним титрам анти тел log2 в контроле Величина ИД менее 0,7 свидетельствует о достовер ной иммунодепрессии

Результаты экспериментов приведе ны в табл 1 и;2 В табл представ лены данные влияния соединения 1,а на иммунный ответ у мышей к эритро цитам барана Б представлены

51

данные влияния соединения 16 на им мунный ответ мышей к эритроцитам ба рана Как видно из таблиц, предлагаемые соединения значительно угнетают как гуморальный, так и клеточный иммунитет. Индекс депрессии (ИД) для гемагглютининов составляет 0,2 и О,1 соответственно Количество ро зеткообразующих клеток на 10 ядро содержащих клеток селезенки при при менении соединения 1,а снижено от 64+9,6 в контроле до . При вве дении соединения 1,6 наблюдается сни жение количества РОК от 64+9,6 в контроле до 3,8+0,4

При изучении острой токсичности соединений установлено, что ЛДд-о для соединений 1,а составляет 224 (180-270), а для соединения 1,6 564 ()

Для- сравнения по той же схеме ис пытьшают эталонный иммунопрессант цитостатик циклофосфан, который на шел широкое применение в клинике Циклофосфан вводят внутрибрюпшнно в дозе 50 мг/кг ежедневно в течение

Наименование соединения

430396

3 дней, а через сутки после послед ней инъекции препарата мьш1ей имму низируют эритроцитами барана соот ветствуюш;им образом На день пос ле иммунизации животных забивают и в сыворотке крови определяют титры антител, а в селезенке количество розеткообразующих клеток в ответ на

антиген эритроциты барана

Как видно из таблиц, иммунодепрес сивный индекс для циклофосфана сос тавляет 0,6, а количество РОК в селе зенке 8,6нн2,3 (в контроле количест

15 во РОК 57,,2). ЛД для цикло фосфана при однократном внутрибрюшин ном введении мышам равна 200 мг/кг

Таким образом, новые соединения гидрохлориды 9 замещенных 2(

20 мантил)имидазо(1,)бензимидазол.а обладают мош;ным иммунодепрессивным действием, более выраженным, чем у эталонного иммунодепрессанта циюю фосфана, и менее токсичны Эти свой

25 ства заявляемых соединений могут быть использованы при трансплантации орга нов и тканей, а также при лечении аутоиммунных заболеваний

Таблица 1

Дигидрохлориды 9-3вмещенных

Контроль (0,95%.

хлористого натрия)

Дигидрохлорид 2(

мантил)9 диэтиламино

этилимидазо(1,)бенз

имидазола

Контроль (0,95%

хлористого натрия)

Циклофосфан

1,0

64+9,6

0,2

4+0,4

224()