Способ получения антител Советский патент 1981 года по МПК A61K39/00 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТЕЛ

I

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано в медицине при получении гомологичных препаратов антител или иммуноглобулина.

Известен способ получения антител путем спиртового фракционирования сыворотки с последующей обработкой хлороформом и отделением целевого продукта от осадка 1.

Однако известный способ не обеспечивает высокого выхода целевого продукта.

Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта.

Указанная цель достигается тем, что способ получения антител осуществляют путем спиртового фракционирования сыворотки с последующей обработкой хлороформом и отделением целевого продукта от осадка, осадок после отделения целевого продукта подвергают элюции дистиллированной водой при рН 11,0-11,1 в соотношении осадка и воды 1:4 с дальнейшей концентрацией раствора методом воздушного диализа при 6-8°С до содержания белка 5-7%.

Пример L При спиртовом фракционировании 2л сыворотки к вирусу клещевого энцефалита на стадии обработки хлороформом получают 150,0 г осадка. Осадок эмульги

руют в 600,0 мл дистиллированной воды, добавляют 1 н раствор NaOH до рН 11,0- 11,1,встряхивают 30 мин, центрифугируют при 16000 об/мин 10 мин при . Добавляют 1 н раствор НС1 до рН 7,0. Повторно центрифугируют при 16000 об/мин 10 мин при 4-6°С. Центрифугат сливают в вискозный мешок и подвергают воздушному диализу при 6-8°С-в течение 48ч. Полученный препарат профильтровывают через стерилизующую пластину EKS-2,0. Объем стерильного препарата составляет 36,0 мл, концентрация белка 6,77о/о. В препарат добавляют сахарозу из расчета 0,5 г на 1,0 г белка. Раствор антител разливают в ампулы в объеме 2,7 мл и лиофилизируют. Растворение сухого препарата осуществляют в 1,5 мл дистиллированной воды.

Содержание белка в готовом препарате 1-0%.

Чистота по данным электрофореза на бумаге 97-98% гамма-и бета-глобулино вые фракции.

Специфическая активность в реакции торможения гем агглютинации (РТГА) 1: :160, в реакции биологической нейтрализации на белых мышах 3,0 логарифма индекса нейтрализации. Пример 2. При использовании хлороформенноро осадка, полученного в процессе производства противогриппозного иммуноглобулина при условиях, указанных в примере 1, концентрация белка в готовом образце достигает 9,5%. Чистота по данным электрофореза на бумаге 97--98 /о гамма-и бета-глобулиновые фракции. Специфическая активность по данным реакции торможения гемагглютинации к вирусу гриппа тип А 1:160, тип В Is; 160. Пример 3. При использовании хлороформеиного осадка, полученного в процессе производства противостолбнячного иммуноглобулина из донорской сыв оротки при условиях, указанных в примере I, концентрация белка в готовом образце достигает Чястота по данным электрофореза на бумаге 918% гамма-и бета-глобулиновые фракции. . Специфическая активность 100МЕ/мл. Использование предлагаемого способа палучения антител обеспечивает дополиительный выход иммунного белка за счет использования отходов производства в количестве 1,63 г на 100,0 г осадка, что позволяет получить дополнительно 12,0мл 10%-ного раствора иммуноглобулина из иммунной сыворотки. Формула изобретения Способ получения антител путем спир-. тового фракционирования сыворотки с последующей обработкой хлороформом и отделением целевого продукта от осадка,оглмнающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, осадок после отделения целевого продукта подвергают элюции дистиллированной водой при рН 11,0- 11.1 в соотношении осадка и воДы 1:4 с дальнейшей концентрацией раствора методом воздушного диализа при 6-8°С до содержания белка 5-7%. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Патент ЧССР № 88563, кл ЗОН 2/04, 1958.