Способ получения слизи из васILLUS мUсILаGINоSUS Советский патент 1982 года по МПК C12P1/04 

Изобретение относится к медицине, а именн к способам получения биологически активных веществ микробного происхождения. Известен способ получения слизи из Bacillus mucilaginosus путем культивирования пр дуцента на плотной питательной среде с последующим выделением целевого првдукта 1} Однако известный способ позволяет получить только 30-40 мл препарата из 1 л среды т. е. имеет низкий выход целевого продукта. Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта. Поставленная цель достигается тем, что при осуществлении способа получения слизи из Bacillus mucilaginosus путем культивирова- . ния продуцента на плотной питательной среде с последующим вьщелением целевого продук-та, продуцент предварительно культивируют на среде, содержащей 100-200 мл мясопеттонного бульона и 100-200 мл сенного отвара в течени 1-2 суток, а затем в течение 18-24 ч на плотней питательной среде, содержащей мясопептоннг ш агар 100-200 мл; хлористый натрий 0,5 1,0 г; сахар 1,5-3,0 г; 5%-ный раствор фенола 0,2-0,4 мл. При этом в качестве сахара используют глюкозу, сахарозу, мальтозу или левулёзу. Способ осуществляют следующим образом. В течение 1-2 суток культивируют Ва cillus mucilaginosus на питательной среде, содержащей 1(Ю мл мясопептонного бульона со 100 мл сенного отвара. Полученную культуру можно использовать не сразу, а хранить при комнатных условиях (6 мес. - срок наблюдения) во флаконах. При необходимости берут 1-2 капли полученной бульонной культуры и засевают ишателем на питательную среду, разлитую по ашкам Петри, компоненты которой взяты в следующих количествах: 100 мл мясопептонного агара, содержащего 0,5 г хлористого натрия; 1,5 - 3,0 г сахара; 0,1-0,2 мл 5%-ного фенола. Особенностью посева является то, что засеянные чащки не переворачивают на крьпику, чтобь избежать потери большого количества слизи. Посевы культивируют в термостате при . Через 18-24 ч инкубации вся по390верхяость питательной средь( в чашке RetpH покрывается тонкой пленкой , под которс содержится большое количество слизи. Если наклонить чашку Петри под углом 60-70. заметно как слизь под пленкой медленно гк рсмеидается по наклонной плоскости. Этот тест является критерием оценки результата образования слизи. Если посевы находятся длительное время в термостате, то слизь подсыхает и перемещеике жидкости под пленкой не наблюдается. Аналогичная картина отмечается и при недостаточной экспозиции культивирования или же при посеве на плохо приготовленную питательную среду. Для сбора слизи с поверхности питательной среды, торцом узкой стороны предметного стекла (стекло должно быть со шлифованными краями) всю слизь осторожно собирать иа край чашки Петрн, чтобы не снять поверхность агара, и слива ют во флакон юга копбу. Полученную слизь центрифугируют при бООО об/мин в течение 1 ч. Надосадочную густую жидкость из центрифужных стаканчиков собирают во флакон, осадок выбрасывают. Полученный препарат хранят в холодильнике или 1фя oi сутствии холодильника, флакон со слизью стерилизуют в автоклаве (1 атм - 20 мяя) if хр нят при комнатной температуре. Из 1 л среды получают 100-150 мл слизи. Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить выход целевого продукта в 3-4 раза, т. е. до 100-150 мл слизи из 1 л среды, в то время как прн применении известного способа 30-40 мл слизи. Формула изобретения 1.Способ получения слизи из Bacillus muci- laginosus путем культивирований продуцента на плотной питательной среде с последующим выделением целевого продукта, отлнчающнйс я тем, что, с целью повыпгення выхода целевого продукта, продуцент предварительно культивируют на среде, содержащей 100-200 мл мясопептонного бульона и 100-200 мл сенного отвара, в течение 1-/2 суток, а затем в течение 18-24 ч на плотной питательной среде, содержащей мясопептонный агар 100-200 мл; хлористый натрий 0,5-1,0 г сахар 1,5-3,0 г; 5%-ный раствор фенола 0,2-0,4 мл. 2.Способ по п. I, отличающийся тем, ЧТО; в качестве сахара используют глюкозу, сахарозу, мальтозу или левулёзу. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Под ред. М. О. Биргера. М., Медицина, 1967, с. 158.