Производные пуриновых дезоксинуклеозидов как концевые мономеры для синтеза политиодезоксинкулеотидов и способ их получения Советский патент 1982 года по МПК C07H19/16 

(5) ПРОИЗВОДНЫЕ ПУРИНОВЫХ ДЕЗОКСИНУКЛЕОЗИДОВ КАК КОНЦЕВЫЕ МОНОМЕРЫ ДЛЯ СИНТЕЗА ПОЛИТИОДЕЗОКСИНУКЛЕОТИДОВ И СПОСОБ Изобретение относится к синтезу биологически активных химических соединений, а именно производных пуриновых дезоксинуклеозидов, которые могут быть использованы как моно меры для синтеза политиодезоксинукле отидов. Известны например 5 З-Вг- производные рибонуклеозидов 1 и(27. а также 5 -0-То5-М -бензоилдезоксиаденозин З. Возможность замещения 5-электрофильных групп в таких соединениях-обусловливает их использование в межмолекулярных реакциях нуклеофильного замещения, например, с N -атомом собственного гетероцикли ческого основания. В первом случае образуются олиготионуклеотиды,во втором - н 51 циклонуклеозиды.. 5 -0-ToS-N -бензоилдезоксиаденози 3 используется как полупродукт для синтеза одного из мономеров политионуклеотидного синтеза, а также в ка4ectBe кЬнцевого (терминирующего) мо ИХ ПОЛУЧЕНИЯ номера для этого же синтеза. Это соединение довольно стабильно ввиду низкой реакционноспособности 5 -ToS группы,что с одной стороны, предотвращает образование N ,З-циклоаденозина в обычных условиях, а с другой делает его малоэффективным в межмолекулярных реакциях нуклеофильного замещения. Известен способ получения йодпроизводных пиримидиновых нуклеозидов Г , заключающийся в йодировании производных нуклеозидов метилтрифеноксифосфониййодидом в диметилформамиде. Но йодирование в этих условиях незащищенных пуриновых нуклеозидов не дает йодпроизводных, образуются N ,3-циклoнyклeoзиды вследствие внутримолекулярной циклизации. Целью изобретения является синтез высокореакционноспособных производных пуриновых дезоксинуклеозидов, которые могут быть использованы для политионуклеотидного синтеза. 39 Предлагаются производных пуриновы дезоксинуклеозидор формулы JCHg о о .где В - остаток N-бензоиладенина ил N изобутирилгуанина. Соединения формулы 1 являются ко цевыми мономерами для синтеза поли тиодезокси.нуклеотидов. Для понижения нуклеофильности l -атома гетероциклического основания и предотвращения образования по бочного N ,5-циклонуклеозида для йодирования используют N -бензоил-2 -дезоксиаденозин или N -изобутирил-2 -дезоксигуанозин. Способ согласно изобретению заключается в том, что М -бензоил-2 -дезоксиаденозин или м изобутирил-2 -дезоксигуанозин йодируют метилтрифеноксифосфониййодидом в диметилформамиде при комнатной температуре Полученные производные реагируют с тимидин-З-фосфотиоатом в 100 раз быстрее соответствующих тозильных производных. Это трудно было предви деть, исходя из литературных данных так как для более простых производных наблюдается обратная зависимость: алкилтозилаты в два раза реа ционноспособней йодалкильных производных в реакциях алкилирования. Пример 1. s -йод-N -бензо ил-2 ,5 дидезоксиаденозин (1). N -Бензоил-2 -дезоксиаденозин (0,35 г, 1 ммоль) растворяют в диме тилформамиде (1 мл) и к раствору до бавляют раствор метилтрифеноксифосфониййодида (0,5 г, 1,2 ммоль) в диметилформамиде (1 мл).. Реакционную смесь выдерживают 2Q мин, добав ют метанол (1 мл) и выливают в смес 15 мл 1 -ного раствора соды, содержащего 0,1 г тиосульфата натрия, и 15 мл хлороформа. Нижний слой отделяют на делительной воронке, промывают водой (4-20 мл) и после концен рирования до 2-3 мл наносят на колонку с силикагелем (26-1,7 см), уравновешенную хлороформом. Ступенчатая элюция хлороформом (50 мл), з тем раствором этанола в хлороформе при скорости 3 мл/ч дает 10500 единиц оптической плотности п 283 нм с,оединения (1). После удаления растворителя в вакууме осадок кристаллизуют из хлороформа. Кристаллы отфильтровывают, промывают хлороформом ( 1 мл) и сушат в вакууме. Выход 0,187 г (kQ%). Вещество гомогенно при тонкослойной хроматографии на силикагеле в системе хлороформ-метанол (), т.пл. 250С (с разл,). УФ-максимум () 283 НМ(Е: 20700), нм ( 28200). 255 нм(12500). Пример 2. 5 -Йод-N -изобутирил-2,5-дидезоксигуанозин (2). Йодирование м -изобутирил-2 -дезоксигуанозина (0,3 г, 1 ммоль) метилтрифеноксифосфониййодидом (0,5 г, 1,2 ммоль) в 2 мл диметилформамида в условиях примера 1 дает 0,32 (71%) соединения 2. После осаждения из спирта в-эфир вещество элюируют с силикагеля раствором этанола в хлороформе. Оно гомогенно при тонкослойной хроматографии на силикагеле в системе хлороформ-метанол (2:1 ), т.пл. (с разл.), УФ-максимум (этанол) 255-260 нм (16200), 281 им ( 11900). , Л рИ м е р 3- 2-Дезокси- гуанидид(3 5)-5 -дезокси-5 -тиотимйдилил-(3 5)-5 -дезокси-5 -тиоцитиди(3 5)5 -дезокси-5 тиоаденолилТетралитиевую соль 2-дезоксиtN -изобутирилгуанилил(3 5)-5-дезокси-5 -тиотимидилил ( 5 )-N -анизоил-5 -дезокси-5 -тиоцитидин -З-фосфотиоата (0,112 г,0,089 ммоль) растворяют при встряхивании в диметилформамиде (1 мл) и прибавляют раствор N -бензоил-25 -дидезокси-S-йодаденозина (О,082 г,О,178 ммоль) в диметилформамиде (1 мл). Через 6 ч к реакционной смеси добавляют ацетон (10 мл), выпавший осадок центрифугируют, промывают ацетоном (3 X А мл), сушат в вакууме. Осадок растворяют в 5 мл 12 -ного раствора , выдерживают 2 ч при , аммиак удаляют в вакууме, остаток растворяют в 2 мл 0,02 и. вещество выделяют путем гель-хроматографии на колонке с сефадексом G-25 (550 см). Элюцию проводят 0,02 М NH4HC03 8 20%-ном этаноле, рН 7,5Элюат, содержащий вещество, собирают , воду, удаляют упариванием в вакууме. Затем продукт лиофильно высушивают , Выход триаммонийной соли 5 (3) 0,109 г (96). УФ-максимум (Hijb 261 нм (37900), Kd при гель-хрома графии в указанных выше условиях 0,25. Ферментативное расщепление со динения (З) сырым змеиным ядом при в течение 10 мин при рН 8,5 дает 5 фосфаты 2 ,5-дидезокси-5-тиоаденозина, цитидина, тимидина ,5 -дидезокси-5 -тиогуанозин в близком к эквимолекулярному соотношении . Аналогичным образом может быть использован и 5-йод-Н -изобутирил-дидезоксигуанозин. 5 -Йод-н-бензоил-2 ,5 -дидезоксиаденозин. Найдено,V. С it3,6; Н 3,6; 0 27, IT lfeNjOjJ Вычислено,: С 3,9; Н З,; 27.28. 5-йод-Н -изобутирил-2 ,5 -дидезоксигуанозин. Найдено,: С 37,; Н ,3; 3 28,6 Ci4 HIS N5043 Вычислено,%: С 37,61; Н ,03; 328,38. Формула изобретения 1. Производные пуриновых дезокси нуклеозидов общей формулы где В - остаток N -бензоиладенина или N -изобутирилгуанина, как концавые мономеры для синтеза политиодезоксинуклеотидов. 2. Способ получения соединений по п. 1,0 тли чающийся тем, что Н -бензоил-2 -дезоксиаденозин или N -изобутирил-2 -дезоксигуанозин йодируют метилтрифеноксифосфониййодидом в диметилформамиде. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1.Патент Японии № 49-339263, кл. С 07 d 51/52, опублик. 197. 2.Патент Японии № 50-25 77, кл. С 07 d 19/06, опублик. 1975. 3.Chladek S. Nagyvary, Nucleophilic Reactions of Some NucleophfJIc Phosphorothloates y. Amer . Chem. Soc. 9,2079, 1972У .J .P.H. Vevheyden, Т.G. Moffatt. Halosugarnucleozids,J .Org. Chem., 35,2319. 1970.