3-Фтор-2,3-дидезоксигуанозин,проявляющий цитостатическую активность Советский патент 1985 года по МПК C07H19/16 A61K31/708 A61P35/00 

1 Изобретение отяосится к новым производным класса модифициронанных нуклеозидов, являющихся антиметаболитами обмена нуклеиновых кис/гот, конкретно к 3 -фтор-2 ,3 -дидезоксн гуанозину формулы I , „ NH г I НО проявлякцёму цитостатическую активность, который может найти применение в медицине в качестве высокоэффективного противоопухолевого средс на. Структурными аналогами предлагае мого соединения являются 2,3 -диде зоксигуанозин формулы И i 3 -фтор-2 ,3-дидезоксиаденозин формулы III М , :мн2 1 А Данных о биологической активност соединения формулы II в литературе не имеется. 3-Фтор-2,3 -дидезокси аденозин Ш проявляет цитостатичес кую активность. Ингибируя синтез нуклеиновых кис лот, антиметаболиты действуют как ц тостатические агенты. К числу широк применяемых в медицинской практике антиметаболитов, используемых для лечения злокачественных новообразо ваний, относится меркаптопурин 3J который является аналогом по назна чению для 3-фтор-2,З-дидезоксигуанозина. Однако серьезным недост ком меркаптопурина является его не /-t2 достаточчо высокая актиякость и плохая растворимостьп воде,что не позволяет Г1р(менять его в виде инъекций . Целью изобретения является новое производное класса модифицированных нуклеозидов, проявляющее высокую цитостатическую активность и расширяющее арсенал средств воздействия на живой организм. Цель достигается свойствами 3 фтор-2 ,3 -дидезоксигуанозина формулы (1), проявляющего высокую цитостатическую активность. Способ получения 3 -фтор-2 ,3 -дидезоксигуанозина (I) основан на реакции трансгликозгширования М и заключается во взаимодействии 5-0-ацетил-3 -фтор-2 ,3-дидезокситимидина (IV) с сильным производным (VI.) N -пальмитоилгуанина (V) при кипячении в безводном ацетонитриле в присутствии триметилсилильного эфира трифторметансульфоновой кислоты (трифлата) в качестве катализатора. Целевой продукт (1) выделяют в кристаллическом виде Етутем аммонолиза (раствор аммиака в метаноле) промежуточного 9-/5-0-ацетил-3-фтор-2, 3-дидезокси-/3-1 -рибофуранозил/-М2-пальмитоилгуанина (VII), который получают в индивидуальном К1)исталлическом состоянии в результате разделения продуктов реакции, используя колоночную хроматографию на силикагеле, О О(Нз)зЗ:С1 JL -NHC(CH2)(CH3) ОЗКСНзЬ / 0 . ЗКСНз)з {СНз)з31 j О НМ -СНз ч (трифлат) СГз80з5(СНз)з

О

NHC(CH2)i4CH3

N

ЛсО

V/I

О

SH,

w

-хУ

Fг

Пример. 3-Фтор-2,3 -диде зоксигуанозкн,

1,Ь г (4 моль) N -пальмитоилгу нииа (V) суспендируют в 13 мл гексаметилдисилазана и 0,7 мл триметш хлорсилана. Реакционную смесь кипятят, добавляя через 1 ч и 4 ч по 0,5 мл триметилхлорсилана. Через 5 ч полученный раствор упаривают в вакууме с добавлением толуола. Оставгоийся сиропообразный остаток силилированного №-пальмитоилгуанина (VI) растворяют в 15 мл безводного ацетонитрила, добавляют 0,68 г (2,4 ммоль) 3-фтор-2,3-дидез окси-5-О-ацетилтимидина (IV), а затем при перемешивании 0,55 мл (3,22 ммоль) триметилсилильного эфира трифторметансульфоновой кислоты (трифлата). Реакционную смесь кипятят 3 ч с удалением влаги, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают при перемешивании в 150 мл смеси насыщенного водного раствора КНСО и этилацетата (1:1, по объему) . юи разделяют, водньш слой промывают этилацетатом (2X50 мп Объединенные органические фазы фильтруют для удаления 0,4 г вьтавшего N -пальмитоилгуанина, затем упаривают в вакууме досуха с добавлением безводного бензола. Маслообразный остаток растворяют в хлороформе и наносят на колонну 120 см силикагеля (Kieselgel 60, Merk), заполненную в хлороформе. Колонну элюруют сначала хлороформом, а затем смесью хлороформ-метанол с постепе ным увеличением содержания метанола

отделяя фракции по 15 нл. Фракции 25-37 собирают отдельно и получают 320 мг (24,6%) 9-/3-фтор-2,3-дидезокси-5-0-ацетил-/3-В-рибофуранозил/5 -№-пальмитоилгуанина (VII), Эти фракщш после упаривания обрабатывают насыщенным NHj в метаноле при комнатной темперагуре. Спустя сутки реакционную смесь упаривают до не0 большого объема, вьтавшие кристаллы фильтруют, промывают етанолом, получают 120 мг (81%) 3 -фтор-2,3-ди дезоксигуанозина. При 265 С - потемнение кристаллов (при 290 С не пла5 вятся). УФ:Дма°кс 255 им (в 15000), плечо при 275 нм, 208 нм ( 16400). Масс-спектр: пик молекулярного иона с т/е 269, углеводный фрагмент /S/CyHgOjF cm/e 119, гетероцикли0 -ческое основание /В + Н/ cm/e 151, , CfoHj O NyF /269, 25/,

Биологические испытания проводят на культуре клеток асцитной карциномы Эрлиха. Опухолевые клетки выделяют из подбрюшинной полости предварительно зараженных белых мышей на 5-6-й день инкубации. Процент ингибирования размножения опухолевых клеток определяется путем визуаьпьного подсчета числа клеток в контрольном эксперименте, в присутствии 3 -фтор-. -2,i -дидезоксигуанозина и в присутствии 3-фтор-2,з -дидезоксиаденозина. Степень размножения клеток в

контрольных опытах составляла 86%

за 24 ч. В сравнении с контролем рост клеток, обработанных 3 -фтор-2 ,3 -дидезоксигуанозином и 3 -фтор-2 ,3 -дидезоксиаденозином, подавляется

0 следующим образом (см, таблицу),

Растворы 3 -фтор-2 ,3 -дидеэоксигуанозина (I) и 3 -фтор-2,3 -дндезоксиаденозина (111 ) в воде готовят путем последовательного разбав 5 ления концентрированных Ьбраз Меркаптопурин - аналог З-фтор-2 ,3 -дидезоксигуанозина по назначению испытывают в тех же условиях, но из -за его плохой раствори0 мости растворяют в диметилсульфоксиде.

Степень ингибирования размножения

опухолевьк клеток в присутстии меркаптопурина составляет 28% при кон5 дентрации 1- моль.

Данные испытаний свидетельствуют о высокой цитостатической активности 3 -фтор-2,3 -дидезоксигуанозина.

проявляющейся даже в концентрации 110 коль. Активность предлагаемого соединения сравнима но величине с активностью структурного аналога (111, и превышает примерно в 50 раз активность меркаптопурина.

3 - I Top-2 -3 -дидеэоксигуаноЗИН формулы О ХNH Н2 л но Чг проявляющий цитостатическую актив(Л ность. с ел О9 4 :

1 . I (

3 -Фтор-/ ,3 -дидезоксигуанозин (I)

З-Фтор-2 ,3 -дидезоксиаденозин (Ш)

46

82

100

53

68

98

100

64