Способ отделения и очистки стероидов,обладающих @ , @ -непредельной карбонильной функцией Советский патент 1982 года по МПК C07J1/00 A61K31/56 C07J5/00 C07J7/00 

I

Изобретение относится к усовершенствованному способу отделения и очистки стероидов, обладающихв ,р -непредельной карбонильной функцией.

Наиболее часто встречаются смеси природных стероидов и их синтенических аналогов, обладающие окси-, оксо- и d ,(Ь-непредельной карбонильной функцией и, как правило, содержащие большое количество примесей (до 60%) tl3.,

Известные способы выделения и очистки вышеуказанных стероидов подразделяются на физико-химические и химические.

К физико-химическим способам относятся экстракция, дробная кристаллизация, возгонка, хроматографйя 23.

Однако, большинство этих методов требует значительных количеств дорогостоящих специфических )еагентов, и часто не обеспечивает достаточно высокой степени очистки.

К химическим способам относятся такие, которые основаны на получении различных производных очищаемых ст ероидов, их отделении от сопутствующих веществ или примесей и разложении с последующим выделением чистого целевого продукта 3,

Недостатками химических способов являются высокая стоимость, необходимость выдерживания жестких условий, а также отсутствие специфичности по отнсииению к соединениям с d,ft-непредельной карбонильной функцией.

Наиболее ,близким к предлагаемому способу является способ выделения З-гидрокси- и Зоксостероидов из смесей, содержащих последние, заключающийся в том, что смесь, которая содержит З-ГИДРОКСИ- или 3-оксостероиды, растворяют в метилизобутилкетоне, обрабатывают дигидратом бромида кальция илиего раствором в метилизобутилкетоне, выпавший продукт отделяют, расцепляют водой и выделяют 3-гидрок-. си- и 3-оксостероиды известными методами Till. Недостатком способа является отсутствие селективности по отношению к стероидам, обладающим d ,(Ь-непредельной карбонильной функцией. Цель изобретения - повышение селективности процесса и улучшение качества целевых продуктов. Цель достигается тем, что при осуществлении способа отделения и очистки стероидов, обладающих d ,1Ь-непредельной карбонильной функцией от сопутствующих примесей, включающего обработку раствора исходной сме си стероидов в инертном органическом растворителе галогенидол) ; альция, отделение образовавшегося .комплекса, его разрушение и выделение целевого продукта, в качестве гдлогенида каль ция используют безводный хлорид каль , в качестве инертного органического растворителя - углеводороды, простые эфиры или хлороформ, а для разложения образовавшегося комплекса - смесь указанного инертного раст ворителя с водой, диоксаном, диметил суль оксидом или алифатическим спир.том C-i-Ctj, причем последние использу ют в эквимолярном количестве или с избытком по отношению к безводному хлориду, кальция. Преимуществом способа является по вышение селективности процесса и улу шение качества целевых продуктов. Пример 1.Из1г тестостеро на, 20 мл этиленгликоля в присутст. ВИИ 0,2 гп-толуолсульфокислоты полу чают 0,95 г кристаллического вещества с т.пл. 1б1-183С, которое по да ным тех и ИК-спектрометрии загрязне но исходным тестостероном. Полученную смесь растворяют в минимальном количестве хлороформа, растирают с 1 г безводного хлорида кальция и оставляют в вакуум-эксикаторе на ночь. Затем операцию повторяют дваж ды с интервалом 2 ч каждый раз прибавляя 3 мл хлороформа. Образовавшу ся смесь промывают хлороформом (3 X У 15 мл) и объединенные промывные ж кости упаривают. Получают 0,89 г 3-этилендиоксиандрост-5-ен-17р|-ола, т.пл. 186-187 0. По данным ТСХ и ИК-спектрометрии примесь тестостеро на в продукте отсутствует. Комплекс после промывки хлорофор мом обрабатывают (3x10 мл) смесью метаНОЛ-этилацетат ,(1,5:8,5). Объединенные экстракты фильтруют через 2 г окиси алюминия, упаривают и кристаллизуют из метанола. Получают 0,0 г спектрально чистого тестостерона, т.пл. 153-15+С. Пример 2.КзЗ,6г ацетата У-гидрокси-5,16-прегнадиен-20-она, 12 мл 30%-ной перекиси водорода в присутствии 6 мл н. раствора едкого натра в 300 мл метанола получают 3,2 г кристаллического , 17 --эпокси-3 Ь-гидроксипрегн-5-ен-20-она, т.пл. 189-190 0, который по данным ТСХ и ИК-спектрометрии загрязнен 3&-ГИДРОКСИ-5,1б-прегнадиен-20-оном. Полученную смесь растворяют в 10 мл тетрагидрофурана, растирают с 13 г безводного хлорида кальция и оставляют в вйкуум-эксикаторе на i ч. Затем операцию повторяют трижды, каждый раз прибавляя по 5 мл тетрагидрофурана, после чего смесь промывают тетрагидрофураном ( мл) и смесью тетрагидрофуранхлороформ, 1:.1 (), Объединенные промывные жидкости упаривают, остаток кристаллизуют из метанола. Получают 2,i5 г ,17А-эпокси-3 -гидроксипрегн-5-ен-20-она, т.пл. 193°С. Комплекс после промывки обрабатывают 50 мл смеси тетрагидрофуран-диметилсульфоксид (4:1), промывают тетрагидрофураном (2x15 мл), упаривают и кристаллизуют из метанола. Получают 0)б5 г ЗВ-гидрокси-5,1б-прегнадиен-20-она с т.пл. . По данным ТСХ и ИК-спектрометрии вещества однородны и соответствуют подлинным образцам. Примерз. 3,2 г смеси, содержащей 1 ,9 -г прогестерона и 1,3 г 16(1, 17d--3noKctl 5 -гидроксипрегн-5-ен-20-она, растворяют в 13 мл хлороформа, выливают раствор на 13 г безводного хлорида кальция, тщательно растирают и помещают в вакуум-эксикатор на 3 ч. Затем операцию повторяют 6 раз, каждый раз прибавляя 5 мл хлороформа. Полученную смесь промывают хлороформом ( мл). Объединенные промывные жидкости упаривают наполовину, фильтруют через 5 г окиси алюминия и упаривают досуха. Получают 1,22 г кристаллического вещества. Кристаллизация из метанола дает 1,02 г 1бс1,17о1-эпокси5(эоксипрегн-5-ен-20 она, т.пл. . Комплекс после промывки хлорофор мом обрабатывают 30. мл смеси хлороформ-диок.сан (7:3) и промывают хлороформом (2x20 мл). Объединенные эк ракты фильтруют через 5 г окиси алю миния и упаривают. Получают 1,72 г кристаллического вещества, т.пл, 12 . Кристаллизация из этанола да ет 1,5б г прогестерона, т.пл. 121122°С (иглы). По данным тех и ИК-спектрометрии вещества однородны и соответствуют подлинным образцам. Пример . Q ,8В г неочищенного холеста-2,4-диен-6-она, полученного известным способом растворяю в 6 мл эфира, растирают с 7 г безводного хлорида кальция и оставляют в вакуум- эксикаторе на 1 ч. Затем операцию повторяют трижды, каждый раз прибавляя 3 мл эфира. Полученную смесь промывают эфиром (6x10 мл фильтраты отбрасывают,после чего обрабатывают 25 мл смеси эфир-этанол (9:1) и промывают эфиром (2x15 мл). Объединенные экстракты фильтруют через 2 г окиси алюминия, упаривают и кристаллизуют из этанола. Получают 0,79 г холеста-2,-диен-6-она, т.пл. 130°С (иглы), По данным тех и ИК-спектрометрии примеси в продукте отсутствуют. Пример 5. 0,32 г 19-нор-холеста-1,3,5(10)-триен-6-она, полу ченного в виде темного масла, растирают с 3 г безводного хлорида кальция в присутствии 2 мл гексана и оставляют в вакуум-эксикаторе на ночь. Затем операцию повторяют дважды, каж дый раз прибавляя по 1 мл гексана. Полученный комплекс промывают тетрагидрофураном ( мл), затем обрабатывают 20 мл смеси эфир-метанол (19:1) и промывают эфиром ( мл). Объединенные .экстракты фильтруют через 1 г окиси алюминия,упаривают и кристаллизуют из пент.ана. Получают г 19-нор-холеста-1 ,3,5(10Ьтриен -6-она, т.пл. 110-111°е. По данным тех и ИК-спект ометрии примеси в продукте отсутствуют. Пример 6. 0,65 г прогестерозагрязненного холестерином (й 3) рартирают с 5 г безводного хлориДа магния в присутствии 0,5 мл вазелинового масла, емесь оставляют в ва53куум- эксикаторе, повторяя растирание трижды через 2-3 ч. Через 2 ч смесь промывают гексаном (4i10 мл), эфиром (ЗЧО мл), тетрагидрофураном (З х х5 мл) и фильтры отбрасывают. После этого разлагают 2 мл смеси тетрагидpoфypaн-мeVaнoл (20:1) и промывают тетрагидрофураном ( мл). Объединенные экстракты фильтруют через 2 г окиси алюминия, упаривают и кристаллизуют из этанола. Получают 0,6 г прогестерона, т.пл. 121-122С. По данным тех и ИК-спектрометрии примесь холестерина отсутствует. Пример 7. Зг тестостерона, загрязенного холестерином (Л Ц%), растворяют в 10 мл тетрагидрофурана, растирают с 11 г безводного хлорида кальция и оставляют в вакуум-эксикаторе на ночь. Затем операцию повторяют трижды, каждый раз прибавляя 3 мл тетрагидрофурана. Полученный комплекс промывают тетрагидрофураном ( мл) и фильтраты отбрасывают, после чего обрабатывают 5 мл смеси тетрагидрофуран-вода (+3:2) и промывают тетрагидрофураном (2x10 мл). Объединенные экстракты фильтруют через 6 г окиси алюминия, упаривают и кристаллизуют иэ метанола.Получают 2,6 г тестостерона, т.пл. 153-15 С. По данным тех и ИК-спектрометрии примесь холестерина отсутствует. Пример 8. Из1 г.ацетата дезоксикортикостерона, 12 мл 2-метил-2-ЭТИЛ-1,3-Диоксолана в присутствии О,1 г п-толуолсульфокислотц получают 0,85 г кристаллического 3-этиленкеталя ацетата дезоксикортикостерона, т.пл. 198-205 е, который по данным тех и ИК-спектрометрии загрязнен исходным ацетатом дезоксикортикостерона. Полученную смесь растворяют в 5 мл хлороформа, растирают с 9 г безводного хлорида кальция и оставляют в вакуум-эксикаторе на 2 ч. Затем операцию повторяют, прибавляя 3 мл хлороформа, после чего смесь промывают хлороформом ( мл). Объединенные промывные жидкости упаривают, остаток кристаллизуют из смеси метанол-ацетон. Получают 0,7 г 21-ацетаа прегн-5-ен-21-ол-3,20-дион-3-этиленкеталя, т.пл. 207-208°е (иглы). По данным тех и ИК-спектрометрии примесь исходного ацетата дезоксикортикостерона в продукте отсутствует.

Пример 9. Из 5 г 21-ацетата кортизона, 75 мл 2-метил-2-этил-1,3-диоксолана в присутствии 0,2 г -толуолсульфокислоты получают Б.З г 21-ацетата прегн-5 ен-17 С, 21-диол- 5 -ЗИ1 ,20-трион-З-этиленкеталя, т.пл. 2б5-2б7°С, который по данным тех и ИК-спектрометрии загрязнен исходным 21-ацетатом кортизона. Полученную смесь растворяют в 10 мл хлоро форма, растирают с 10 г безводного Флорида кальция и оставляют в вакуумэксикаторе на 2 ч. Затем операцию повторяют четырежды, каждый раз прибавляя 3 мл хлороформа, после чего 5 смесь промывают хлороформом (5x10 мл). Объединенные промывные жидкости упаривают, остаток кристаллизуют из этанола . Получают 5.1 г 21-ацетата .прегн-5-ен-17с1, 21-диол-3,11-21-трион-3- 20 -этиленкеталя, т.пл. 270-271 С.

По данным тех и ИК-спектрометрии примесь исходного ацетата кортизона отсутствует.

Пример 10. Из 1 г прогестеро- на, 20 мл 2-метил-2-этил-1,3Диоксолана в присутствии О.,03 гП-толуолсульфокислоты получают 0,91 г прегн-5-ен4-3,2й-бисэтийенкеталя, т.пл. 178181 0, который по данным ТСХ и зо ИК-спектрометрии загрязнен исходным прогестероном и 20-этиленкеталем прогестерона. Полученную смесь растворяют в 5 мл хлороформа, растирают с 9 г безводного хлорида кальция и з5 оставляют в вакуум-эксикаторе на ночь. Затем операцию повторяют, пс ибавляя 3 мл хлороформа, после чего смесь промывают хлороформом CtxiO мл). Объединенные промывные жидкости упа- 0 ривают, остаток кристаллизуют из гексана. Получают 0,8 г прегн-5-ен-3,20-бис тиленкеталя, т.пл. J8.1 г...

По данным ТСХ и ИК-спектрометрии примеси в полученном продукте отсутствуют ,

Формула изобретения

. Способ отделения и очистки стероидов, обладающих cL,ft-непредельной карбонильной функцией, от сопутствующих примесей, включающий обработку раствора исходной смеси стероидов в инертном органическом растворителе гелогенидом кальция, отделение образовавшегося комплекса, его разрушение и выделение целевого продукта, отл1 чающийся тем, что, с целью повышения селективности процесса и улучшения качества целевых продуктов, в качестве галогенида кальция используют безводный хлорид кальция, в качестве инертного органического растворителя углеводороды, простые эфиры или хлороформ, а для разложения образовавшегося комплекса используют смесь указанного инертног растворителя с водой, диоксаном, диметилсульфоксидом или алифатическим спиртом C,-C(j, причем последние используют в эквимолярном количестве или с избытком по отношению к безводному хлориду кальция.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1, Физер Л., Физер И. Стероиды. М., Мир, 196, с. 17.

2.. Лабораторная техника органической химии. Под ред. Б. Кейла, М., Мир, 1966.

3. Губен-Вейль Методы органической химии, т. II, изд. 2, М., Химия, 1967.

Ц. Акцептованная заявка ФРГ № 2529521/0, кл. С 07 J 9/00, опублик. 21.01.77 (прототип).