Способ получения 3',6'-бис (диалкиламино)-нитрофлуоранов Советский патент 1982 года по МПК C07D311/82 

Изобретение относится к органическому синтезу, в частности к спо- собу получения 3,6 -бис(диалкиламино)-нитрофлуоранов, которые применяются в качестве исходных веществ для синтеза флуоресцентных метчиков белка оранжево-красного свечения.

Флуоресцентные метчики белка оранжево-красного свечения необходимы для приготовления люминесцирующих антител. Метод люминесцирующих антител находит чрезвычайно широкое . распространение в микробиологии, цито- и гистохимии.

Известен способ получения З ,6 -бис(диалкиламино)-нитрофлуоранов, заключающийся в конденсации .АХ.-диалкиламинофенола с ангидридом 4-нитрофталевой кислоты при кипячении в ксилоле или при нагревании при 180190 С без растворителя 1.

Образующуюся -смесь изомеров или используют в синтезе тетраалкилродаминизотиоцианатов без разделения или, как это описано для тетраметилнитрородаминов 2, хроматографируют на колонке, наполненной целлюлозой в системе метанол:вода 1:1. Выход, физико-химические характеристики и чистота продуктов не указаны, Rt

изомеров очень близки, поэтому метод разделения изомеров трудоемок и не технологичен.

Наиболее близким по технической сущности к Предлагаемому является способ получениянитротетраалкилродаминов, состоящий в нагревании 3 ,6-дихлор-5-(или-6) нитрофлуорана с солянокислым диэтиламином в

10 диметилформамиде в присутствии ацетата натрия в автоклаве при 200220 в течение 24 ч. Выход целевого продукта 46% от теоретического, в расчете на 3,6-дихлор-5(или-6) 15 нитрофлуоран 13.

Однако целевой продукт не охарактеризован, чистота его не указана. Выход целевого продукта по данному

методу 40%, молярные коэффициенты экстинкции сгсиртовых растворов З, б-бис(диалкиламино)-нитрофлуоранов в 1,5-2 раза ниже, чем молярные коэффициенты экстинкции целевых продук-

25 тов, полученных предлагаемым методом. Основным недостатком способа является необходимость работы под давлением, длительность процесса, низкий выход и недостаточная чистота целевого продукта. Цель изобретения - ускорение пр цесс а, повышение выхода и качества Целевого продукта. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получени 3 ,6 -бис(диалкиламино)-нитрофлуор на путем нагревания 3 ,б-дихлор-5-(или-б-)-нитрофлуорана с соляно кислым диалкиламином в присутствии катализатора при 220-230°С, в качестве катализатора используют хло ристый цинк и окись цинка. Пример 1. 5-Нитротетрамет родамин. В фарфоровой ступке тщательно растирают и перемешивают 2,5 г (О ,006М) 3 , б -дихлор-б-нитрофлуорана, 1,25 г (0,015М) солянокислого диметиламина, 2,03 г (0,015М) хлористого цинка и 0,65 г (0,008М) окиси цинка, полученную смесь нагре вают при 220-230 с в течение 5 ч, затем плав обрабатывают водой, отфильтровывают осадок, высушивают, экстрагируют кипящим спиртом 3 раза спиртовый экстракт упаривают, остаток промывают водой, 1%-ным раствором углекислого натрия, вновь водой сушат. Получено 2,0 г (80%) 5-нитро тетраметилродамина. ИК-спектр 5-нитротетраметилродамина (Р, ) : 2980-2850 (СН,,); 1720 (); 1610-1570 (ароматическо кольцо); 1350 (ЫОг). Тонкослойная хроматография на пластинках в системе пиридин: хлоро (2:1) R 0,17. . Молярный коэффициент экстинкции спиртового раствора 5-нитротетраметилродамина (5,53+0,07) Ю при Л тах 440+2 нм. Пример 2. 4-Нитротетрамети родамин. В фарфоровой ступке тщательно растирают и перемешивают 2,5 г (О,ООбМ) 3,6-дихлор-5-нитрофлуорана, 1,25 г (0,015 М) солянокислог диметиламина, 1,9 г (0,014 М) хлористого цинка и 0,65 г (0,008М) окиси цинка, полученную смесь нагре вают при 220-230 5 ч. Реакционную массу обрабатывают как указано в примере 1. Получено 1,75 г (70%) 4-нитротетраметилродам на. ИК-спектр 4-нитротётраметилродамина (Р, см-) : 3000-2850 (CHj); 1720 (); 1610-1570 (ароматическо кольцо), 1350 (N0). Тонкослойная хроматография на пластинках в системе пиридин: хлороформ (2:1) Rt 0,30. Молярный коэффициент экстинкции спиртового раствора 4-нитротетраметилродамина 3,66+0,03 Ю принта 547±3 нм. Пример 3. 5-Нитротетраэтилродамин. В фарфоровой ступкетщательно растирают и перемешивают 4,14 г (0,01 М) 3 ,6 -дихлор-6-нитрофлуорана, 3,3 г (0,03 М) солянокислого диэтиламина, 4,1 г (0,03 М) хлористого цинка, 1,6 г (0,02 М) окиси цинка, полученную смесь нагревают при 220-230°С в течение 4 ч. Полученный плав обрабатывают как указано в примере 1. Получено 3,32 г (70%) 5-нитротетраэтилродамина. ИК-спектр 5-нитротетраэтилродами- о на (), см) : 1780-1760 (); 1720-1710 (); 1600, 1570 (ароматическое кольцо), 1350 1340 (N02). Тонкослойная хроматография на пластинках Situfo Rt 0,34 в сис- теме пиридин-хлороформ (1:1) . Молярный коэффициент экстинкции спиртового раствора 5-нитротетраэтилродамина (7, 21 ±0,07) Ю при Я. maic 556+4 мм. Пример 4. 4-Нитротетраэтилродамин. В фарфоровой ступке тщательно растирают и перемешивают 2,07 г (0,005М) З,б -дихлор-5-нитрофлуорана, 1,65 г (0,015 М) солянокислого диэтиламина, 2,05 г (0,Ol5M) хлористого цинка, 0,81 г (0,01М) окиси цинка, Полученную смесь нагревают при 220 230°С 4 ч. Реакционную массу обработали как указано в примере 1. Получено 3,56 г (75%) 4-нитротетраэтилродамина. ИК-спектр 4-нитротетраэтилродамина ( |), см ) : 1760 () , 1720-1710 (), 1595, 1570, 1470 (ароматическое кольцо); 1350-1340 (N0) . Тонкослойная хроматография на пластинках ,64 в системе пиридин - хлороформ (1:1). Молярный коэффициент- экстинкции спиртового раствора 4-н11тротетраэтилродамина Г8 ,19+0,07 10 при Д- тах 555+3 нм. Формула изобретения Способ получения з ,6 -бис (диалкиламино) -нитрофлуоранов взаимодействием 3,6-дихлорнитрофлуоранов с солянокислым диалкиламином при нагревании при 220-230°С в присутствии катализатора, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и качества целевых продуктов, а также ускорения проесса, в качестве катализатора берут хлористый цинк и окись инка. пр„„„„ГГ - ПрТз „ер™„ «Л/С rr: r,. -„ a f ,3. п.гдр J ,.