Активированные эфиры N @ ,N @ -ди-трет-бутилоксикарбонилгистидина в качестве полупродукта для синтеза ди- и трипептидов Советский патент 1982 года по МПК C07D233/64 C07C103/52 

Изобретение относится к химическ соединениям, конкретно к.пентагалоидфениловым эфирам N, Ы ди-трет-бутилоксикарбонил-бок-гистидина об щей формулы tCH3 jCOCHH(IIlCOC6X5 сн о VeocfCHs)} CgX OH-ir . где X F, СС, которые являются полупродуктами дл синтеза ди- и трипептидов. Известны п-нитрофениловый эфир, ди-бос-гистидина 11 и N-оксисукци имидный эфир ди-бос-гистидина 23, используемые в качестве полупродук тов в пептидном синтезе. Однако указанные эфиры не устой чивы при хранении и поэтому не могут быть объектом товарного промыш ленного производства. Кроме тогЬ, известные производные гистидина тр но кристаллизуются и их получают с недостаточно высоким выходом. Цель изобретения - расширение ассортимента полупродуктов пептидного синтеза с улучшенными свойствами. Поставленная цель достигается новыми активированными эфирами , М ди-трет-бутилоксикарбонилгистидинаобщей формулы I, которые получают путем взаимодействия ди-БОК-гистидина с пентсшоидфенолом в присутствии конденсирующего реагента. В качестве конденсирующего реагента используют дициклогексилкарбодиимид (ДЦГК). Чтобы при получении эфиров наряду с образованием эфирной связи происходило образование комплекса пентагалоидфенола с имидазолом, фенольную компоненту необходимо брать в избытке, достаточном для протекания обоих процессов. При одномолярном соотношении компонентов, достаточном только для образования эфира, получаются Маслообразные, не кристаллизующиеся продукты. Вместо раздельного введения в реакцию пентагалоидфенола и ДЦГК можно применять известные комплексные соединения ДЦГК ЗС, X jOH (Х хлор или фтор).

Выделение новых активированных эфиров из реакционной смеси не представляет трудностей и производится обычным методом экстракции и промывок. Целевые продукты легко кристаллизуются в хроматографически и аналитически чистом виде из петролейного эфира или гексана.

Пример 1. Комплекс пентафтофенилового эфира N, ы -ди-БОК-ьгистидина с пентафторфенолом.

К охлажденному до +3°С раствору 1,8 г (4,1 мМ) кристаллического ком 1лекса ди-БОК-Ь-гистидина с бензолом в 10 мл тетрагидрофурана добавляют охлажденный раствор 4 г (5,3 мМ кристаллического L комплекса ДЦГК х SCfeFsOH в 20 мл в том же растворитле, смесь выдерживают 1 ч при +5°С и 5 ч при . Добавляют 20 мл воды, отделяют осадок дициклогексилмочевины и раствор упаривают в вакууме до половины объема. Остаток разбавляют этилацетатом, промывают водой, рассолом, высушивают и упаривают в вакууме. Остаток растирают в гексане, кристаллический осадок отфильтровывают, промывают гексаном и высушивают в вакууме над КОН. Получают 2,8 г (95,7%) целевого продукта с т.пл. 99-100°С. cij|,°-8,6°C (с 1, диоксан) .

Найдено, %: N 6,19 F 27,04.

Czs sNaOiFioВычислено, %: N 5,95; F 26,93.

Пример 2. Комплекс пентафторфенилового эфира N, Ы -ди-БОКгистидина с пентафторфенолом.

Соединение получают из ди-БОК-D-гистидина в условиях примера 1. Выход 71%, т.пл. 98-99°C,ci}20+8,0C (с 1, диоксан).

Примерз. Комплекс пентахлорфенилового эфира №,Н -ди-БОК-L-гистидина с пентахлорфенолом.

К охлажденному до +3-5°С раствору 2,1 г (4,8 мМ) кристаллического комплекса ди-БОК-Ь-гистидина с бензолом и 2,5 г (11 мМ) пентахлорфенола в 15 мл тетрагидрофурана добавляют раствор 1,1 г (5,3 мМ) ДЦГК в 5 мл тетрагидрофурана и смесь перемешивают 1 ч при и выдерживают 16 ч при w20°C. Выделение продукта реакции производят в условиях примера 1. После кристаллизации из петролейного эфира осадок на фильтре промывают гексаном, высушивают в вакууме и получают 3,9 г 92,5% целевого продукта с т.пл.

104-105 С.

Ю1°9,9 С (с 1, диоксан).

Найдено, %: С 38,70; Н 2,98; N 4,89; СР 39,96.

С г9 25 з07С«1о

Вычислено, %: С 38,65; Н 2,89;

N 4,83; СЕ 40,75.

Пример 4. Метиловый эфир 1 -БОК-Ь-гистилил-Ь-лейцина.

К суспензии 1,8 г хлоргидрата метилового эфира L-лейцина в 20 мл тетрагидрофурана добавляют 1,1 мл N-метилморфолина и раствор 5,0 г комплекса пентафторфенилового эфира диБОК-Ь-гистидина с пентафторфенолом в 15 мл тетрагидрофурана. Смесь перемешивают 5 ч, дважды добавляют по 0,3 мл N-метилморфолина, фильтруют, упаривают в вакууме, остаток растворяют в этилацетатеД- ЗО мл), раствор промывают водой, 5%-ным раствором лимонной кислоты, 1 М КНСОз, водой, рассолом, высушивают и упаривают в вакууме. В остатке получают метиловый эфир ди-БОК-Ь-гекстидил-L-лейцина в виде подвижного масла. Для снятия Н -БОК-группы остаток растворяют в 25 мл метанола, добавляют 5 мл диэтиламина и смесь кипятят 1,5 ч с обратным холодильником (или оставляют на 16-20 ч при . Раствор упаривают, остаток растворяют в 20 мл смеси этилацетата и эфира (1:1) и отфильтровывают соль диэтиламина и пентафторфенола. Фильтрат промывают водой и пептид извлекают 10%-ным раствором лимонной кислоты (3 раза по 15 мл). Кислотный экстракт подщелачивают твердым NajCO и пептид экстрагируют этилацетатом ( мл). Экстракт промывают водой, рассолом, высушивают NajSO и упаривают. Остаток в виде смолы кристаллизуют иэ смеси диоксана с циклогексаном. Кристаллический осадок отфильтровывают, промывают гексаном и после высушивания получают 2,3 г (85%) целевого дипептида с т.пл. 116ll8°C.CotJ|o -30°С (с 1, С,Н50Н) . Лит.данные: выход 57%, т.пл. 115117°С 3.

П р и м е р 4. N -бензилоксикарбонил-Ь-фенилаланил-О-гистидил-Ь-лейцин.

1,0 г хлоргидрата L-лейцилполимера (сополимер стирола с 1% дивинилбензола, 1 мМ лейцина) промывают 5%ным раствором триэтиламина в хлороформе, хлороформом и хлористым метиленом (3Ч5 мл), смешивают с раствором 1 г (1,4 мМ) комплекса пентафторфенилового эфира ди-БОК-О-гистидина с пентафторфенолом в 20 мл хлористого метилена и смесь перемешивают 5 ч Защищенный дипептидил-полимер промывают хлороформом (Зк.15 мл) , 30 мл 1 М ПСЕ в уксусной кислоте и выдерживают в 4.0 мл 1 М нее в уксусной кислоте 1 ч. Полимер моют хлороформо 5%-ным раствором триэтиламина в хлороформе, хлороформом и хлористым метиленом (3x15 мл). Добавляют растворы К бензилоксикарбонил- L-фенилаланина (0,5 г) и 0,4 г ДЦГК в хлористом метилене и суспензию перемешивают 16 ч. Пе.птидил-поли1 ёр фильтрют, промывают хлороформом, метано