Питательная среда для глубинного культивирования тRIсноDеRма VIRIDe 44-продуцента целлюлолитических ферментов Советский патент 1982 года по МПК C12N9/42 

Изобретение относится к ферментной отрасли микробиологической прокышленности и может быть использовано для получения целлюлозы методом глубинного культивирования микроскопических грибов на жидких питательных средах.

Известны питательные среды для выращивания различных продуцентов целлюлозы.

Для культивирования Trichoderma vlride известна питательная среда следующего состава,% г

Свекловичный жом 5,9 (NH 4)25041,23

KHjPO 0,5 .

которая обеспечивает накопление АФБ 5,,5Гед/мл ij .

Известны среды для культивирования гриба Trichoderma llgnorum ОМ534 следующего состава, г/л: а ) Молочная сыворотка, разбавленная в 3 раза водопроводной водой loop Натрий азотнокислый 3,0 Магний сернокислый 0,5 б ) Бумага фильтровальная20Натрий азотнокислый 5

Однозамещенный фосфат калия4,0 Магний сернокислый 0,5 Кукурузный экстракт 5,0 Вода водопроводная До веса АФБ На обеих средах состав.аяет 0,8-0,81 ед/мл 2.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту, является питательная среда для глубинного культивироваиия TrJchoderma vJride продуцентов целлюлолитических ферментов, содержащая свекловичный жом, одиозамещенный фосфорнокислый калий, оульфат мг1гния, сульфат аммония, а также зернокартофельиую барду, отруби :пшеничные, солодовые ростки ,натрий азотнокислый и воду при следующем соотношении компонентов, зес,%: Жом свекловичный 3,0 Однозамещенный фосфат калияО,2и

Магний сернокислой 0,03 Зернокартофельная барда 5,0 Отруби пшеничные0,5

Ростки солодовые1,43

Натрий азотнокислый 0,4 Аммоний сернокислый 0.,4 ВодаОстальное Активность целлюлозы составляет 8 ед/мл С 3 . Недостатками известной среды яв ляются низкая ферментативная актив ность и большая продолжительность культивирования (6 сут. Цель изобретения повышение ак тивности целлюлоз и сокращение времени культивирования продуцента Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для глу бинного культивирования Trtchoderm vlride 44 - продуцента целлкшолити ческих ферментсов, содержащая свекл вичный , однозамещенный фосфорнокислый калий, сульфат магния, су фат аммония и водУ,. дополнительно держит сульфат хрома и лизаты корм вых дрожжей при следующем соотноше нии компонентов, вес.%: Свекловичный жом 1,5-5,0 Лизаты кормовых жей ,.0,3-1,0 Однозамещенный фосфорнокислый калий 0,2-0,4 Сульфат Магния 0,02-0,05 Сульфат аммония 0,2-0,S Сульфат хрома 0,3-0,7 ВодаОстальное Использование в составе питател ной среды ЛИЗатов дрожжей и сульфа та хрома способствует повышению ак тивности фермента целлюлозы в куль ,тура.пьной жидкости и сокращению пр должнтельности культивирования с б-ти до 4-х сут. ./Пример К контроль), ПитаФеЛьная среда для выращивания прод (Цента целлюлозы, вес.%: Свекловичный жом.3,0 Пшеничные отруби 0,5 Зернокартофельная барда5,0 NaNOj0,4 (NN4)25040,4 MgS040,03 КН2Р040,2 Солодовые ростки 1,43 Вода;.Остально Ферментативная активность целлюл зы в культуральной жидкости после суток культивирования достигает 8 ед/мл по методу Сомоджи-Нельсона Субстрат - фильтровальная бумага, время гидролиза 1 ч при 50°С, П р ер 2. Готовят питательную-среду | следующего состава, вес.%: Свекловичный жом 1 г 5 Лизаты кормовых дрожжей0,3 (NH4)iS040,2 КН2Р040,2 MgS040,02 Сульфат хрома 0,03. ВодаОстальное Питательную среду готовят путем последовательной загрузки всех компонентов при постоянном перемешивании. рН среды доводят ортофосфорной кислотой до значения 4,4 и стерилизуют острым паром 1 Ч при О,8 ата. Активность целлюлозы культуральной жидкости.Тгichoderma vlride 44 достигает 10,4 ед/мл (метод тот же) nprf продолжительности культивирования 4 сут. : Пример 3. Готовят питательную среду следующего состава, вес.%: Свекловичный жом 5,0 Лизаты кормовых дрожжей1,0 (NH4)2S040,5 КН2Р040 MgS04 0,05 Сульфат хрома, 0,7 Вода - Остальное После 4-х., суток культивирования активностьЦеллюлазы в культуральной дкости Тг IcTToderm.a vlride 44 достигает 12 ед/мл (метод тот же). Таким образом, реализация изобре ения позволяет повысить активность . целлюлаз (на 50% ) и сократить сроки культивирования продуцента (на 48 ч ) Годовой экономический эффект составляет 7321 р. Формула изобретения Питательная среда для глубинного культивирования Т Кichoderma viride 44 - продуцента целлюлолитических ферментов, содержащая свекловичный жом, однозамещенный фосфорнокислый калий, сульфат магния, сульфат аммония и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения активности целлюлаз и сокращения сроков культивирования продуцента, среда дополнительно содержит сульфат, хрома и лизаты кормовых дрожжей, при следующем соотношении компонентов,вес.%. Свекловичный жом 1,5-5,0 Лизаты кормовых дрожжей0,3-1,0. Однозамещенный фосфорнокислый калий 0,2-0,4 Сульфат магния 0,02-0,05 Сульфат аммония О,2-0,5 Сульфат хрома 0,3-0,7 ВодаОстальное Источники информащ1и, принятые во внимание при экспертизе 1.Калунянц К.А. и др. Оптимизация состава пит ательной среды для биосинтеза цеЛЛйЛазы грибомTri chode rma vi rl de,-прикладная биохимия и микробиология, 12, 1979, № 2, с. 269. 2.Лобанок Л.Г. и др. Характерис-: тика свойств целлюлазнык комплексов Продуцируемых грибом Тг f choderma.. 5 Ifgnorum Ом 534 на. средах с ЗОЙ и лактаэой.- Прикладная микробиология. 12, 1976, С.227. . 979507-6 целлюлд- Опытно-пролмоШенный регламент биохимияпроизводства препарата целлюлазы 2, . Целловиридин ГЗХ, Главмикробйопр®м, 1978,(прототип;.