Питательная среда для культивирования менингококков Советский патент 1983 года по МПК C12N1/20 

(5) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МЕНИНГОКОККОВ

1

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к питательным средам для культивирования микроорганизмов.

Известна питательная среда .для культивирования менингококков, содержащая источник пептонов в виде мяного бульона, хлористый натрий, агар и дистиллированную воду. При использовании в среду вводят нативную сыворотку животных ij.

Однако известная питательная среда имеет плохие ростовые свойства, диагностика менингококковых инфекций при использовании этой среды затруднена и не достоверна.

Цель изобретения - улучшение росстовых свойств среды, облегчение и повышение точности диагностики менингококковых инфекций.

Цель достигается тем, что питательная среда для культивирования менингококков, содержащая источник

пептонов, хлористый натрий, агар и дистиллированную воду, в качестве источника пептонов содержит сухой гидролизат крови живртных и дополнительно содержит экстракт кормо вых дрожжей, глюкозу и dl-Tpeoai iна иодметилат при следующем соотношении компонентов, вес.%.

Сухой гидролизат

,0 крови животных 1,,5 Экстракт кормовых дрожжей 0,20-0,35 Натрий хлористый0,50-1,35 Глюкоза0,А-0;5 dl-Треоамина . . иодметилат 0,003-0,005 Агар сухой порошковый 1,7-1,9 20 Дистиллированная водаОстальное При использовании среды в нее дополнительно вводят нормальной сыворотки животных. Новая питательная среда представ ляет собой гигроскопичный порошок светло-коричневого цвета, легко рас ворима в воде. Приготовленная среда светлая, прозрачная, рН 7Л. П р и М е р Т. Все ингредиенты растворяют в дистиллированной воде устанавливают fW ,6, кипятят, фильтруют через ватно-марлевый филь хорошо размешивают, разливают ed флаконы, стерилизуют при (0,6 атм) в течение 20 мин. Содержа ние аминного азота должно быть 150-180 мг I. Перед использованием среду расплавляют, охлаждают доЛО-ЗО С, добавляют нормальную сыворотку животных (например, нормальную лошадиную сыворотку) и разливают в чашки Петри. .Ниже приведены примеры, показ1г1вающие улучшенные свойства новой питательной среды для культивирования менингококков по сравнению с известной средой. П р и м е р 2. Определяют открываемый минимум микробных клеток при посеве на новую и известную питател ную среду. Установили, что при посеве на новую среду колонии вырастают при наличии в посевном материа ле 100 микробных клеток в 0,1 мл, в то время как для образования коло ний при посеве на известную среду необходимо, чтобы посевной материал содержал не менее 1000 микробных клеток в 0,1 мл (таблица). П р и м е р 3. При посеве одного и того же материала на новую и известную питательную среду на ново среде вырастает вдвое большее число колоний таблица). Пример. Рост менингококков на новой среде регистрируется через 12-15 ч после посева, на известной среде колонии формируются на 5-6 ч позднее (таблица). П р и м е р 5. Через 20 ч после посева менингококков на новую среду образуются колонии диаметром 1,,0 мм. В аналогичных условиях инкубации на известной среде менингококки образуют колонии значительно меньших размеров (таблица). П р и м е р 6. При многократных пересевах менингококков на известную питательную среду наблюдают диссоциацию колоний из S-форм в OR- и R-формы, что в значительной степени затрудняет выявление возбудителя в посевном материале. При пересевах на новую среду диссоциация не наблюдается. Примеру. Изучение 67 экспериментальных серий новойпитательной среды, изготовленных с использованием как кислотных, так и ферментативных гидролизатов крови животных показало высокие ростовые качества новой среды, стабильную воспроизводимость получаемых данных. П р и м е р 8. Известная питательная среда имеет хлопьевидный осадок, затрудняющий просмотр Петри при оценке роста и развития менингококков. Непостоянная впащность, колебания величины рН, содер жания аминного азота являются причиной больших колебаний в накоплении биомассы, выявлении биохимических свойств штаммов менингококков, изменения антигенного состава клеток. Новая среда лишена этих недостатков. П р и м е р 9. Новая среда позволяет сократить на сутки диагностический анализ, что имеет особое значение в период массового обследования на бактерионосительство. В таблице приведена характеристика боилогических свойств тест-штаммов менингококка, культивируемых на новой и известных питательных средах. Таким образом, новая питательная среда для культивирования менингококков имеет улучшенные ростовые свойства, позволяет облегчить и повысить fo4HoctV диагностики менингококковых инфекций. Формула изобретения Питательная среда для культивирования менингококков, содержащая источник пептонов, хлористый натрий агар и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с цепью улучшения ростовых свойств, о легчения и повышения точности диагностики менингококковых инфекций, в качестве источника пептонов среда содержит сухой гидролизат крови животных и дополнительно содержит экстракт кормовых дрожжей, глюкозу и dl-треоамина иодметилат при следу щам соотношении компонентов, вес.1: Сухой гидролизат крови животных 1,3-1,5 Экстракт кормо0.20-0,35 вых дрожжей Хлористый нат0,50-1,35 рий 0,,5 Глюкоза dl-Треоамина 0,003-0,005 иодметилат Агар (сухой порошковый) 1,7-1,9 ДистиллированОстальноеная вода Источники информации, нятые во внимание при экспертизе 1, Руководство по микробиологичесдиагностике инфекционных болез. М. , Медицина, 1973, с. 331(прототип).