СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОРИСТОГО РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕГО МАТЕРИАЛА Российский патент 1995 года по МПК A61K38/43 C12N11/04 

Изобретение относится к биотехнологиии и может быть использовано при получении пористых ранозаживляющих материалов.

Известен способ получения пористого ранозаживляющего материала, включающий растворение в воде микробиального полисахарида аубазидана до концентрации 0,5-2,0 мас. с последующим замораживанием геля и сушкой в вакууме до достаточной влажности 8-12%
Однако препарат, получаемый этим способом, не активизирует местную реактивность ткани, что снижает его эффективность в отношении ускоренной регенерации гнойных ран.

Целью изобретения является активизация местной реактивности ткани.

Цель достигается тем, что в качестве микробиального полисахарида используют маннан, который растворяют в воде до концентрации 6-8 мас. а затем смешивают его с равным объемом раствора коллагеназы для ее иммобилизации. Рекомендуемое соотношение компонентов на стадии иммобилизации составляет 80-160 мг/тыс.КЕ.

Следующие примеры поясняют изобретение.

П р и м е р 1. Навеску маннана 7 г растворяют в 93 мл воды при 80^оС в течение 1 ч. Получают раствор с концентрацией 7 мас.

Раствор охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через батистовый фильтр и смешивают с равным объемом коллагеназы активностью 750 КЕ/мл.

В результате получают раствор иммобилизованной коллагеназы с содержанием носителя 93 мг/тыс.КЕ.

Полученную смесь заливают в пластмассовые кюветы, имеющие углубления для отливки тампонов в форме срезанных эллипсоидов.

Смесь замораживают до -45^оС в течение 1 сут и высушивают в вакуумном аппарате в течение 2 сут при максимальном разрежении 1˙10^-1 мм рт.ст. и температуре 30^оС.

Получают лиофилизированную форму иммобилизованной коллагеназы в виде губки с активностью 8 КЕ/мг препарата. Сохранение исходной активности фермента 77% Пористость (объемная доля пор) 97% при водопоглощении 2600%
П р и м е р 2. Навеску маннана 6 г растворяют в 94 мл воды при 80^оС в течение 1 ч. Получают раствор с концентрацией маннана 6 мас. Раствор охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через батистовый фильтр и смешивают с равным объемом коллагеназы активностью 500 КЕ/мл.

В результате получают раствор иммобилизованной коллагеназы с содержанием носителя 120 мг/тыс. КЕ.

Смесь замораживают и высушивают, как в примере 1.

Получают лиофилизированную форму иммобилизованной коллагеназы с активностью 5 КЕ/мг препарата. Сохранение исходной активности фермента 90% Пористость 96% при водопоглощении 2400%
П р и м е р 3. Навеску маннана 8 г растворяют в 92 мл воды при 80^оС в течение 1 ч. Получают раствор с концентрацией маннана 8 мас. Раствор охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через батистовый фильтр и смешивают с равным объемом коллагеназы активностью 1000 КЕ/мл.

В результате получают раствор иммобилизованной коллагеназы с содержанием носителя 80 мг/тыс.КЕ.

Смесь замораживают и высушивают. Получают лиофилизированную форму иммобилизованной коллагеназы с активностью 11 КЕ/мг препарата. Сохранение исходной активности фермента 88% Пористость 97% при водопоглощении 2800%
П р и м е р 4. Испытание пористых ранозаживляющих материалов из маннана.

Препараты, полученные в примерах 1-3, испытывают на модели гнойной поясничной области кроликов породы Шиншилла весом 2-3 кг. В опытную и контрольную группы берут по 20 кроликов. У кроликов выбирают поясничную область и наносят кожно-мышечную рану справа параллельно позвоночнику длиной 5 см. Рану инфицируют инъекцией Streptococcus aureus в область подкожной клетчатки. На четвертые сутки возникает флегмона мягких тканей. Ее вскрывают под местной анастезией 0,5% -го раствора новокаина (по 15 мл на кролика). Раны последовательно обрабатывают 3%-й перекисью водорода и фурацилином.

В опытной группе на раны накладывают полученные губки размером 25 см² (коллагеназная активность 620, 950 и 1280 КЕ для материалов примерно 2-4 соответственно) и покрывают стерильной марлей. На раны кроликов контрольной группы накладывают пористые повязки из аубазидана, полученные по прототипу. Повязки меняют ежедневно.

При использовании полученных предлагаемым способом повязок срок эпителизации составил 7,4±0,5 дней, тогда как в контрольной группе этот срок равен 12,6 ±0,8 дней. Срок очищения раны в опытной группе 19,2±2 дня, а в контрольной 28 ±4 дней. Эти результаты свидетельствуют об активизации местной реактивности ткани в опытной группе.

Использование предлагаемого способа по сравнению с прототипом позволяет активизировать местную реактивность ткани, что подтверждается снижением сроков эпителизации и очищения ран.

Использование: в биотехнологии, в частности при получении пористых ранозаживляющих материалов. Сущность изобретения: микробиальный полисахарид - маннан растворяют в воде до концентрации 6 - 8 мас.%, а затем смешивают с равным объемом раствора коллагеназы. Положительный эффект: достигается активизация местной реактивности ткани.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОРИСТОГО РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕГО МАТЕРИАЛА, включающий растворение микробиального полисахарида в воде, замораживание полученного геля и сушку в вакууме, отличающийся тем, что, с целью активизации местной реактивности ткани, в качестве полисахарида используют маннан, который растворяют до концентрации 6 8 мас. а затем смешивают с равным объемом раствора коллагеназы.