ШТАММ LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS - АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫЙ АНТАГОНИСТ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ Российский патент 1996 года по МПК C12N1/20 A61K35/66 C12N1/20 C12R1/23 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к антагонистам патогенной и условно-патогенной для человека микрофлоры и представляет собой биологически активный, антибиотикоустойчивый штамм Lactobacillus acidopilus, обладающий выраженной антимикробной активностью по отношению к возбудителям кишечных инфекционных заболеваний, в т.ч. холеры.

Антагонизм лактобацилл, ведущими звеньями которого является интенсивность кислотообразования, способность к продукции лизоцима и антибиотических веществ, обусловливает их использование в качестве физиологических биологических препаратов на основе жирных культур микроорганизмов симбионтов желудочно-кишечного тракта человека, как при лечении и профилактике острых кишечных инфекций и преодолении негативных последствий побочного действия антибиотикотерапии, так и при производстве кисломолочных продуктов.

Увеличение арсенала эффективных и доступных бактериальных препаратов и совершенствование существующих связано с необходимостью получения новых высокоактивных штаммов лактобацилл: 1) штаммов интенсивных кислотообразователей, способных продуцировать лизоцим (штаммов с повышенной антагонистической активностью и расширенным спектром антагонизма); 2) штаммов с полиантибиотикорезистентностью (для возможности комбинации бактерио- и антибиотикотерапии с целью повышения санирующего и профилактирующего эффекта); 3) штаммов, адаптированных к упрощенным условиям культивирования (т.к. лактобациллы факультативные анаэробы).

Предполагаемый штамм Lactobacillus acidophilus ВКМ В-2020 Д новый, в научно-медицинской и патентной литературе не описан.

Цель изобретения новый штамм Lactobacillus acidophilus ВКМ В-2020 Д, антибиотикорезистентный антагонист патогенной и условно-патогенной кишечной микрофлоры, в т. ч. холерных вибрионов, с повышенной кислотообразующей активностью и способностью к продукции лизоцима, адаптированный к аэробным условиям выращивания.

Штамм был получен в результате направленного отбора из исходной культуры слизистой ацидофильной палочки ПЭЗ ВНИМИ МММП СССР с селекцией по антагонистической активности по отношению к энтеропатогенной кишечной микрофлоре и по устойчивости к рифампицину и другим антибиотикам.

Культурально-морфологические и биохимические признаки штамма. Клетки штамма в мазках 48-часовых культур имеют вид граммположительных полиморфных палочек размером 1,1-1,5х7,0х8,0 микрона, клетки не образуют спор. Штамм адаптирован к выращиванию в аэробных условиях, что упрощает процесс культивирования, на поверхности плотной питательной среды МРС-2n (pH-6,5) в течение 48 часов при 37^oC изолированные бактериальные клетки образуют белые шероховатые колонии размером 1,5- 1,8 мм. В жидкой питательной среде МРС-1 (pH 6,3-6,6) культура бактерий вызывает появление белого порошкообразного осадка. Штамм ферментирует с образованием кислоты: маннозу, галактозу, лактозу, сахарозу; не ферментирует глюкозу, рамнозу, сорбит.

Устойчивость к антибиотикам (хромосомная): канамицину 500 (мкг/мл), полимиксину (4000 мкг/мл), неомицину (100 мкг/мл), невиграмону (2000 мкг/мл), ципрофлоксацину (1 мкг/мл), рифампицину (250 мкг/мл).

Штамм обладает более выраженной кислотообразующей активностью по сравнению с исходным (соответственно 2,5% и 1,4%), а также повышенным на 2 порядка антагонизмом по отношению к представителям родов Shigella, Salmonella, Vibrio choleraе, Echerichia coli, Staphilococcus, Pseudomonas, Proteus; продуцируют лизоцим.

Полученный штамм Lactobacillus acidophiilus депонирован во Всероссийской коллекции микроорганизмов ИБФМ РАН под номером ВКМ В-2020 Д и может использоваться:
в качестве основы при разработке антагонистических биологических средств профилактики и лечения кишечных заболеваний, вызванных патогенной и условно-патогенной микрофлорой;
с целью создания и совершенствования бактериальных препаратов для коррекции морфофункциональных нарушений желудочно-кишечного тракта как следствия побочного эффекта интенсивного медикаментозного воздействия и перенесенных кишечных инфекций;
как исходный субстрат при получении стартерных культур для производства кисломолочных продуктов;
для изучения антагонистических свойств лактобацилл как штамм-полиантибиотикорезистентный антагонист энтеропатогенной микрофлоры, в т.ч. возбудителей холеры, интенсивный кислотообразователь, способный продуцировать лизоцим.

Использование: медицинская микробиология. Сущность изобретения: штамм-антагонист энтеропатогенной микрофлоры, в т.ч. холерных вибрионов, обладающий полиантибиотикоустойчивостью. Штамм Lactobacillus acidophilus ВКМ B-2020 Д получен селекционным путем из симбиоза слизистой ацидофильной палочки ПЭЗ ВНИМИ MММП СССР. Штамм рекомендуется использовать в качестве основы антагонистических биологических средств в лечебно-профилактической и производственной практике.

Штамм Lactobacillus acidophilus ВКМ В-2020 Д антибиотикорезистентный антагонист возбудителей кишечных инфекций.