ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ИММУНОСТИМУЛЯЦИИ И СПОСОБ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 1999 года по МПК A61K35/78 A61K31/00 

Изобретение относится к области медицины, в частности, к иммунологии и может быть использовано для иммунотерапии и иммунопрофилактики заболеваний разной этиологии по назологическим единицам, связанных с поражением иммунной системы.

В настоящее время известно большое количество лекарственных средств для коррекции имунодефицитного состояния, получаемых на основе экстрактов из различных бактерий, растений и тимуса животных, а также известны их синтетические аналоги. К иммуностимуляторам биологической группы относятся препараты вилочковой железы, костномозгового происхождения, интерлейкинов, интерферона, фактора некроза опухоли, полисахариды и др. Из синтетических соединений достаточно широко используются нуклеинат натрия, леакадин, ликопид, пирогенал, левамизол и др. [Иммунология, 1990, т. 6, с. 21-23; Наука и жизнь, N 9, 1996, с. 64].

Однако биологические препараты сложно получать с идентичной активностью от партии к партии, что может привести к появлению побочных иммунных реакций организма.

Что касается синтетических препаратов, то они являются потенциально токсичными соединениями и как показано при лечении, например СПИДа, токсичность применяемых веществ для иммунной системы, а также гиперреактивность иммунной системы, которая может появляться при подавлении ее реакций, являются слабым местом современной иммунной терапии, использующей указанные выше иммуностимуляторы [OAZ. Osterreichishce Apotheker-Zeitung, N 9, 1996, 402-412].

Например, известен комплекс лекарственных средств, предназначенный для иммунокоррекции, включающий такие компоненты как тимозин или его фрагмент, аналог или производное с иммунорегуляторной активностью, интерлейкин или его активное производное и ингибитор репликации или обратной транскриптазы ВИЧ [Заявка РСТ N 94/13314, МКИ A 61 K 37/02, 23.06.94].

Такая комбинированная химиотерапия вызывает сильные побочные эффекты, в частности, из-за плохой переносимости интерлейкина.

Известен иммуноглобулиновый препарат lgA-ИГ, в котором содержание lgA увеличено до 30-40%, что позволяет расширить спектр его специфической терапевтической эффективности в отношении бактериальных и вирусных инфекций [Пат. России N 2073525, МКИ A 61 K 39/395, заявл. 22.06.93].

Но так как этот препарат получают путем солевой экстракции спиртового осадка сыворотки крови человека, то кроме трудностей, связанных с обеспечением идентичности партий, существует большой дефицит исходного сырья - крови человека.

Известен жидкий продукт для энтеральной питательной поддержки лиц, инфицированных вирусом иммунодефицита человека, содержащий гидролизат соевого белка, 30-60% частиц которого имеют молекулярную массу в пределах 1500-5000, источник интактного белка в количестве, достаточном для осуществления устойчивого эмульгирования гидролизата соевого белка и интактного белка в продукте, эмульгатор и источник жира [Пат. США N 5403826, МКИ A 61 K 37/02, НКИ 514-21, опубл. 04.04.95].

Но поскольку продукт предназначен только для орального употребления в виде эмульсии, то возможны побочные эффекты, связанные с нарушениями функций кишечно-желудочного тракта и могут возникать существенные трудности при необходимости увеличения дозировки продукта с целью повышения эффективности лечения.

Наиболее близким к заявляемому лекарственному средству по составу и назначению является комплекс препаратов, содержащий в качестве источника растительного белка препараты, полученные культивированием на соответствующей питательной среде смеси соевого молока или экстракта сои, обезжиренных соевых бобов, скорлупы ореха, спитого кофе, сердцевины кукурузных початков и других отходов пищевой промышленности с корнем солодки или его экстрактом в присутствии минеральных или органических производных германия [Заявка Японии N 63-208533, МКИ A 61 K 35/80, опубл. 30.08.88].

Однако наличие питательной среды в технологическом процессе получения смеси белковых препаратов приводит к появлению депрессантов и высокомолекулярных соединений в составе комплекса, что может вызвать побочные иммунные реакции организма при его использовании. Кроме того, в силу высокой химической активности германия, его содержание в препарате не должно превышать десятитысячных долей процента, что вызывает большие сложности для контроля и поэтому возникает опасность его передозировок в организме.

Анализ известных иммуностимуляторов, предназначенных для коррекции иммунодефицитного состояния при профилактике и лечении заболеваний разной этиологии, показывает, что применяемые в них компоненты (химиотерапевтические и другие препараты) могут содержать большое количество различных биологически активных веществ, иммунодепрессантов и балластных веществ, способных вызывать опасность передозировок и возникновения побочных эффектов, существенно снижающих профилактическую и терапевтическую эффективность таких средств.

В основу заявляемого изобретения положена задача создания лекарственного средства для иммуностимуляции и способа его применения, которые бы обеспечивал высокую эффективность при лечении и профилактике заболеваний разной этиологии, связанных с поражением иммунной системы, без проявления токсичности и побочных эффектов, присущих указанным аналогам.

Для решения поставленной задачи авторами предлагается лекарственное средство для иммуностимуляции, которое содержит экстракт белка ореха лещины, элеутерозиды и физиологический раствор при следующих соотношениях, об. %:
Экстракт белка ореха лещины - 5-15
Элеутерозиды - 10-45
Физиологический раствор - Остальное.

Заявляемое лекарственное средство в качестве элеутерозидов содержит лигнаны, выбранные из группы, включающей лигнаны A, B, C, D E, F, P.

Поставленная задача решается также тем, что предлагается способ иммуностимуляции, при котором вводят указанное выше средство, содержащее экстракт белка ореха лещины, элеутерозиды и физиологический раствор при следующих соотношениях, об. %: экстракт белка ореха лещины 5 - 15; элеутерозиды 10 - 45; физиологический раствор остальное, ежедневно, в виде инъекций из расчета 0,001-0,05 г на 1кг массы тела, а затем - гидразид изоникотиновой кислоты, алкилирующее соединение и пищевую кислоту исходя из их средних терапевтических доз.

В предлагаемом способе иммуностимуляции в качестве гидразида изоникотиновой кислоты вводят гидразид, выбранный из группы, включающей этнонамид, салюзид, тубазид, метазид. В качестве алкилирующего соединения вводят тиофосфамид. В качестве пищевой кислоты вводят уксусную или лимонную или яблочную кислоту.

Сущность предлагаемого лекарственного средства для иммуностимуляции и способа иммуностимуляции заключается в следующем.

Вводимый в организм добавочный растительный белок к белку, находящемуся в нормальной клетке, способствует, например, при злокачественных опухолях торможению роста опухоли и разрушению метастаз, а при СПИДе - нарушению репродукции вируса и синтезу его белков.

В результате создаются условия для восстановления поверхностных рецепторов клетки CD95 и метаболизма клетки.

В качестве наполнителя белкового препарата обычно используют физиологический 0,9%-ный раствор натрия хлористого.

Диапазон объемных соотношений между компонентами источника растительного белка в его средней терапевтической дозе: экстракт белка ореха лещины 5-15%, элеутерозиды 10-45%, физиологический раствор - остальное, является оптимальным для достижения эффективного лечения и профилактики заболеваний, связанных с поражением иммунной системы. При содержании экстракта белка менее 5% и элеутерозидов менее 10%, терапевтический и профилактический эффект лекарственного средства в целом снижается, а при содержании экстракта белка выше 15% и элеутерозидов выше 45%, возможны побочные явления, связанные с индивидуальной чувствительностью к растительным белкам и элеутерозидам.

Гидрозид изоникотиновой кислоты (этионамид, салюзид, тубазид, метазид) воздействует на гены, находящиеся в клетках лимфатических узлов и кодирующих добавочный растворимый белок, который, как отмечено выше, устраняет опухоли и метастазы, а также устраняет мутацию "поломки" в генах ДНК, восстанавливает пораженные клетки ДНК и обладает пролонгированным действием в создании длительной ремиссии у больных.

Алкивирующее соединение, например тиофосфомид, действуя на клетки в интерфазе, обладает ярко выраженным цитостатическим влиянием в отношении быстро пролиферирующих клеток и угнетает клеточное деление ферментов.

Пищевая кислота, например уксусная, проникая в желудочно-кишечную систему организма, разрушает кисло- и термоустойчивую оболочку вируса, обеспечивая тем самым нарушение вирулентности вируса в совокупности с вышеуказанными препаратами, что приводит к восстановлению пораженной клетки.

Указанные диапазоны ежедневно вводимой дозы раствора белкового препарата (0,001-0,05 г на 1 кг массы тепа) назначаются с учетом анализа состояния иммунной системы пациента и обеспечивают достижение эффективного лечения и профилактики, при отсутствии побочных явлений. Выраженные побочные явления и осложнения, связанные с индивидуальной непереносимостью растительных белков, могут возникнуть в случае увеличения дозы раствора белкового препарата свыше 0,05 г на 1 кг массы тела.

Заявляемая совокупность существенных признаков отсутствует в известных аналогах и, как показано ниже, обеспечивает достижение цели изобретения.

Предлагаемое лекарственное средство и способ его применения поясняются на конкретных примерах при иммунотерапии заболеваний с ярко выраженными поражениями иммунной системы.

Пример 1. Больной З., 58 лет, диагноз: хронический лимфолейкоз, развернутая стадия поражения всех групп лимфатических узлов, гепатоспленомеголия, анемия тяжелой степени тяжести, тромбоцитопения. ИБС, пароксизмальная тахокардия (по ЭКГ). Хронический лимфолейкоз впервые диагностирован 6 лет назад. Обследовался в онкоцентре. Периодически проходил курсы химиотерапии, от которых впоследствии отказался. Анализ крови клинический, при поступлении в онкоцентр: Эр-2,5, Нв-62 г/л, ЦП-0,8, Л-100 тыс., СОЭ-75 мм/час. Выраженный эмизоцитоз, Тр. 10 пром-25000. Тени Боткина 5-6 в п/з. Ретикулациты 18 пром, С-1, Л-98, М-1, билирубин общ. 19,4, прямой 12,1, непрямой 7,3, тимоловая проба 1,7, АЛТ 0,29, АСТ 0,38.

Проведено лечение комплексом: экстракт ореха лещины 2 г/л белка, в сочетании с элеутерозидом В, разбавленный 0,9% раствором натрия хлорида, доза 0,03 г/кг веса, ежедневно внутримышечно; метазид - ежедневно, таблетки по 0,5 г три раза в сутки; тиофосфамид и 5%-ную уксусную кислоту вводили по стандартной схеме, исходя из их средней терапевтической дозы.

После проведенного лечения практически полностью исчезли лимфоузлы, температура 36,7^oC, отсутствие токсикоза. Анализ крови: гемоглобин 124 г/л, лейкоциты 9,0х10⁹, эритроциты 4,0, цветной показатель 1, тромбоциты 180, СОЭ 28 мм/ч.

Пример 2. Больная Л., 1960 г. р. Была выявлена ВИЧ-инфекция в инфекционно-кожной больнице (ИКБ N 2 г. Москвы). Неоднократно госпитализировалась. Состояние больной оставалось средней тяжести, независимо от проводимого в течение 2-х лет лечения в ИКБ N 2. От дальнейшего лечения в ИКБ N 2 казалась, так как возник рецидив заболевания. Результат иммунологического исследования 3312 от 18.12. 1992 г. Российский научно-методологический центр по профилактике и борьбе со СПИДом подтвердил: в сыворотке крови методом ИФА обнаружены антитела к ВИЧ, методом ИБ обнаружены антитела к белкам ВИЧ-1:17, 24, 31, 41, 55, 66, 120, 160, 53. Куалограмма от 09.12.92. Выводы: инфекция ВИЧ стадия вторичных заболеваний ША; ангулярный хейлит, рецидивирующий кандидоз слизистых полостей рта и влагалища. На момент поступления к нам больной у нее отмечалась температура 39^oC, резкие головные боли в височно-затылочной области, боли в животе, неукротимый стул (5-10 раз). Объективно - дыхание (ДС) 24 в минуту, пульс 86 в минуту, артериальное давление 260/95. Дыхание поверхностное учащенное, кожные покровы чистые, бледные, носогубный треугольник - цианотичный. Аускультивно: над легкими отмечаются единичные влажные хрипы с обеих сторон. Лимфоузлы: заднейшие - до 0,5 см, переднейшие справа - до 0,6 см, слева - до 1,5 см, подчелюстные - до 1,5 см, подмышечные - до 0,5 см, паховые - до 0,5 см. Органы брюшной полости: живот болезненный в эпигастральной области, резкие боли в правой стороне. Печень: препальпация болезненная, симптом Кери положительный. Симптом Пастернацкого положительный с обеих сторон. Нервная система: сознание нечеткое, на контакт идет неохотно. С согласия больной нами проведено лечение комплексом по схеме, указанной в примере 1, причем, исходя из этиологии и патогенеза заболевания, комплекс осуществлялся с учетом дезинтоксикационной терапии и витаминной терапии. Курсы лечения проводились неоднократно, с учетом терапевтических отдыхов и с учетом диагностики определения крови и иммуностатуса в динамике для вхождения в стойкую ремиссию. Общий курс лечения составил 94 дня. Объективно: температура 36,6^oC, пульс 76 в минуту, частота дыхания 22 в минуту, кожные покровы - чистые, сыпи, геморагии нет, язык розовый, влажный, зева и гиперемии нет. Лимфоузлы: заднейшие, переднейшие справа, подчелюстные, подмышечные, паховые - без особенностей. Органы дыхания, кровообращения, брюшной полости, мочевыделительная система, нервная система - без патологий. Последующее обследование в ИКБ N 2 согласно выписке 76 от 10.04. 1996 г. показало, что ранее выставленный анализ может быть исключен.

Пример 3. Больной В., 26 лет. При обследовании в кожно-венерической больнице в сыворотке больного были обнаружены антитела к белкам ВИЧ-1. По согласованию с больным нами в 1995 г. было проведено лечение комплексом по схеме, указанной в примере 1. После проведенного лечения (45 суток) и при повторном обследовании в крови пациента антитела к белкам ВИЧ-1 отсутствуют (коагулограмма 03.10.95). Обследование, проведенное через 6 мес., подтвердило отсутствие ВИЧ-инфекции.

Анализ показывает, что при воздействии заявляемого лекарственного средства на ВИЧ/РНК происходит существенное снижение вирусной нагрузки (в 100 и более раз). Улучшается иммуноположительная картина CD4 Т-лимфоцитов, CD8 Т-лимфоцитов. Повышается синтез интерлейкина-2.

Например, через 5 мес иммунотерапии, проводимой согласно заявляемому лекарственному средству и способу его применения, на 150 мл концентрации 100.000 молекул РНК/ВИЧ в 1 мл плазмы крови вирусные мутивированные вибрионы уменьшились в 1000 раз. Этот эффект может быть обусловлен тем, что происходит нарушение репродукции вирусных вибрионов ВИЧ-инфекции и предотвращается встраивание геномной РНК вируса ВИЧ в клетку реципиента.

Заявляемое лекарственное средство и способ его применения назначались с учетом характера и стадии заболеваний и с положительным эффектом использовались при лечении больных (с их согласия) со злокачественными новообразованиями, с ВИЧ-инфекцией, с заболеваниями сердечно-сосудистой системы и эндокринной системы. Кроме того, заявляемое лекарственное средство и способ его применения были опробованы с целью иммунопрофилактики таких инфекционных вирусных заболеваний как грипп и разновидности гепатита, а также с целью иммунокоррекции патологий, обусловленных радиационным воздействием (группа участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС). Объективные показатели свидетельствуют о том, что в результате лечения улучшаются биохимические показатели (гемоглобин, АЛТ, АСТ и др.), происходит ингибирование роста опухолей и их уменьшение, предотвращается метастазирование. При иммунокоррекции увеличивается до нормы содержание Т-лимфоцитов, функционально активных Т-клеток и лимфоцитов, усиливается выработка интерферона и макрофагов. Побочных аллергических реакций не наблюдалось.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для иммунотерапии и иммунопрофилактики заболеваний разной этиологии, связанных с поражением иммунной системы. Лекарственное средство содержит экстракт белка ореха лещины в сочетании с элеутерозидами в физиологическом растворе. Соотношение компонентов источника растительного белка в его средней терапевтической дозе составляет, об. % экстракт белка ореха лещины 5-15; элеутерозиды 10-45; физиологический раствор остальное. Предложен также способ иммуностимуляции, заключающийся в том, что вводят раствор белкового препарата ежедневно в виде инъекций из расчета 0,001-0,05 г на 1 кг массы тела, а затем вводят гидрозид изоникотиновой кислоты - ежедневно, алкилирующее соединение и пищевую кислоту, исходя из их средней терапевтической дозы. Предложенный способ более эффективен при заболеваниях, связанных с поражением иммуной системы, а средство менее токсично, без побочных эффектов, присущих аналогам. 2 с. и 4 з.п.ф-лы

1. Лекарственное средство для иммуностимуляции, отличающееся тем, что оно содержит экстракт белка ореха лещины, элеутерозиды и физиологический раствор при следующих соотношениях, об.%:
Экстракт белка ореха лещины - 5 - 15
Элеутерозиды - 10 - 45
Физиологический раствор - Остальное
2. Средство по п.1, отличающееся тем, что в качестве элеутерозидов оно содержит лиганды, выбранные из группы, включающей лиганды А, В, С, D, E, F, P. 3. Способ иммуностимуляции путем введения лекарственных препаратов, отличающийся тем, что вводят лекарственное средство по п.1 ежедневно в виде инъекций из расчета 0,001 - 0,05 г на 1 кг массы тела, а затем - гидразид изоникотиновой кислоты, алкилирующее соединение и пищевую кислоту исходя из их средних терапевтических доз. 4. Способ по п.3, отличающийся тем, что в качестве гидразида изоникотиновой кислоты вводят гидразид, выбранный из группы: этионамид, салюзид, тубазид, метазид. 5. Способ по п.3, отличающийся тем, что в качестве алкилирующего соединения вводят тиофосфамид. 6. Способ по п.3, отличающийся тем, что в качестве пищевой кислоты вводят уксусную, лимонную или яблочную кислоту.