СПОСОБ ИНТЕРФЕРОНИНДУЦИРУЮЩЕЙ ИЛИ ИНТЕРФЕРОНАКТИВИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ И СРЕДСТВО ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ Российский патент 1999 года по МПК A61K38/21 A61K35/14 

Изобретение относится к медицине, а именно - к вирусологии, иммунологии и фармакологии, касается создания средства и способа для интерферониндуцирующей или интерферонактивированной терапии, которое может быть использовано для лечения вирусных, онкологических и других заболеваний и состояний, связанных с развитием вторичных иммунодефицитов.

Известен общепринятый способ индукции интерферона (ИФН) путем парентерального или перорального введения больному индукторов ИФН, которые, как известно, обладают широким спектром противовирусной активности, антипролиферативным и иммуномодулирующим действием.

Такой способ ИФН-индуцирующей терапии оказывается малоэффективным при глубоких дефектах системы ИФН, сопровождающих ряд острых и затяжных, хронически рецидивирующих вирусных инфекций, онкологические заболевания, а также астенические синдромы в предоперационные периоды или реконвалисценцию после тяжелых оперативных вмешательств (абдоминальный сепсис, пельвиоперитониты и т.д.)
Технической задачей данного изобретения является быстрая и эффективная реабилитация системы ИФН, иммунитета и неспецифической резистентности организма в целом. Для решения поставленной задачи для индукции ИФН (или активации системы ИФН) используется средство, содержащее извлеченную из вены собственную кровь больного, куда вводится тот или иной индуктор ИФН (или препарат ИФН) в соотношении 4:1 -3:1 соответственно. Полученную смесь выдерживают 15-20 минут и вводят обратно больному в/м или в/в. В процессе взаимодействия индуктора с кровью в пуле лейкоцитов больного, в результате более высокой, чем при обычном в/в или в/м введении, концентрации препарата, быстро запускается эффективный процесс индукции ИФН. Т.е. для индукции ИФН используется принцип аутогемотерапии. которая сама способствует повышению неспецифической резистентности организма при различных затяжных хронических воспалительных процессах. Экстракорпорально индуцированная или активированная под действием индуктора ИФН или препарата ИФН кровь больного оказывает при обратном введении эффективное реабилитирующее воздействие на систему ИФН и иммунитета больного организма.

Известно повышение эффективности иммунотерапии вирусных и онкологических заболеваний - так называемая терапия ИФН-активированными NK-лимфоцитами (1). Средство представляет собой кратковременно экстракорпорально обработанные малой дозой ИФН лимфоциты больного, выделенные путем лейкофереза. Средство вновь вводится больному в/в. Такая терапия значительно повышает NK-активность лимфоцитов больного и их альфа-ИФН-индуцирующую способность, увеличивает эффект противовирусного и антипролиферативного действия ИФН, что в совокупности оказывает более выраженный терапевтический эффект при вирусных и онкологических заболеваниях, чем просто в/м или в/в введение больших доз ИФН (2)
Предлагаемое изобретение отличается от прототипа тем, что для индукции-активации лейкоцитов/лимфоцитов используется цельная кровь больного без сложной процедуры их выделения (лейкоферез), требующей применения дорогостоящей аппаратуры, а активация/индукция может проводится не только ИФН, но и индукторами ИФН. Причем активированная или индуцированная кровь больного может быть введена обратно больному как в/м так и в/в. И поскольку вместе с собственной экстрапорально индуцированной или активированной кровью больного, средство содержит и индуктор ИФН, то такая терапия является по сути сочетанием аутогемотерапии, экстра- и интракорпоральной индукции и стимуляции системы ИФН.

Объективным критерием оценки эффективности такой терапии является степень и сроки коррекции и нормализации ИФН-статуса, совокупность тестов которого (содержание ИФН в крови больного, уровень продукции спонтанного, альфа и гамма ИФН лейкоцитами in vitro) - информативный показатель функционального состояния системы ИФН. Мониторинг системы ИФН больного, проведенный в ходе предлагаемой ИФН-индуцирующей терапии и оценка клинических результатов указывают на целесообразность его использования для быстрой и эффективной реабилитации как системы ИФН, так и организма больного в целом.

Техника и схема проведения ИФН-индцирующей терапии на примере использования индуктора ИФН - циклоферона.

Циклоферон-N-метил-N(альфа, D- глюкопиранозил)аммоний- 10-метиленкарбоксилат акридона. 12,5% стерильный водный раствор в ампулах по 2 мл. 250 мг активного вещества "Пописан", Санкт-Петербург. Является низкомолекулярным индуктором ИФН, что определяет широкий спектр его противовирусной активности и иммуномодулирующего действия. Применяется при лечении вирусных гепатитов (A, B, C, D), герпеса, цитомегаловирусной и хламидийной инфекциях, вторичных иммунодефицитах различной этиологии.

Пример 1.

В 10 см³ стерильный одноразовый шприц набирается 2 мл циклоферона, гепарин из расчета 50 ед/мл крови и 2 мл крови больного из вены. После 15-20 мин контакта при t=37^oC смесь вводят обратно больному в/м в наружный верхний квадрант ягодицы. На курс проводится 5 инъекций с интервалом в 48 часа, при каждой последующей инъекции количество крови увеличивается на 2 мл, т.е. в последовательности: 2,4,6,8,10 мл крови.

Пример 2.

В 20 см³ стерильный шприц набирают 2 мл циклоферона, гепарин из расчета 50 ед/мл крови и 10 мл крови больного. После 15-20 мин контакта при t=37^oC смесь вводят обратно больному в/в. Последующие инъекции проводятся через 48 часа, количество крови больного при которых уменьшается в последовательности: 10 мл, 8 мл, 6 мл, 4 мл, 2 мл. На курс 5 инъекций.

Оба типа ИФН-индуцирующей терапии были применены у больных с пельвиоперитонитом в послеоперационном периоде. Как правило у таких больных диагностировался смешанный тип инфицирования, обусловленный присутствием не только бактериальной (кокковой), но и хламидийной инфекции, а также вирусов простого и генитального герпеса (ВПГ-1, ВПГ-2), цитомегаловируса (ЦМВ), микоплазмы и Candida albicans. В таблице 1 представлены сравнительные данные показателей ИФН-статуса больных до и после в/м введения только циклоферона (1), только в/м аутогемотерапии (2) и в/м ИФН-индуцирующей терапии с помощью предлагаемого средства по примеру 1 (3).

Из данных таблицы 1 видно, что в случае использования в/м аутогемотерапии с циклофероном (пример N 1 предлагаемой ИФН-индуцирующей терапии) (на курс 5 инъекций) показатели продукции ИФН-α и ИФН-γ лейкоцитов больных повышаются в среднем до 256 ед/мл и 51,2 ед/мл соответственно. Внутримышечное же введение циклоферона без аутогемотерапии стимулирует продукцию ИФН-α в среднем до 112 ед/мл, оставляя почти без изменений ИФН-γ продуцирующую способность лейкоцитов (17,6 ед/мл в среднем). Таким образом, эффект иммуностимуляции с в/м аутогемотерапией на продуцию ИФН-α и ИФН-γ превосходит таковую без нее в 2,3 и 2,9 раза соответственно.

В таблице 2 представлены показатели ИФН-статуса у больных острыми геникологическими заболеваниями, которым в послеоперационном периоде проводился курс (5 инъекций) иммунотерапии в/в введением циклоферона.

Как видно из представленных данных в/в введение препарата оказывает несколько более выраженный стимулирующий эффект на продуцию лейкоцитами ИФН-α (в среднем 224 ед/мл) и ИФН-γ (в среднем 22,4 ед/мл), чем его в/м введение, однако менее эффективно, чем курс в/м введения циклоферона с аутогемотерапией (см. пример 1).

Динамика же изменений показателей ИФН-статуса таких же больных, которым ИФН-индуцирующая терапия проводилась вместе с в/в аутогемотерапией (см. пример 2), представленная в таблице 3, показывает, что стимуляция, коррекция и нормализация продукции ИФН-α и ИФН-γ лейкоцитами по этому способу достигается, как правило, после 2 - 3 инъекций при оптимальном соотношении крови больного и препарата, равным 4:1-3:1.

Как видно из представленных данных дальнейшее уменьшение количества взятой и обратно вводимой больному крови, т.е. уменьшение соотношения кровь - препарат (2: 1 или 1:1) приводит к снижению ИФН- индуцирующего действия препарата и связанному с ним снижению стимулирующего эффекта на ИФН-α и ИФН-γ продуцирующую способность лейкоцитов больных.

Таким образом, наилучшие результаты получены при в/в ИФН-индуцирующей терапии при соотношении кровь больного - индуктор ИФН, равном 4:1-3:1, при котором достигается максимальная стимуляция интерфероногенеза как продукции эндогенного ИФН (ИФН в плазме крови), так и по продукции ИФН-α и ИФН-γ лейкоцитами in vitro.

Клинические результаты
Клинические результаты применения предлагаемого средства (пример 2) ИНФ-индуцирующей/активированной терапии у больных с острыми воспалительными заболеваниями придатков матки в до- и/или послеоперационном периоде (n = 20) (на базе кафедры "Акушерства и гинекологии" РГМУ в гинекологическом отделении 31-й гор. больницы г. Москвы) выражались в нормализации температурной реакции в среднем на 3-5 сутки у всех больных, в купировании болевого синдрома на 2-3 сутки у 55%, на 4 сутки у 40% и только в одном случае на 8 сутки. Следует отметить заметное улучшение общего состояния, нормализацию аппетита, сна, повышение жизненного тонуса. Состояние внутренних органов по данным гинекологического обследования соответствовало субъективному улучшению : быстрое ограничение воспалительного процесса на 2-4 день проводимой терапии пальпаторно определяется образование с четкими контурами, менее болезненное, чем до лечения.

Пельвиоперитониты также ограничиваются в полости малого таза в первые 3 дня от начала терапии, что сопровождается улучшением общего состояния больных. В связи с этим отпала необходимость в оперативном вмешательстве у 8 (40%) больных, им была произведена только пункция тубоовариального (лапароскопия). образования и сократило объем оперативного вмешательства у 6 (30%) больных, позволив сохранить менструальную и детородную функцию. Послеоперационных осложнений у данной категории больных ни в одном случае не отмечено.

Результаты применения средства (пример 1) для ИФН-индуцирующей /активированной терапии выражались в более быстром клиническом улучшении : купируется болевой синдром, нормализуется температура, сокращается время пребывания больных в стационаре в среднем на 4 дня. Однако при увеличении количества аутокрови в ряде случаев отмечается болезненность инъекций и гипертермия. Поэтому пример 1 предпочтительнее применять при хронических воспалительных процессах.

Из приведенных данных видно, что эффективное включение системы ИФН с помощью предлагаемого средства для ИФН- индуцирующей/активированной терапии опосредует быструю нормализацию и иммунореабилитацию ИФН-статуса, что коррелирует с повышением и ускорением клинической реабилитации организма больных в целом.

Источники информации
1. Т. Kishida, К. Uno, A. Kishi, J. Setoguchi, H. Nitta, S. Yokoyama et al. A New Approach to Immunotherapy of Cancer using Interferon Activated NK Lymphocyte (IFNANK - Therapy). Pasken Journal 1995, N 7-8, 51-60.

2. Т. Kishida, К. Uno, A. Kishi, J. Setoguchi, M. Tanigawa, H. Nitta, H. Yoneyama ehal.

3. A New Approach to Cancer Immunotherapy - IFNANK -therapy - Present Achievements and Future Challenges. Pasken Jornal 1997, N 9 - 10, 15-23.

Изобретение относится к медицине и касается создания средства и способа интерферониндуцирующей и интерферонактивирующей терапии. Средство содержит активный компонент - индуктор интерферона или интерферон и собственную кровь больного. При этом соотношение крови и активного компонента составляет 4: 1-3: 1 в общем объеме 10-8 мл. Собственную кровь больного экстракориорально обрабатывают активным компонентом, выдерживают в течение 15-20 минут и вводят обратно больному внутривенно или внутримышечно. Изобретение способствует быстрой иммунореабилитации системы ИФН и повышает эффективность клинической реабилитации больного организма. 2 с.п. ф-лы, 3 табл.

1. Средство для интерферониндуцирующей или интерферонактивной терапии, содержащее активный компонент и наполнитель, отличающееся тем, что в качестве активного компонента оно содержит индуктор интерферона или интерферон, а наполнителя - собственную кровь больного, при этом соотношение крови и активного компонента составляет 4 : 1 - 3 : 1 в общем объеме 10 - 8 мл. 2. Способ интерферониндуцирующей или интерферонактивированной терапии путем введения средства, вызывающего иммунореабилитацию системы интерферона, отличающийся тем, что в организм пациента вводят средство, содержащее индуктор интерферона или интерферон и собственную кровь пациента, которую экстракорпорально обрабатывают активным компонентом, выдерживают 15 - 20 мин и вводят пациенту внутривенно или внутримышечно.