ТУБЕРКУЛОСТАТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО Российский патент 2000 года по МПК A61K31/513 A61P31/06 

Изобретение относится к медицине, в частности к фтизиатрии, и касается лекарственных препаратов, содержащих органические активные ингредиенты.

В настоящее время для лечения туберкулеза используют ряд основных химиотерапевтическик препаратов: производные изоникотиновой и парааминосалициловой кислот и антибиотики (стрептомицин, рифампицин). Однако химиотерапия туберкулеза осложняется первичной и вторичной лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулеза (МБТ) к известным препаратам. В последние годы растет число больных, инфицированных МБТ, исходно устойчивыми к основным туберкулостатическим препаратам. Поэтому постоянно идет поиск новых туберкулостатических средств (а. с. СССР N 523084 МПК C 07 C 109/08, A 61 K 31/00, 1976; патент РФ N 1490907 МПК C 07 D 239/60, A 61 K 31/505, 1996).

Наиболее широко используемым и самым эффективным туберкулостатическим препаратом в настоящее время является изониазид - гидразид изоникотиновой кислоты, выбранный за прототип (Машковский М.Д. Лекарственные средства. - Вильнюс, 1993. - Ч. 2. - С. 278). Однако при его применении происходит быстрое развитие устойчивых форм МБТ к этому препарату. У 70-ти% больных, леченных изониазидом, через 3 месяца после начала лечения развивается устойчивость к нему, а 30% больных переходят в разряд хронических больных. Поэтому весьма актуальна задача расширения ассортимента туберкулостатических средств.

Известен лекарственный препарат "Фторурацил" - 2,4-диоксо-5- фторпиримидин, который относится к антиметаболической группе цитостатическик средств, применяется при лечении рака желудка, толстой и прямой кишки, рака молочной и поджелудочной желез, яичников и выпускается в виде 5%-ного раствора натриевой соли (Машковский М.Д. Лекарственные средства. - Вильнюс, 1993. - Ч. 2. - С. 402-403).

Однако известный препарат фторурацил никогда не применялся как туберкулостатическое средство.

Задача заявляемого изобретения - расширение ассортимента туберкулостатических средств.

Для решения этой задачи авторы предлагают применять 2,4-диоксо-5- фторпиримидин (фторурацил) в качестве туберкулостатического средства. Это стало возможным вследствие выявленных авторами туберкулостатических свойств фторурацила.

Изучение туберкулостатической активности фторурацила проведено в экспериментах "in vitro" на лабораторном штамме микобактерий туберкулеза H₃₇R_v по двум стандартным методикам.

Пример 1. Определение ростовых свойств МБТ под действием фторурацила методом абсолютных концентраций на плотной питательной среде "Новая" (Г.Г. Мордовской, 1972).

Исследуемую культуру МБТ лабораторного штамма H₃₇R_v готовили путем растирания колоний в стерильной ступке, постепенно добавляя стерильный физиологический раствор. Суспензию культуры стандартизировали по бактериальному стандарту мутности, соответствующему 500 млн. микробных тел в 1 мл (5 единиц ГКИ), затем разводили физиологическим раствором в пропорции 1:10.

Разведение фторурацила проводили стерильной дистиллированной водой до заданных концентраций (1250, 600 и 300 мкг/мл).

Питательную среду с различными концентрациями фторурацила разливали в пробирки по 5 мл и свертывали в наклонном положении в течение 20 минут при температуре 850^o С, а затем засевали по 0,2 мл приготовленной взвесью МБТ, закрывали резиновыми пробками и помещали в наклонном положении в термостат при температуре 37^oC. Действие каждой концентрации фторурацила на МБТ изучали на трех параллельных рядах. Регистрацию полученных результатов проводили через 10 дней. Для сравнения в качестве контроля использовали изониазид в концентрациях 1 и 5 мкг/мл. Полученные результаты приведены в таблице 1.

Авторами обнаружено, что при концентрациях фторурацила 600 мкг/мл и выше полностью отсутствовал рост МБТ, при концентрации 300 мкг/мл наблюдали рост единичных колоний МБТ. В пробирках с изониазидом при концентрации 1 мкг/мл и выше рост культуры МБТ отсутствовал.

Пример 2. Изучение туберкулостатической активности фторурацила методом вертикальной диффузии.

Определение диффузионных свойств фторурацила проводили методом вертикальной диффузии, модифицированным Kudon S. с соавторами (1965 г.) на плотной питательной среде "Новая", которую разливали по 5 мл, свертывая таким образом, чтобы 1/2 дна пробирки оставалась свободной. Свернутую среду засевали по 0,1 мл взвеси МБТ, разведенной по стандарту мутности 10 ед. ГКИ, и в наклонном положении помещали в термостат на 24 часа для подращивания. Через сутки пробирки ставили в вертикальное положение и по свободному краю пробирки закапывали по 0,3 мл фторурацила в концентрациях примера 1 и выдерживали в стерильных условиях при температуре 37^oC. Оценку роста МБТ проводили по стандартной методике, где появление зон задержки роста МБТ (более 10 мм) свидетельствует о наличии туберкулостатических свойствах препарата. Величина зоны задержки роста МБТ (в мм) пропорциональна степени туберкулостатической активности препарата. Параллельно проводили опыты с изониазидом.

Результаты приведены в таблице 2. Зоны задержки роста МБТ замечены при концентрации фторурацила 300 мкг/мл и более.

Таким образом, с помощью двух различных серий экспериментов показано, что фторурацил в концентрации 600 мкг/мл и выше обладает выраженными туберкулостатическими свойствами и может расширить ассортимент туберкулостатических средств.

Изобретение относится к медицине, в частности к фтизиатрии, и касается лекарственных препаратов, содержащих органические активные ингредиенты. В качестве туберкулостатического средства предлагается применять 2,4-диоксо-5-фторпиримидин (фторурацил), который относится к антиметаболической группе цитостатических средств. Изобретение позволяет расширить ассортимент туберкулостатических средств. 2 табл.

Применение 2,4-диоксо-5-фторпиримидина (фторурацила) в качестве туберкулостатического средства.