ПРОИЗВОДНЫЕ 3-Н-1,2,3-ТРИАЗОЛО-[4,5-D]ПИРИМИДИНА, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2001 года по МПК C07H19/23 C07D487/04 C07D405/04 A61K31/7064 A61K31/519 A61P7/02 C07M7/00 C07M9/00 

Область изобретения
Изобретение относится к новым соединениям, к способу их получения, их использованию и фармацевтическим композициям, содержащим новые соединения. Новые соединения полезны для терапии, и, в частности, для предотвращения агрегации тромбоцитов.

Предпосылки изобретения и уровень техники
Ряд взаимосвязанных процессов приводит к агрегации тромбоцитов. Каков бы ни был начальный стимул, конечным общим результатом является перекрестное сшивание тромбоцитов связыванием фибриногена со связывающим сайтом мембраны - гликопротеином (11b/111a GP11b/111a). Высокую антитромбоцитную эффективность антител или антагонистов GP11b/111a можно объяснить их влиянием на конечный общий результат. Однако эта эффективность также может объяснить проблемы кровотечения, которые наблюдались при использовании агента этого класса.

Тромбин может производить агрегацию тромбоцитов в значительной степени независимо от других процессов, но существенные количества тромбина вряд ли должны присутствовать без предварительной активации тромбоцитов другими механизмами. Ингибиторы тромбина, такие как гирудин, являются высокоэффективными антитромботическими средствами, но опять же могут приводить к избыточному кровотечению, поскольку они действуют как антитромбоциты, так и как антикоагулянты (Investigators TIMI 9a (1994), Circulation 90, pp. 1624-1630; The Global Use of Strategies to Open Occluded Coronary Arteries (GUSTO) IIa Investigators (GUSTO) Circulation 90, pp. 1631- 1637; Neuhaus, et al. (1994) Circulation 90, pp. 1638-1642).

Аспирин, который, как известно, оказывает благоприятное действие на агрегацию тромбоцитов (смотри, например, Antiplatelet Trialists' Collaboration (1994), Br. Med. J. 308, pp. 81-106; Antiplatelet Trialists' Collaboration (1994), Br. Med. J. 308, pp. 159-168) не влияет на агрегацию, производимую другими источниками АДФ, такими как поврежденные клетки или АДФ, выделяемая в условиях турбулентного потока крови. Кардинальная роль АДФ подтверждается тем фактом, что другие средства, такие как адреналин и 5-гидрокситриптамин (5-НТ, серотонин), производят агрегацию только в присутствии АДФ.

В настоящем изобретении исходили из того, что антагонист действия АДФ на его рецептор мембраны тромбоцита, P_2T-пуриноцептор, будет обеспечивать более эффективное антитромботическое средство, чем аспирин, но при менее сильном действии на кровотечение, чем у антагонистов рецептора фибриногена.

В патенте США 4543255 раскрыты карбоциклические аналоги 2-амино-6-замещенных-пурин-2'- дезоксирибофуранозидов и 2-амино-6-замещенных-8-азапурин-2'- дезоксирибофуранозидов. Соединения, описанные в этом патенте, показаны как имеющие ингибирующее действие против вируса герпеса.

В патенте WO 90/06671 раскрыто использование карбоциклических аналогов различных нуклеозидов для лечения заболеваний, вызванных вирусом Гепатита В.

Задачей, лежащей в основе настоящего изобретения, является нахождение новых соединений, имеющих улучшенную антагонистическую активность в отношении P_2T-рецептора и значительные преимущества по сравнению с известными антитромбоцитными средствами, такими как улучшенная эффективность, уменьшенные побочные эффекты, отсутствие токсичности и лучшая селективность к P_2T-рецептору.

Задача, указанная выше, решена получением новых соединений, которые являются 5,7-дизамещенными 1,2,3-триазоло[4,5-d] -пиримидин-3-ил производными, описанными далее.

Подробное описание изобретения
Новые соединения настоящего изобретения описаны общей формулой (1)
,
в которой В представляет собой О или CH₂;
X представляет NR¹R², SR¹ и С₁-С₇-алкил;
Y представляет SR¹, NR¹R² и C₁-С₇-алкил;
R¹ и R² каждый независимо представляет H или С₁-C₇-алкил, необязательно замещенный на или в алкильной цепи одним или более атомами О, S, N или галогена;
R³ и R⁴ оба представляют H или R³ и R⁴ вместе образуют связь;
А представляет COOH, C(O)NH(CH₂)_pCOOH, С(O)N[(CH₂)_qCOOH]₂, C(O)NHCH(COOH) (CH₂)_rCOOH или 5-тетразолил, где p, q и r каждый независимо равен 1, 2 или 3.

Термин "алкил" включает прямую разветвленную и циклическую алкильные цепи, а также насыщенную и ненасыщенную алкильные цепи.

Заместители O, S и N могут быть заместителями на или в алкильной цепи, что означает С₁-С₇-алкил, в котором один метилен в цепи может быть заменен О, S или NH, и в котором алкильная цепь может быть замещена одной или больше группой ОН, SH, NH₂ или галогеном.

Галоген включает хлор и фтор.

В объем изобретения входят также фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (1), а также пролекарства, такие как эфиры и амиды соединений.

Также в объем изобретения входят соединения формулы (1) в таутомерной, энантиомерной и диастереомерной формах.

Предпочтительными соединениями изобретения являются соединения формулы (1), в которой
X представляет NR¹R²;
Y представляет SR¹;
А представляет C(O)NHCH(COOH)(CH₂)_rCOOH;
и в которой R¹, R² и r определены выше.

Особенно предпочтительными соединениями изобретения являются соединения формулы (1), в которой
X представляет NR¹R², где R¹ представляет водород и R² определен выше;
Y представляет SR¹, где R¹ представляет С₁-С₅-алкил, необязательно замещенный одним или более галогенами; и
А представляет C(O)NHCH(COOH)CH₂COOH.

Наиболее предпочтительными соединениями изобретения являются (Е)-N-[1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] -пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт- 5-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота;
[1R-(1 α ,2 β ,3 β ,4 α )]-N-[3-[4-[7-(Бутиламино) -5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3- дигидроксициклопентил]пропаноил] -L-аспарагиновая кислота;
[1R-(1 α , (Е), 2 β ,3 β ,4 α )]-N-[3-[4-[7-(гексиламино)-5-(пропилтио)-3H- 1,2,3-триазоло[4,5-dпиримидин-3-ил] -2,3- дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L-аспарагиновая кислота; и
[1R-(1 α (E), 2 β ,3 β ,4 α )]-N-[3-[4-[5-[(3,3,3-Трифторпропил)тио]- 7-[2-(метилтио)этиламино] -3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин- 3-ил/-2,3-дигидроксициклопентил/-2-пропаноил/-L-аспарагиновая кислота, моноаммониевая соль.

Новые соединения настоящего изобретения полезны для терапии, в частности для предотвращения агрегации тромбоцитов. Соединения настоящего изобретения, следовательно, полезны в качестве антитромботических средств и, следовательно, полезны для лечения или профилактики неустойчивой стенокардии, пластической операции на коронарных сосудах и инфаркта миокарда.

Соединения настоящего изобретения также полезны для лечения или профилактики первичных артериальных тромботических осложнений атеросклероза, таких как тромботический удар, заболевание периферических сосудов, инфаркт миокарда (то есть, без тромболиза).

Дальнейшими показаниями, когда полезны соединения изобретения, являются лечение или профилактика артериальных тромботических осложнений, обусловленных вмешательством в атеросклеротические заболевания, таким как пластическая операция на сосудах, эндартеректомия, введение стента, хирургия трансплантата коронарных и других сосудов.

Дальнейшими показаниями, когда полезны соединения изобретения, являются лечение или профилактика тромботических осложнений при хирургическом или механическом повреждениях, таких как спасение ткани после травмы вследствие хирургического вмешательства или аварии, пластическая хирургия, включая лоскуты кожи, и "восстановительная" хирургия, такая как восстановление груди.

Соединения изобретения также полезны для предотвращения механически вызванной активации тромбоцитов in vivo, такой как искусственное кровообращение (предотвращение микротромбоэмболии), предотвращение механически вызванной активации тромбоцитов in vitro, такой как использование соединений для консервации продуктов крови, например концентратов тромбоцитов, предотвращение закупорки шунта, такой как гемодиализ и плазмаферез, тромбоз, вторичный относительно повреждения/воспаления сосудов, такой как васкулит, артериит, гломерулонефрит и отторжение органа-трансплантата.

Дальнейшими показаниями для использования соединений изобретения является компонент диффузного тромботического/тромбоцитного расхода, такой как диссеминированная внутрисосудистая коагуляция, тромботическая пурпура, гемолитический уремиический синдром, тромботические осложнения, респираторный дистресс-синдром у взрослых, антифосфолипидный синдром, тромбоцитопения, вызванная гепарином, и преэклампсия/эклампсия.

Дальнейшими показаниями для использования соединения изобретения, являются лечение или профилактика тромбоза вен, такого как тромбопилефлебит, веноокклюзивные заболевания, гематологические состояния, такие как тромбоцитемия и полицитемия и мигрень.

В особенно предпочтительном варианте настоящего изобретения соединения используют для лечения неустойчивой стенокардии, пластической операции на коронарных сосудах и для лечения инфаркта миокарда.

В другом особенно предпочтительном варианте изобретения соединения настоящего изобретения полезны в качестве дополнительной терапии при предотвращении коронарного артериального тромбоза во время лечения неустойчивой стенокардии, при пластической операции на коронарных сосудах и остром инфаркте миокарда, то есть перитромболизе. Можно использовать средства, обычно применяемые как дополнительная терапия при лечении тромботических заболеваний, например гепарин и/или аспирин, причем упомянуты только некоторые.

Способы получения
Соединения настоящего изобретения могут быть получены следующими способами.

А)
(i) Исходный материал, 4,5-диамино-2,6-димеркаптопиримидин, алкилируют с последующим диазотированием с получением соединения формулы (II)
,
в которой R¹ определяют как в формуле (1).

(ii) Продукт формулы (II) стадии (i) реагирует с соединением формулы (III)
,
в которой P₂ представляет защитную группу; и L представляет уходящую группу;
в инертном растворителе и в присутствии основания. Растворители, которые могут быть использованы, включают ДМФ, а основания, которые могут быть использованы, включают амид натрия. Реакцию проводят при температурах от -20 до 50^oC. Предпочтительно реакцию проводят при температуре окружающей среды, растворителем является ацетонитрил и основание представляет собой гидрид натрия. Подходящая защитная группа включает ацильную группу, такую как бензоил, а подходящая уходящая группа включает галоген, такой как бром.

Реагент формулы (III), используемый на этой стадии, получают галогенированием соответственно защищенной рибозы.

Таким образом, группа X = NR¹R², в которой R¹ и R² определены в формуле (1) выше, может быть введена реакцией с соединением формулы HNR¹R², в которой R¹ и R² определены в формуле (1) выше, в инертном растворителе при температуре от 0 до 150^oC. Предпочтительно растворителем является 1,4-диоксан и температура 100^oC.

Защитные группы P₂ могут быть удалены обработкой нуклеофилом, например алкоксидом в спиртовом растворителе, предпочтительно метоксидом натрия в метаноле при 60^oC.

Продукт, полученный на этой стадии, представляет собой соединение формулы (IV)
,
в которой X представляет NR¹R²; Y представляет SR¹; и где R¹ и R² определены в формуле (1) выше.

(iii) Продукт формулы (IV) стадии (ii) реагирует с соответствующим карбонильным соединением или ортоэфиром и инертном растворителе и в присутствии в качестве кислотного катализатора неорганической или органической кислоты при температуре между -15 и 100^oC с получением соединения формулы (V)
,
в которой X представляет NR¹R²; Y представляет SR¹; B представляет O и P₁ представляет защитную группу, предпочтительно P₁/P₁ вместе образуют кольцо.

Предпочтительно P₁/P₁ представляет этоксиметилиден, вводимый с использованием триэтилортоформиата в 1,4- диоксане при 50^oC и в присутствии трихлоруксусной кислоты.

В)
(i) 4,6-дигидрокси-2-меркаптопиримидин алкилируют, затем нитруют, таким образом два спирта превращают в уходящие группы с получением соединения формулы (VI)
,
в которой R¹ определен в формуле (1); и М представляет уходящую группу.

Примерами уходящих групп, которые могут быть использованы, являются галогены.

Соединение формулы (VI) реагирует с соответствующим образом защищенным 5,6-дигидрокси-2-азабицикло[2,2,1] гептан-3-оном, предпочтительно [3aS-(2aα, 4β, 7β, 7α-тетрагидро-2, 2-диметил-4,7-метано-1,3-диоксоло[4,5-с]пиридин-6(3aH)-оном, в присутствии основания, такого как бутиллитий, в инертном растворителе, таком как тетрагидрофуран, при температурах 10-100^oC с получением соединения формулы (VII)
,
в которой Y представляет SR¹; R¹ определен в формуле (1); М представляет уходящую группу; и P₁ представляет защитную группу.

Предпочтительно P₁/P₁ вместе образуют кольцо, такое как изопропилиден, и предпочтительно уходящая группа является хлором.

Предпочтительно, основанием является гидрид натрия, растворителем - ДМФ и реакцию проводят при температуре окружающей среды.

(ii) Нитрогруппу и лактам в продукте формулы (VII) стадии (i) восстанавливают с последующей циклизацией с получением триазола.

Способы восстановления нитрогруппы, которые могут быть упомянуты, включают гидрирование с использованием в качестве катализаторов переходных металлов, таких как палладий-на-угле в атмосфере водорода при давлении 1-5 атм в подходящем растворителе, например этаноле. Предпочтительно используют железо в кислотном растворителе, таком как уксусная кислота, при температурах между 20 и 150^oC, наиболее предпочтительно при температуре 100^oC.

Способы восстановления, которые могут быть упомянуты, включают использование комплексных гидридов металлов, таких как литийалюминийгидрид в инертном растворителе, таком как тетрагидрофуран, при температурах от 0 до 100^oC. Предпочтительно используют натрийборогидрид в метаноле при температуре 0-30^oC.

Диаминоспирт, полученный таким образом, циклизуют реакцией диазотирования, используя нитриты металлов или алкилнитриты в подходящем растворителе, например используют нитрит натрия в разбавленной водной HCl при температуре от -20 до 100^oC. Предпочтительно используют изоамилнитрит в ацетонитриле при 80^oC.

Группу X = NR¹R² вводят реакцией с соединением формулы HNR¹R² в инертном растворителе при температуре от 0 до 150^oC с получением соединения формулы (V), в которой X представляет NR¹R²; Y представляет SR¹; R¹ и R² определены в формуле (1); B представляет CH₂; и P₁ является защитной группой.

Предпочтительно в качестве растворителя используют 1,4-диоксан и реакцию проводят при температуре 100^oC. Предпочтительно P₁/P₂ вместе образуют кольцо, причем наиболее предпочтительно P₁/P₂ представляет изопропилиден.

С)
(i) Продукт стадий А) и В), то есть соединение формулы (V), полученное в стадии А) и В), соответственно окисляют и подвергают реакции олефинирования с получением соединения формулы (VIII)
,
в которой В представляет О или CH₂; X, Y и P₁ определены в формуле (V) на стадиях А) и В) соответственно; А представляет COOR¹¹, в которой R¹¹ представляет низший (ар)алкил; и R³ и R⁴ вместе образуют связь.

Способы окисления, которые могут быть упомянуты, включают реакцию Сверна (Swern) и использование реагента Десс Мартина (Dess Martin) в соответствующих растворителях при температуре между -78 и 120^oC. Предпочтительно используют окисление Пфитцнера - Мофатта (Pfitzner - Mofatt) в ДМСО в качестве растворителя при температуре окружающей среды, а защитные группы P₁/P₁ вместе образуют кольцо, наиболее предпочтителен случай, когда P₁/P₂ представляет изопропилиден. Способы олефинирования, которые могут быть упомянуты, включают реакцию Петерсона (Peterson) и реакцию Хорнера - Эммонса (Horner - Emmons). Предпочтительно используют реакцию Виттига с илидом фосфора, таким как (карбоксиметилен)трифенилфосфоран, особенно предпочтителен (трет-бутоксикарбонилметилен) трифенилфосфоран.

(ii) R¹¹ удаляют деэтерификацией, используя кислотные или щелочные условия гидрогенолиза и, в конце, удаляют защиту с получением соединения формулы (1), в которой X представляет NR¹R²; Y представляет SR¹; B представляет О или CH₂; R¹ и R² определены в формуле (1); R³ и R⁴ вместе образуют связь; и А представляет COOH.

Группы R¹¹, которые могут быть упомянуты, включают метил, этил, изопропил, трет-бутил и бензил. Группы R¹¹ могут быть удалены гидролизом в кислотных или основных условиях. Основный гидролиз может быть проведен с использованием гидроксидов металлов или гидроксидов четвертичного аммония, таких как гидроксид натрия в растворителе, таком как водный этанол, при температуре между 10 и 100^oC. Предпочтительно гидроксид лития в водном тетрагидрофуране при температуре окружающей среды. Кислотный гидролиз может быть проведен с использованием неорганической кислоты, такой как HCl, или сильной органической кислоты, такой как трифторуксусной кислоты в подходящем растворителе, например в водном 1,4-диоксане. Бензильные группы могут быть удалены гидрогенолизом с использованием в качестве катализаторов переходных металлов, например палладия-на-угле, в атмосфере водорода при давлении 1-5 атм в подходящем растворителе, таком как уксусная кислота. Предпочтительно R¹¹ представляет трет-бутил и гидролиз проводят с использованием трифторуксусной кислоты в дихлорметане.

Защитные группы в случае ацила и бензила могут быть удалены как описано для R¹¹ выше, силильные защитные группы могут быть удалены с использованием, например, фторида иона. Низшие алкильные группы могут быть удалены с использованием, например, трибромида бора. Метилиден и этоксиметилиден могут быть удалены с использованием, например, неорганической или органической кислоты. Все эти способы могут быть проведены при температуре между -80 и 150^oC. Предпочтительно R¹¹ представляет трет-бутил и P₁/P₁ представляет изопропилиден, причем обе группы удаляют одновременно, используя трифторуксусную кислоту в дихлорметане при температуре окружающей среды.

D)
Соединение формулы (1), в котором X представляет SR¹, NR¹R² или C₁-С₇-алкил; Y представляет SR¹, NR¹R², С₁-С₇-алкил; R¹ и R² определены в формуле (1); B представляет О или CH₂; R³ и R⁴ представляют водород или вместе образуют связь; и А представляет COOH; вводят в реакцию с соединением структуры NH₂(CH₂)_pCOOR¹¹, NH[(CH₂)_qCOOR¹¹] ₂ или NH₂CH(COOR¹¹)(CH₂)_r COOR¹¹, где p, q и r равны 1, 2 или 3 и R¹¹ представляет низший (ар)алкил;
с использованием методов, применяемых в пептидном синтезе, например, используя агент сочетания. Агенты сочетания, которые могут быть использованы, включают 1,1'- карбонилдиимидазол и N-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолин.

На этой стадии получают соединение формулы (1), в которой X представляет SR¹, NR¹R² или С₁-С₇-алкил; Y представляет SR¹, NR¹R² или C₁-C₇-алкил; B представляет O или CH₂; R³ и R⁴ представляют водород или вместе образуют связь; и А представляет C(O)NH(CH₂)_pCOOR¹¹, C(O)N[(CH₂)_qCOOR¹¹] ₂ или C(O)NHCH(COOR¹¹)(CH₂)_rCOOR¹¹, в которых p, q и r равны 1, 2 или 3 и R¹¹ представляет низший (ар)алкил;
Группы R¹¹, которые могут быть использованы, включают метил, этил, изопропил, трет-бутил и бензил. Реакцию сочетания проводят в подходящем растворителе при температуре между -15 и 120^oC. Предпочтительно используют дициклогексилкарбодиимид или гексафторфосфат бромтриспирролидинофосфония в N, N-диметилформамиде (ДМФ) при температуре между 0^oC и комнатной температурой.

(ii) Продукт формулы (1) стадии (i) деэтерифицируют с получением соединения формулы (1), в которой
B представляет О или CH₂; X представляет NR¹R², SR¹ или С₁-С₇-алкил; Y представляет NR¹R², SR¹ или С₁-С₇-алкил; R¹ и R², каждый независимо представляет H или C₁-C₇-алкил, необязательно замещенный на или в алкильной цепи одним или больше О, S, N или галогеном; R³ и R⁴ оба представляют водород или R³ и R⁴ вместе образуют связь; и А представляет C(O)NH(CH₂)_pCOOH, C(O)N[(CH₂)_qCOOH] ₂ или C(O)NHCH(COOH)(CH₂)_rCOOH, где p, q и r равны 1,2 или 3.

Группы R¹¹, которые могут быть использованы, включают метил, этил, изопропил, трет-бутил и бензил. Группы R¹¹ могут быть удалены гидролизом в кислотных или основных условиях. Основный гидролиз может быть проведен с использованием гидроксидов металлов или гидроксидов четвертичного аммония, таких как гидроксид натрия в растворителе, таком как водный этанол, при температуре между 10 и 100^oC. Предпочтительно гидроксид лития в водном тетрагидрофуране при температуре окружающей среды. Кислотный гидролиз может быть проведен с использованием неорганической кислоты, такой как HCl, или сильной органической кислоты, такой как трифторуксусная кислота, в подходящем растворителе, например, в водном 1,4- диоксане. Бензильные группы могут быть удалены гидрогенолизом с использованием в качестве катализаторов переходных металлов, например, палладия-на-угле, в атмосфере водорода при давлении 1-5 атм в подходящем растворителе, таком как уксусная кислота. Предпочтительно R¹¹ представляет трет-бутил и гидролиз с использованием трифторуксусной кислоты в дихлорметане.

Е)
Продукт, полученный в стадии C(ii) восстанавливают с получением соединения формулы (1), где B,X,Y, R¹ и R² определены на стадии C(ii) выше; А представляет COOH; и R³ и R⁴ оба представляют водород.

Способы восстановления, которые могут быть использованы, включают гидрогенолиз с использованием в качестве катализаторов переходных металлов, например, палладия-на-угле, в атмосфере водорода в подходящем растворителе, таком как уксусная кислота, при давлении 1-5 атм. Предпочтительно используют диимид, полученный из подходящего предшественника, такого как 2,4,6-триизопропилбензолсульфонилгидразид, при температуре между 60 и 100^oC в растворителе тетрагидрофуране (ТГФ).

F)
(i) Соответственно защищенный
5-амино-1-(β-D-рибофуранозил)-1,2,3-триазол-4-карбоксамид, предпочтительно 5-амино-1-[2,3-О-(1-метилэтилиден)-β-D-рибо-фуранозил] -1,2,3-триазол-4-карбоксамид, обрабатывают основанием, с последующей обработкой сложным эфиром формулы R¹COOR⁵, где R¹ определен в формуле (1) и R⁵ - представляет низший алкил. Затем проводят защиту и получают соединение формулы (IX)
,
где Y представляет C₁-С₇-алкил; P₁ представляет защитную группу и предпочтительно P₁/P₁ вместе образуют кольцо; P₂ представляет защитную группу; и М представляет ОН.

Защитные группы P₂, которые могут быть использованы, включают низший алкил или ацил. Предпочтительно P₂ представляет ацетил, который вводят обработкой ацетилхлоридом и триэтиламином в подходящем растворителе, например, дихлорметане, при температуре окружающей среды. Наиболее предпочтительно P₁/P₁ представляет изопропилиден и P₂ представляет ацетил.

(ii) Соединение формулы (IX), где М представляет ОН, галогенируют и вводят группу X = NR¹R², вводят обработкой соединением формулы HNR¹R² в инертном растворителе при температуре от 0 до 150^oC. Затем удаляют защитную группу P₂ и получают соединение формулы Y, в которой X представляет NR¹R²; R¹ и R² определены в формуле (1); Y представляет C₁-С₇-алкил; B представляет О; и P₁ представляет защитную группу и предпочтительно P₁/P₁ вместе образуют кольцо. Наиболее предпочтительно P₁/P₁ представляют изопропилиден.

Галогенирующие реагенты, которые могут быть использованы, включают галогениды P(III), или P(V), или S(II), или S(IV), такие как трихлорид фосфора, при температуре от 0 до 150^oC. Реакцию можно проводить в галогенирующем реагенте, используемом в качестве растворителя или в инертном растворителе, таком как метиленхлорид. Предпочтительно тионилхлорид в ДМФ/хлороформе при кипячении с обратным холодильником.

Предпочтительным растворителем, используемым для введения группы X = NR¹R² является 1,4-диоксан при температуре 100^oC. Защитная группа P₂ может быть удалена в тех же условиях. Альтернативно она может быть удалена с использованием кислотного или основного гидролиза.

Предпочтительно применяют аммиак в метаноле при температуре окружающей среды.

(iii) Продукт формулы (V) стадии (ii) вводят в те же реакции, которые описаны в стадии C(i) и (ii), с получением соединения формулы (1), в которой X представляет NR¹R²; R¹ и R² определены в формуле (1); B представляет O; Y представляет C₁-C₇-алкил; А представляет COOH; и R³ и R⁴ вместе образуют связь.

G)
(i) Подходящую защитную группу P₃ вводят в защищенный 5-амино-1-(β-D-рибофуранозил)-1,2,3-триазол-4-карбоксамид, предпочтительно 5-амино-1-[2,3-О-(1-метилэтилиден)-β-D-рибофуранозил] -1,2,3-триазол-4-карбоксамид. Полученный полупродукт обрабатывают основанием, предпочтительно гидридом натрия, с последующей обработкой реагентом формулы
,
где L представляет уходящую группу, предпочтительно имидазолил, с получением соединения формулы (X)
,
в которой P₁ представляет защитную группу, предпочтительно когда P₁/P₁ вместе образуют кольцо; и P₃ представляет защитную группу, предпочтительно силильную группу. Наиболее предпочтителен случай, когда P₁/P₁ представляет изопропилиден и P₃ представляет трет-бутилдиметилсилил.

(ii) Продукт формулы (X) стадии (i) обрабатывали основанием, таким как бутиллитий, в инертном растворителе, таком как ТГФ, при температуре между -20 и 50^oC, с последующей обработкой алкилирующим реагентом R¹G, где G представляет уходящую группу, такую как галоген, и где R¹ определен в формуле (1).

Предпочтительно в качестве основания используют гидрид натрия в ДМФ при температуре окружающей среды, и G представляет йод.

Затем P₃ удаляют из соединения, приведенного выше, и замещают на новую защитную группу P₂. Предпочтительно P₂ представляет ацил.

Предпочтительно P₃ представляет силильную группу, удаляемую обработкой фторидионом и замещаемую на ацил. Наиболее предпочтительно P₃ представляет трет-бутилдиметилсилил, который удаляют реакцией с фторидом тетра-н-бутиламмония в ТГФ, с последующим введением защитной группы P₂ реакцией с ацетилхлоридом в дихлорметане при температуре окружающей среды.

В конце проводят галогенирование и получают соединение формулы (IX), в которой М представляет уходящую группу, например, галоген и предпочтительно, хлор; P₁ представляет защитную группу, предпочтительно P₁/P₁ вместе образуют кольцо; и P₂ представляет защитную группу, предпочтительно ацетил; и Y представляет SR¹.

Галогенирующие реагенты, которые могут быть использованы, включают галогениды P(III), или P(II), или S(II), или S(IV), такие как трихлорид фосфора, при температурах от 0 до 150^oC. Реакцию можно проводить в галогенирующем реагенте, используемом в качестве растворителя, или в инертном растворителе, таком как метиленхлорид. Предпочтительно используют тионилхлорид в ДМФ/хлороформе при кипячении с обратным холодильником.

(iii) Продукт стадии (ii) вводили в реакцию с нуклеофильным алкилом, например, реагентом Гриньяра, в инертном растворителе, таком как ТГФ, при температуре между -20 и 150^oC. Предпочтительно нуклеофильным алкилом является соединение алкилолова, используемое в присутствии Pd(II) катализатора. Затем защитную группу P₂ удаляли и получали соединение формулы (V), в которой X представляет C₁-С₇-алкил; Y представляет SR¹; R¹ определен в формуле (1); В представляет О; и P₁ представляет защитную группу, предпочтительно P₁/P₁ вместе образуют кольцо, которое наиболее предпочтительно является изопропилиденом.

Защитная группа P₂ может быть удалена кислотным или основным гидролизом. Предпочтительно P₂ представляет ацетил, который удаляют реакцией с аммиаком в метаноле при температуре окружающей среды.

Н)
(i) Соединение формулы (1), в которой
X представляет NR¹R²; Y представляет SR¹; R¹ и R² определены в формуле (1); B представляет О; R³ и R⁴ оба представляют водород; и A представляет C(O)NHCH(COOR¹¹)(CH₂)_rCOOR¹¹, в котором r равно 1, 2 или 3 и R¹¹ определен выше;
обрабатывали окислителем, таким как монопероксифталат магния, в инертном растворителе, таком как ТГФ, при температуре между -20 и 100^oC, с последующей обработкой соединением формулы HNR¹R² в инертном растворителе при температуре от 0 до 150^oC с получением соединения формулы (1), в которой
X представляет NR¹R²; Y представляет NR¹R²; B представляет О;
R³ и R⁴ оба представляют водород; и А представляет C(O)NHCH (COOR¹¹) (CH₂)_rCOOR¹¹, в котором r равно 1, 2 или 3 и R¹¹ определен на стадии D) выше.

Предпочтительно в качестве окислителя используют м-хлорпероксибензойную кислоту в растворителе этаноле при температуре окружающей среды, и замещение проводят в 1,4-диоксане при 100^oC.

I)
Соединение формулы (1), в которой X представляет SR¹; Y представляет SR¹; B представляет О; R³ и R⁴ оба представляют водород; А представляет COOH;
может быть получено реакцией соединения формулы (II), в которой R¹ определен в формуле (1), с соединением формулы (XI)
,
в которой R¹² представляет низший (ар)алкил и P₄ представляет защитную группу, такую как ацетил.

Реакция может быть проведена нагреванием соединений вместе в присутствии кислоты, такой как трихлоруксусная кислота, при пониженном давлении и температуре между 50 и 175^oC. Предпочтительно R¹² представляет этил, P₄ представляет ацетил и реакцию проводят при 140^oC в присутствии п-толуолсульфокислоты в вакууме водоструйного насоса.

Защитные группы и группа R¹² затем могут быть удалены гидролизом в кислотных или основных условиях с получением соединения формулы (1), в которой X представляет SR¹; Y представляет SR¹; R¹ определен в формуле (1); B представляет О; R³ и R⁴ оба представляют водород; А представляет COOH;
Примерами реагентов и условий, которые могут быть использованы для гидролиза являются алкоксиды металлов в спирте при температуре между 0 и 100^oC, или, альтернативно, может быть использована трифторуксусная кислота в дихлорметане. Предпочтительно используют R¹² - этил и P₄ - ацетил и гидроксид лития в водном тетрагидрофуране при температуре окружающей среды.

Соединение формулы (XI), которое является одним из исходных материалов в этой реакционной стадии, вначале получают из этилового эфира (Е)-метил-5,6-дидезокси-2,3-О-(1-метилэтилиден)-β-D-рибогепт-5-енофуранозидуроновой кислоты гидролизом водной кислотой, например водной уксусной кислотой, и реакцией с ацилирующим реагентом, таким как ацетилхлорид, в присутствии основания, например, пиридина, и подходящего растворителя, например, метиленхлорида, с последующим восстановлением, например, гидрированием с использованием в качестве катализаторов переходных металлов, таких как палладий-на-угле, в атмосфере водорода в подходящем растворителе, например, этаноле при давлении между 1 и 3 атм.

J)
Соединение формулы (1), в которой
X представляет NR¹R²; Y представляет SR¹; R¹ и R² определены в формуле (1); B представляет O или CH₂; R³ и R⁴ оба представляют водород; и А представляет 5-тетразолил;
получали следующим образом.

Продукт стадии A(iii) или продукт стадии B(ii), например соединение формулы (V), в которой В представляет О или CH₂ и X и Y определены в формуле (Y) выше и P₁ представляет защитную группу, предпочтительно P₁/P₁ вместе образуют кольцо, окисляли, с последующей реакцией олефинирования и с последующим восстановлением.

Способы окисления, которые могут быть использованы, включают реакцию Сверна (Swern) и использование реагента Десс Мартина (Dess Martin) в соответствующих растворителях при температурах между -78 и 120^oC. Предпочтительно используют окисление Пфитцнера - Мофатта (Pfitzner - Mofatt) в ДМСО в качестве растворителя при температуре окружающей среды, используя соединение формулы (Y), в котором P₁/P₂ представляет изопропилиден. Способы олефинирования, которые могут быть использованы, включают реакцию Петерсона (Peterson) и реакцию Хорнера - Эммонса (Horner - Emmons). Предпочтительно реакция Виттига с илидом фосфора-(трифенилфосфоранилиден)ацетонитрилом. Способы восстановления, которые могут быть использованы, включают гидрирование с использованием в качестве катализаторов переходных металлов, таких как платина, в атмосфере водорода, в подходящем растворителе, например, уксусной кислоте, при температурах между 0 и 100^oC. Предпочтительно использовать палладий-на-угле при давлении 4 атм в этаноле при температуре окружающей среды.

Продукт, полученный таким способом, представляет соединение формулы (XII)
,
в которой B представляет О или CH₂; P₁ представляет защитную группу, предпочтительно P₁/P₁ вместе образуют кольцо и наиболее предпочтительно P₁/P₁ представляет изопропилиден; и R¹ и R² определены в формуле (1).

Это соединение формулы (XII) реагирует с азидом, таким как азид натрия, в инертном растворителе, например, ДМФ, при температуре между 0 и 175^oC. Изопропилиден является предпочтительной защитной группой. Предпочтительно используют трибутилоловоазид в толуоле при температуре 110^oC.

Защитные группы затем удаляют обработкой неорганической или органической кислотой в инертном растворителе при температуре между 0 и 100^oC. Предпочтительно используют трифторуксусную кислоту в дихлорметане при температуре окружающей среды.

Таким образом получают продукт формулы (1), в которой X представляет NR¹R²; Y представляет SR¹; R¹ и R² определены в формуле (1), B представляет О или CH₂; R³ и R⁴ представляют оба водород; и А представляет 5-тетразолил.

К)
Соединение формулы (1), в которой
X представляет SR¹, NR¹R² или С₁-С₇-алкил; Y представляет SR¹, NR¹R² или С₁-С₇-алкил; R¹ и R² определены в формуле (1); В представляет CH₂ или О; R³ и R⁴ вместе образуют связь; и А представляет COOR¹¹, в которой R¹¹ определен в формуле (1) выше;
восстанавливают с получением соединения формулы (VIII), в которой R³ и R⁴ представляют водород; X, Y, B, A, R¹¹ и P₁ определен выше.

Способы восстановления, которые могут быть использованы, включают гидрирование с использованием в качестве катализаторов переходных металлов, например, палладия-на-угле, в атмосфере водорода в подходящем растворителе, таком как уксусная кислота, при давлении 1-5 атм. Предпочтительно используют диимид, полученный из подходящего предшественника, такого как 2,4,6-триизопропилбензолсульфонилгидразид, при температуре между 60 и 100^oC в растворителе тетрагидрофуране.

(ii) Продукт стадии (i) вводят в ту же реакцию, которая описана для стадии D(ii), с получением соединения формулы (1), в которой
X представляет SR¹, NR¹R² или С₁-С₇-алкил; Y представляет SR¹, NR¹R² или C₁-С₇-алкил; R¹ и R² определены в формуле (1), B представляет CH₂ или О; и А представляет COOH.

Соединения формулы (1), а также их соли и пролекарства, такие как эфиры или амиды, могут быть выделены из реакционных смесей обычными методами.

Соли соединения формулы (1) могут быть получены реакцией свободной кислоты или ее соли, или свободного основания или его соли, или производного с одним или более эквивалентами соответствующего основания или кислоты. Реакция может быть проведена в растворителе или среде, в которой соль нерастворима, или в растворителе, в котором соль растворима, например воде, этаноле, тетрагидрофуране или диэтиловом эфире, которые можно удалить в вакууме или сушкой вымораживанием. Реакция также может быть обменным процессом или может быть проведена на ионообменной смоле. Предпочтительны нетоксичные физиологически приемлемые соли, хотя могут быть полезны и другие соли, например, для выделения или очистки продукта.

Фармацевтически приемлемые эфиры соединений формулы 1 могут быть получены обычными методами, например, этерификацией и переэтерификацией.

Фармацевтически приемлемые эфиры соединений формулы 1 могут быть получены обычными методами, например, реакцией эфира соответствующей кислоты с аммиаком или соответствующим амином.

Подробное описание изобретения
Изобретение далее описано более подробно с помощью примеров, которые не должны быть истолкованы как ограничивающие объем изобретения. Температура дана в Примерах в градусах Цельсия, если специально не указано. Сокращения: МС - масс-спектрометрия, E1 - ЭУ (электронный удар), APCI - ФИ (фотоионизация), ESI - ПИ (поверхностная ионизация), FAB - ББА (бомбардировка быстрыми атомами).

ПРИМЕРЫ
Пример
Натриевая соль [1R-(1α (E), 2 β, 3β, 4α)]-3-[4- [7-(бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеновой кислоты
а) 2-(Пропилтио)-4,6(1H,5H)-пиримидиндион
Пропилйодид (136 мл) добавляли к суспензии 4,6-дигидрокси-2- меркаптопиримидина (200 г) в воде (800 мл), содержащей гидроксид натрия (55,6 г). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 недель, затем концентрировали до половины объема, добавляли 2 N хлористо-водородную кислоту и продукт выделяли фильтрованием (167 г).

МС (ЭУ): 186 (М⁺, 100%).

b) 6-Гидрокси-5-нитро-2-(пропилтио)-4(1H)-пиримидинон
Продукт стадии а) (70 г) медленно добавляли к охлажденной льдом дымящей азотной кислоте (323 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа, затем выливали на лед и продукт выделяли фильтрованием (65 г).

МС (ЭУ): 231 (М⁺), 41 (100%).

с) 4,6-Дихлор-5-нитро-2-(пропилтио)пиримидин
N,N-Диэтиланилин (150 мл) добавляли по каплям к перемешиваемой суспензии продукта стадии b) (134 г) в фосфорилхлориде (500 мл) и полученный раствор нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 часа. Охлажденную реакционную смесь выливали на лед, затем экстрагировали диэтиловым эфиром (3 х 500 мл). Объединенные экстракты сушили и концентрировали. Хроматография (SiO₂, изогексан: диэтиловый эфир 19:1 в качестве элюента) давала целевое соединение, указанное в заголовке (128 г).

МС (ЭУ): 271, 269, 267 (М⁺), 41 (100%).

d) [3aS- (3aα,4β,7β,7aα) ]-5-[6-Хлор-5-нитро-2- (пропилтио)пиримидин-4-ил]тетрагидро-2,2-диметил-4,7-метано-1, 3-диоксоло[4,5-c]пиридин-6(3aH)-он
Гидрид натрия (60%, 4,00 г) добавляли порциями к [3aS- (3aα,4β,7β,7aα)] тетрагидро-2, 2-диметил-4,7-метано-1,3-диоксоло[4,5-с] пиридин-6(3aH)-ону (18,3 г) в ТГФ (500 мл). При перемешивании в течение 1 часа раствор добавляли по каплям к продукту стадии с) (54,0 г) в ТГФ (500 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 минут, затем концентрировали и очищали хроматографией (SiO₂, дихлорметан:изогексан 3:2 в качестве элюента) с получением соединения, указанного в заголовке (79,2 г).

МС (ФИ): 417, 415 (М+H⁺), 415 (100%).

e) [3aS- (3aα,4β,7β,7aα) ]-5-[5-Амино-6-хлор-2-(пропилтио) пиримидин-4-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4,7-метано-1, 3-диоксоло-[4,5-c] пиридин-6(3aH)-он
Восстановленный порошок железа (50 г) добавляли к раствору продукта стадии d) (50,0 г) в ледяной уксусной кислоте (1,8 л) и реакционную смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 15 минут. Охлажденную реакционную смесь концентрировали и остаток экстрагировали эфиром (2 л), затем промывали раствором бикарбоната натрия (2 х 1 л). Органическую фазу сушили и концентрировали с получением соединения, указанного в заголовке (42,6 г).

МС (ФИ): 387, 385 (М+H⁺), 385 (100%).

f) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ]-6-[5-Амино-6-хлор-2-(пропилтио)пиримидин-4-иламино] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-метанол.

Боргидрид натрия (8,37 г) добавляли к охлажденному льдом раствору продукта стадии е) (42,6 г) в метаноле (1,3 л). После перемешивания в течение 1 часа раствор выливали в воду (2 л) и экстрагировали диэтиловым эфиром (2 х 1 л). Объединенные экстракты сушили и концентрировали. Очистка (SiO₂ дихлорметан : этилацетат 1:1 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (36,1 г).

МС (ФИ): 419, 417 (М+H⁺), 417 (100%).

g) [3aR-(3aα,4α,6α,6aα)] -6-[7-Хлор-2-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента- 1,3-диоксол-4-метанол
Изоамилнитрит (24,9 мл) добавляли к раствору продукта стадии f) (36,0 г) в ацетонитриле (80 мл) и раствор нагревали в течение 1 часа при 70^oC. Охлажденную реакционную смесь концентрировали и очищали (SiO₂, дихлорметан:этилацетат 4:1 в качестве элюента) с получением соединения, указанного в заголовке (33,6 г).

МС (ЭУ): 401, 399 (М+H⁺), 43 (100%).

h) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ]-6-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4- метанол
Продукт стадии g) (16,75 г) и бутиламин (30 мл) в 1,4-диоксане (500 мл) нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали (SiO₂, дихлорметан:этилацетат 4: 1 в качестве элюента) с получением соединения, указанного в заголовке (17,8 г).

МС (ФИ): 437 (М+H⁺, 100%).

f) [3aR- (3aα,4α(E),6α,6aα) ]-3-[6-[7-(Бутиламино)- 5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-ил]-2- пропеновая кислота, 1,1-диметилэтиловый эфир
Перемешиваемый раствор продукта стадии h) (0,5 г), пиридина (0,093 мл) и трифторуксусной кислоты (0,048 мл) в ДМСО (25 мл) обрабатывали 1,3-дициклогексилкарбодиимидом (0,72 г) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Добавляли трет-бутоксикарбонилметилентрифенилфосфоран (0,69 г) и реакцию перемешивали еще в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до 0^oC, разбавляли этилацетатом (100 мл) и добавляли щавелевую кислоту (0,51 г). Через 30 мин смесь фильтровали и фильтрат промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (100 мл), сушили и концентрировали. Хроматография (SiO₂, гексан:этилацетат 5:1 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (0,55 г).

МС (ББА): 533 (M+H⁺, 100%).

j) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ] -3-[4-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеновая кислота, натриевая соль
Раствор продукта стадии i) (0,8 г) в 50% водной трифторуксусной кислоте (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Реакционную смесь концентрировали и продукт перекристаллизовывали из этилацетата (30 мл). Свободную кислоту растворяли в смеси метанол : вода (2:3, 30 мл) и пропускали через ионообменную смолу Dowex 50 х 100 (натриевая форма), элюируя водой. Лиофилизация дает соль целевого соединения в виде бесцветного твердого вещества (0,43 г).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 6,59 (1H, дд), 5,89 (1H, д), 4,94 (1H, м), 4,45 (1H, т), 4,12 (1H, т), 3,45 (2H, м), 2,83 (3H, м), 2,47 (1H, м), 2,00 (1H, м), 1,5 (4H, м), 1,20 (2H, м), 0,82 (3H, т), 0,71 (3H, т).

Пример 2
[lR- (1α(E),2β,3β,4α) ] -N-[3-[4-[7-(Бутиламино) - 5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3- дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L-аспарагиновая кислота, бис(1;1-диметилэтиловый)эфир
a) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ] -3-[4-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-]пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопeнтил]-2-пpoпeнoил] -L- acпapaгинoвaя кислота, бис(1,1-диметилэтиловый)эфир
Гидрохлорид ди-трет-бутилового эфира L-аспарагиновой кислоты (0,46 г) и триэтиламин (0,23 мл) добавляли к раствору соединения Примера 1 (0,6 г) в ДМФ (25 мл). Добавляли 1-гидроксибензотриазол (0,22 г) и раствор охлаждали на ледяной бане перед добавлением 1,3- дициклогексилкарбодиимида (0,34 г). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при 0^oC, затем при комнатной температуре в течение 3 дней. После удаления растворителя хроматография (SiO₂, хлороформ: метанол 40:1 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (0,63 г).

МС (ББА): 664 (М+H⁺), 57 (100%).

b) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ]-3-[4-[7-(Бутилaминo)-5-(пpoпилтиo)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3,3-дигидроксициклопентил] -2-пропеноил]- L-аспарагиновая кислота, динатриевая соль
Раствор продукта стадии а) (0,60 г) в дихлорметане (30 мл), содержащий трифторуксусную кислоту (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Раствор концентрировали и остаток очищали (ВЭЖХ, колонка Nova-Pak^RC18, 0,1% водный ацетат аммония:метанол от 50:50 до 0:100 за 15 мин в качестве элюента) давал соль, указанную в заголовке, в качестве бесцветного твердого вещества (0,19 г).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 6,74 (1H, дд), 6,12 (1H, д), 5,07 (1H, м), 4,38 (1H, м), 4,05 (1H, т), 3,95 (2H, м), 3,12 (2H, т), 2,85 (1H, м), 2,49 (1H, м), 2,30-2,45 (2H, м), 2,0 (1H, м), 1,75 (2H, м), 1,52 (2H, м), 1,47 (2H, м), 1,0 (3H, т), 0,98 (3H, т).

Пример 3
[1S- (1α,2β,3β,4α) ]-4-[7-(Бутиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-2,3- дигидроксициклопентанпропановая кислота, натриевая соль
a) [1S- (1α,2β,3β,4α) ] -3-[4-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопен-тил] -2- пропеновая кислота, этиловый эфир
Перемешиваемый раствор продукта Примера 1 h) (0,6 г), пиридина (0,112 мл) и трифторуксусной кислоты (0,058 мл) в ДМСО (25 мл) обрабатывали 1,3- дициклогексилкарбодиимидом (0,87 г) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Добавляли карбоэтоксиметилентрифенилфосфоран (0,90 г) и реакцию перемешивали еще в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до 0^oC, разбавляли этилацетатом (100 мл) и добавляли щавелевую кислоту (0,51 г). Через 30 мин смесь фильтровали и фильтрат промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (100 мл), сушили и концентрировали. Остаток растворяли в дихлорметане (50 мл)/трифторуксусной кислоте (50 мл) и перемешивали в течение ночи. Растворитель удаляли и остаток очищали хроматографией (SiO₂, дихлорметан:этилацетат 1:1 в качестве элюента) с получением соединения, указанного в заголовке (0,36 г).

МС (ББА): 465 (М+H⁺, 100%).

b) [1S- (1α,2β,3β,4α) ]-4-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентанпропановая кислота, этиловый эфир
2,4,6-Триизопропилбензолсульфоногидразид (0,50 г) добавляли к раствору продукта стадии а) (0,35 г) в сухом ТГФ (175 мл) и полученный раствор нагревали в течение 3 часов при 70 С. Охлажденную реакционную смесь очищали хроматографией (SiO₂, дихлорметан : этилацетат 1:1 в качестве элюента) с получением соединения, указанного в заголовке (0,16 г).

МС (ЭУ): 466 (М⁺), 43 (100%).

с) [1S- (1α,2β,3β,4α) ]-4-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентанпропановая кислота, натриевая соль
Моногидрат гидроксида лития (14 мг) добавляли к раствору продукта стадии b) (0,16 г) в ТГФ (10 мл)/вода (10 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов, затем растворитель удаляли в вакууме. Очистка (ВЭЖХ, колонка Nova-Pak^R C18, 0,1% водный ацетат аммония : метанол от 50: 50 до 0: 100 за 15 мин в качестве элюента) давала кислоту, которую растворяли в метаноле (2 мл) и добавляли 1 N раствор гидроксида натрия (0,28 мл). Раствор концентрировали и получали соль, указанную в заголовке (0,13 г).

МС (ПИ): 439 (M-Na+H⁺, 100%).

ЯМР δ H (D₂O): 5,07 (1H, м), 4,65 (1H, т), 4,08 (1H, т), 3,49 (2H, т), 3,05 (2H, м), 2,62 (1H, м), 2,36 (2H, м), 2,17 (1H, м), 2,00 (1H, м), 1,70 (2H, м), 1,65 (2H, м), 1,61 (2H, м), 1,40 (2H, м), 1,00 (3H, т), 0,97 (3H, т).

Пример 4
[1R- (1α(E),2β,3β,4α)] -3-[4-[7-(Бутиламино)-5- (пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил] -2,3- дигидроксициклопентил]-2-пропеновая кислота, натриевая соль
а) 2-(пентилтио)-4,6(1H,5H)-пиримидиндион
К раствору 4,6-дигидрокси- 2-меркаптопиримидина (14,4 г) в 2H растворе гидроксида натрия (100 мл) добавляли пентилиодид (15,6 мл) в этаноле (25 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней. Этанол удаляли при пониженном давлении, добавляли N,N-диметилформамид (80 мл) и пентилйодид (1,56 мл) и реакционную смесь перемешивали еще в течение 16 часов. Раствор подкисляли добавлением 2 N раствора, HCl и водный слой декантировали. Оставшуюся смолу растворяли в метаноле и упаривали досуха, затем проводили азеотропную перегонку с толуолом (х 2). Твердое вещество растирали с эфиром, фильтровали, сушили и получали соединение, указанное в заголовке в виде белого твердого вещества (11,9 г).

МС (ЭУ): 214 (М⁺), 144 (100%).

b) 6-Гидрокси-5-нитро-2-(пентилтио)-4(1H)-пиримидинон
Получен по методике Примера 1 b) с использованием продукта стадии а).

МС (ЭУ): 259 (М⁺), 43 (100%).

с) 4,6-Дихлор-5-нитро-2-пентилтио)пиримидин
Получен по методике Примера 1 с) с использованием продукта стадии b).

МС (ББА): 295, 297, 299 (М+H⁺): 41 (100%).

d) [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)-5-[6-Хлор-5-нитро-2- (пентилтио)пиримидин-4-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4,7-метано-1, 3-диоксоло-[4,5-с]пиридин-6(3aH)-он
Получен по методике Примера 1 d) с использованием продукта стадии с).

МС (ББА): 445, 443 (М+H⁺), 443 (100%).

e) [3aS- (3aα,4β,7β,7aα)]-5-[5-Амино-6- Хлор-2-(пентилтио)пиримидин-4-ил]тетрагидро-2,2-диметил-4,7- метано-1,3-диоксоло-[4,5-с]пиридин-6(3aH)-он
Получен по методике Примера 1 c) с использованием продукта стадии d).

МС (ЭУ): 414, 412 (М⁺), 412 (100%).

f) [3aR- (3aα,4β,6β,6aα)]-6-[5-Амино-6-хлор-2-(пентилтио)пиримидин-4-иламино] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-метанол.

Получен по методике Примера 1 f) с использованием продукта стадии e).

МС (ЭИ): 418, 416 (М⁺), 327 (100%).

q) [3aR- (3aα,4β,6β,6aα)] -6-[7-Хлор-5-(пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-метанол
Получен по методике Примера 1 д) с использованием продукта стадии f).

МС (ФИ): 430, 428 (М+H⁺), 338 (100%).

h) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ]-6-[7-(Бутиламино)-5-(пентилтио)-3H- 1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро-2,2- диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-метанол
Получен по методике Примера 1 h) с использованием продукта стадии g).

МС (ББА): 465 (М+H⁺, 100%).

i) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ] -3-[6-[7-(Бутиламино)-5- (пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-ил]-2- пропеновая кислота, 1,1-диметилэтиловый эфир
Получен по методике Примера 1 i) с использованием продукта стадии h).

МС (ББА): 561 (М+H⁺), 505 (100%).

j) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ]-3-[4-[7-(Бутиламино)-5-(пентилтио)-3H-1,2, 3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил] -2-пропеновая кислота, натриевая соль
Получена по методике Примера 1 j) с использованием продукта стадии i).

МС (ББА): 487 (M+Na+H⁺), 465 (100%).

ЯМР δ H (d₆-ДMCO): 9,00 (1H, т), 6,43 (1H, дд), 5,70 (1H, д), 4,97 (1H, кв), 4,32 (1H, т), 3,87 (1H, т), 3,50-3,47 (2H, м), 3,12-3,04 (2H, м), 2,68 (1H, м), 2,38-2,34 (1H, м), 1,93-1,89 (1H, м), 1,64 (2H, м), 1,62 (2H, м), 1,37-1,30 (6H, м), 0,91 (3H, т), 0,87 (3H, т).

Пример 5
Следующее соединение получали по методике Примера 4: [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ] -3-[4-[7-(Этиламино)-5- (пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3- дигидроксициклопентил] -2-пропеновая кислота, натриевая соль
a) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ]-6-[7-(Этиламино) -5-(пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-метанол
МС (ББА): 437 (М+H⁺, 100%).

b) [3aR- (3aα,4α(E):6α,6aα) ]-3-[6[-7-(Этиламино)-5- (пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-ил]-2- пропеновая кислота, 1,1-диметилэтиловый эфир
МС (ББА): 533 (М+H⁺), 477 (100%).

с) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ] -3-[4-[7-(Этиламино)-5- (пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3- дигидроксициклопентил]-2-пропеновая кислота, натриевая соль
МС (ББА): 459 (M+Na+H⁺), 437 (100%).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 8,99 (1H, т), 6,55 (1H, дд), 5,76 (1H, д), 4,98 (1H, KB), 4,32 (1H, т), 3,90 (1H, т), 3,81-3,50 (2H, м), 3,16-3,08 (2H, м), 2,74-2,70 (1H, м), 2,46-2,37 (1H, м), 1,98 -1,89 (1H, м), 1,71-1,67 (2H, м), 1,62 (2H, м), 1,37-1,24 (4H, м), 1,19 (3H, т), 0,86 (3H, т).

Пример 6
[1S- (1α,2β,3β,4α) ]-4-[7-(Бутиламино)-5-(пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентапропановая кислота, натриевая соль
Получена по методике Примера 3 b) с использованием продукта Примера 4.

МС (ФИ): 467 (М+H⁺), 295 (100%).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 8,95 (1H, т), 4,93-4,86 (1H, м), 4,32 (1H, т), 3,88 (1H, т), 3,49-3,45 (2H, м), 3,07-3,05 (2H, м), 2,74-2,70 (1H, м), 2,28-2,08 (1H, м), 2,01-1,92 (3H, м), 1,74-1,55 (7H, м), 1,37-1,33 (6H, м), 0,90 (3H, т), 0,86 (3H, т).

Пример 7
[1S- (1α,2β,3β,4α) ] -4-[7-(Этиламино)-5- (пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-2,3- дигидроксициклопентанпропановая кислота, натриевая соль
Получена по методике Примера 3 b) с использованием продукта Примера 5.

МС (ББА): 461 (M+Na+H⁺), 154 (100%).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 8,96 (1H, т), 4,91 (1H, KB), 4,33 (1H, т), 3,75 (1H, т), 3,51 (2H, м), 3,08-3,06 (2H,м), 2,30-2,24 (1H, м), 2,06-1,93 (3H, м), 1,75-1,55 (5H, м), 1,37-1,09 (4H, м), 1,15 (3H, т), 0,87 (3H, т).

Пример 8
[1S- (1α,2α,3β,5β) ]-3-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил]-5-[2-(1Н-тетразол-5-ил) этил]-1,2-циклопентандиол
a) [3aR- (3aα,4α(E),6α,6aα) ]-3-[6-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,2-диметил-тетрагидро-4Н-циклопента-1,3- диоксол-4-ил]-2-пропенонитрил
Получен по методике Примера 1 i) с использованием продукта Примера 1 h) и (трифенилфосфоранилилен)ацетонитрила.

МС (ЭУ):457 (М⁺), 414 (100%).

b) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα)] -3-[6- [7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил]-2,2-диметил-тетрагидро-4Н-циклопента-1,3- диоксол-4-ил]-2-пропанонитрил
Продукт стадии а) (0,75 г) в этаноле (300 мл), содержащем 10% палладий-на-угле (0,37 г), перемешивали 48 часов при 4 атм водорода. Катализатор удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали с получением соединения, указанного в заголовке (0,34 г).

МС (ББА): 460 (М+H⁺, 100%).

с) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ] -N-Бутил-5-(пропилтио)-3-[6- [2-(1H-тетразол-5-ил)-этил] тетрагидро-2, 2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-ил]-3H-1,2,3-триазоло [4, 5-d]пиримидин-7-амин
Продукт стадии b) (0,40 г) и трибутилоловоазид (0,70 г) в толуоле нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 48 часов, затем концентрировали. Очистка хроматографией (SiO₂, дихлорметан:метанол 95:5 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (0,19 г).

МС (ББА): 503 (М+H⁺, 100%).

d) [1R- (1α,2α,3β,5β) ]-3-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил] -5-[2-(1Н-тетразол-5-ил)этил] -1,2-циклопентандиол
Получен по методике Примера 1 j) с использованием продукта стадии с).

МС (ББА): 463 (М+H⁺, 100%).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 8,64 (1H, т), 5,11 (1H, м), 4,96 (1H, м), 4,85 (1H, м), 4,38 (IH, м), 3,38 (1H, м), 3,50 (2H, м), 3,07 (2H, м), 2,97 (2H, м), 2,41 (1H, м), 2,00 (2H, м), 1,80 (2H, м), 1,69 (2H, м), 1,61 (2H, м), 1,35 (2H, м), 0,97 (3H, м), 0,91 (3H, т).

Пример 9
[lR- (1α,2β,3β,4α) ]-N-[3-[4-[7-(Бутиламино)- 5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-2, 3-дигидроксициклопентил]-2-пропаноил]-L-аспарагиновая кислота
a) [1R- (1α,2β,3β,4α) ]-3-[4-[7-(Бутиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-2,3- дигидроксициклопентил]-2-пропаноил]-L-аспарагиновая кислота, бис(1,1-диметилэтиловый)эфир
N, N-Диизопропилэтиламин (0,35 мл) добавляли к раствору гидрохлорида ди-трет-бутилового эфира L- аспарагиновой кислоты (0,28 г), гексафторфосфат бромтрис(пирролидино)фосфония (0,44 г) и продукту Примера 3 (0,44 г) в ДМФ (20 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре, затем концентрировали. Хроматография (SiO₂, этилацетат в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (0,49 г).

МС (ФИ): 666 (М+H⁺, 100%).

b) [1R- (1α,2β,3β,4α) ]-3-[4-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5]пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]- -2-пропаноил]-L-аспарагиновая кислота
Получена по методике примера 2 b) с использованием продукта стадии а).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 9,03 (1H, шс), 7,79 (1H, д), 4,92 (1H, м), 4,35 (1H, м), 4,19 (1H, т), 3,75 (2H, м), 3,49 (2H, т), 3,08 (2H, м), 2,43 (1H, м), 2,32 (1H, м), 2,18 (3H, м), 1,91 (IH, м), 1,73 (3H, м), 1,58 (2H, м), 1,34 (2H, м), 1,0 (3H, т), 0,98 (3H, т).

Пример 10
[1R- (1α(E),2β,3β,4α) ] -N-[3-[4[-7-(Гексиламино)- 5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-(1] пиримидин-3-ил] 2,3- дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L-аспарагиновая кислота
a) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ]-6-[7-(Гексиламино) -5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-метанол
Боргидрид натрия (1,16 г) добавляли к охлажденному льдом раствору продукта стадии 1 е) (5,90 г) в метаноле (200 мл). После перемешивания в течение 1 часа раствор концентрировали и остаток очищали хроматографией (SiO₂, диэтиловый эфир в качестве элюента). Полученный полупродукт растворяли в ацетонитриле (300 мл) и добавляли изоамилнитрит (2,8 мл). Реакционную смесь перемешивали 30 минут при 60^oC, концентрировали и остаток растворяли в 1,4-диоксане (300 мл). Добавляли гексиламин (20 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали, остаток очищали (SiO₂, диэтиловый эфир в качестве элюента) и получали соединение, указанное в заголовке (4,69 г).

МС (ФИ): 465 (М+H⁺, 100%).

b) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ] -3-[4-[7-(Гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил]-2,3-дигидрокси-циклопентил]-2-пропеновая кислота
Получена по методике примера 1 i) и последующей методике 1 j) с применением продукта стадии а).

ЯМР δ H (D₂O): 9,03 (1H, т), 6,96 (1H, дд), 5,89 (1H, д), 5,31 (1H, с), 5,10 (1H, с), 5,00 (1H, м), 4,29 (1H, т), 4,02 (1H, т), 3,49 (2H, м), 3,01 (2H, м), 2,83 (2H, м), 2,49 (1H, м), 2,01 (1H, м), 1,72 (2H, м), 1,65 (2H, м), 1,29 (6H, м), 0,98 (3H, т), 0,86 (3H, т).

с) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ]-N-[3-[4-[7-(Гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил] 2-пропеноил]-L-аспарагиновая кислота, бис(1,1- диметилэтиловый) эфир
Получен по методике примера 2 b) с использованием продукта стадии b).

МС (ФИ): 692 (М+H⁺, 100%).

d) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ]-N-[3-[4-[7-(Гексиламино)-5-(пропилтио) -3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил] -2-пропеноил]-L-аспарагиновая кислота
Получена по методике примера 2 b) с использованием продукта стадии с).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 7,94 (1H, д), 7,23-7,11 (1H, с), 6,75 (1H, дд), 6,17 (1H, д), 5,19 (1H, с), 5,08 (1H, с), 5,00 (1H, м), 4,31 (2H, м), 3,96 (1H, м), 3,62 (2H, м), 3,07 (2H, м), 2,81 (1H, м), 2,49-2,31 (3H, м), 2,01 (1H, м), 1,67 (2H, м), 1,61 (2H, м), 1,31 (6H, м), 0,96 (3H, т), 0,85 (3H, т).

Пример 11
Следующие соединения получали по методике примера 1.

a) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ]-3-[4-[7-(3,3-Диметилбутиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3- дигидроксициклопентил]-2-пропеновая кислота
i) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ]-6-[7-(3,3- Диметилбутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3- диоксол-4-метанол
МС (ФИ): 465 (М+H⁺, 100%).

ii) [3aR- (3aα,4α(H),6α,6aα) ] -3-[6-[7-(3,3-Диметилбутиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро- 2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-ил] -2-пропеновая кислота, 1,1-диметилэтиловый эфир
МС (ФИ): 561 (М+H⁺, 100%).

iii) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ] -3-[4-[7-(3,3- Диметилбутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеновая кислота
ЯМР δ (d₆-ДМСО): 8,59 (1H, т), 6,84 (1H, дд), 5,84 (1H, д), 5,03-4,96 (1H, м), 3,98 (1H, м), 3,52 (2H, м), 3,07 (2H, м), 2,81 (1H, м), 2,43 (IH, м), 1,97 (1H, м), 1,75 (2H, м), 1,55 (2H, м), 0,99 (3H, т), 0,95 (9H, с).

b) [1R- (1α(E),2β,3β,4α)] -3-[4-[7-(2-Метоксиэтиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеновая кислота
i) [3aR-(3aα,4α,6α,6aα)] -6-[7-(2-Метоксиэтиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-метанол
МС (ББА): 439 (М+H⁺, 100%).

ii) [3aR- (3aα,4α(E),6α,6aα)]-3-[6-[7-(2-Метоксиэтиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил]тетрагидро-2,2- диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-ил] -2-пропеновая кислота, 1,1-диметилэтиловый эфир
МС (ББА): 535 (М+H⁺, 100%).

iii) [1R- (1α(E),2β,3β,4α)] -3-[4-[7-(3,3-Диметилбутиламино)-5-(пропилтио) -3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]-2, 3-дигидроксициклопентил]-2-пропеновая кислота
МС (ББА): 439 (М+H⁺, 100%).

Пример 12
[1R- (1α,2β,3β,4α)] -N-[3-[4-[7-(Гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил] -пропаноил]-L- аспарагиновая кислота
a) [1R- (1α,2β,3β,4α) ]-4-[7-(Гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентанпропановая кислота
Получена по методике примера 3 b) с использованием продукта стадии 10 b).

МС (ФИ): 467 (М+H⁺, 100%).

b) [1R- (1α,2β,3β,4α) ]-N-[3-[4-[7-(Гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил]-пропаноил]- L-аспарагиновая кислота, бис(1,1-диметилэтиловый)эфир
Получена по методике примера 9 а) с использованием продукта стадии а).

МС (ФИ): 694 (М+H⁺, 100%).

с) [1R- (1α,2β,3β,4α) ] -N-[3-[4-[7-(Гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]-пропаноил] -L- аспарагиновая кислота
Получена по методике примера 2 b) с использованием продукта стадии b).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 8,90 (1H, шс), 7,61 (1H, д), 4,97 (1H, м), 4,36 (1H, т), 4,21 (1H, м), 3,77 (1H, м), 3,47 (2H, м), 3,07 (2H, т), 2,51 (2H, м), 2,28 (1H, м), 2,20 (2H, м), 1,93 (1H, м), 1,77 (1H, м), 1,62 (3H, м), 1,59 (3H, м), 1,33 (6H, м), 1,00 (3H, т), 0,88 (3H, т).

Пример 13
[1R- (1α(E),2β,3β,4α) ] -N-[3-[4-[5-[(3,3,3-Трифторпропилтио)-7-[2-(метилтио) этиламино] -3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L- аспарагиновая кислота, моноаммониевая соль
а) 2-[(3,3,3-Трифторпропил)тио]-4,6(1H,5H)-пиримидиндион
Получен по методике примера 1 a).

МС (ФИ, отрицательная ионизация): 239 (М-H⁺), 143 (100%).

b) 2-[(3,3,3-Трифторпропил)тио]-6-гидрокси- 5-нитро-4 (1H)-пиримидинон.

Получен по методике примера 1 b) с использованием продукта стадии а).

МС (ФИ, отрицательная ионизация): 284 (М-H⁺, 100%).

с) 4,6-Дихлор-2-[(3,3,3-Трифторпропил)тио]-5- нитропиримидин
Получен по методике примера 1 с) с использованием продукта стадии b).

ЯМР δ H (CDCl₃): 3,30 (2H, м), 2,60 (2H, м).

d) [3aS- (3aα,4β,7β,7aα) ]-5-[6-Хлор-5-нитро-2-(3,3,3-Трифторпропил)тио] - пиримидин-4-ил тетрагидро-2,2-диметил-4,7-метано-1,3-диоксоло [4, 5-е] пиримидин-6(3aH)-он
Получен по методике примера 1 с) с использованием продукта стадии b).

ЯМР δ H (CDCl₃): 4,77 (1H, с), 4,73 (1H, д), 4,56 (1H, д), 3,33 (2H, м), 3,05 (1H, с), 2,58 (2H, м), 2,33 (1H, д), 2,20 (1H, т), 1,53 (3H, с), 1,36 (3H, с).

е) [3aS (3aα,4α,7α,7aα) ]-5-[5-Амино-6-хлор-2-(3,3,3- трифторпропил)тио] -пиримидин-4-ил] тетрагидро-2,2-диметил-4, 7-метано-1,3-диоксоло [4,5-е] пиримидин-6(3aH)-он
Получен по методике примера 1 е) с использованием продукта стадии d).

МС (ФИ): 439 (М+H⁺, 100%).

f) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ] -6-[[5-Амино-6-хлор-2-[(3,3,3- трифторпропил)-тио] -4-пиримидинил] амино] тетрагидро-2,2- диметил-4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-метанол
Получен по методике примера 1 f) с использованием продукта стадии е).

МС (ФИ): 443 (М+H⁺, 100%).

g) [3aR- (3aα,4α,6α,6aα) ] -6-[5-[(3,3,3-трифторпропил) тио]-7-[(2-(метилтио)этиламино] -3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]-тетрагидро-2,2-диметил-4Н-циклопента-1,3- диоксол-4-метанол
Получен по методике примера 1 g) с использованием продукта стадии f).

МС (ФИ): 509 (М+H⁺, 100%).

h) [3aR- (3aα,4α(E),6α,6aα) ] -3-[6-[5-[(3,3,3-Трифторпропил)тио]-7-[(2-(метилтио) этиламино]-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-тетрагидро-2,2-диметил- 4Н-циклопента-1,3-диоксол-4-ил] -2-пропеновая кислота, 1,1- диметилэтиловый эфир
Получен по методике примера 1 i) с использованием продукта стадии g).

МС (ФИ): 605 (М+H⁺), 549 (100%).

h) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ]-3-[4-[5-[(3,3,3- Трифторпропил)тио]-7-[(2-метилтио)этиламино] -3H-1,2,3- триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]-2- пропеновая кислота
Получена по методике примера 1 j) с использованием продукта стадии h).

МС (ФИ): 509 (М+H⁺, 100%).

j) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ]-N-[3-[4-[5-[(3,3,3-Трифторпропил) тио]-7-[(2-(метилтио)этиламино]-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]2,3-дигидроксициклопентил] -2-пропеноил] -L- аспарагиновая кислота, бис(1,1-диметилэтиловый)эфир
Получен по методике примера 9 а) с использованием продукта стадии i).

МС (ФИ): 736 (М+H⁺), 624 (100%).

к) [1R- (1α(E),2β,3β,4α) ]-N-[3-[4-[5-[(3,3,3-Трифторпропил)- тио]-7-[(2-метилтио)этиламино]-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L- аспарагиновая кислота, моноаммониевая соль
Получена по методике примера 2 b) с использованием продукта стадии j).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 7,90 (1H, д), 6,76-6,68 (1H, дд), 6,15 (1H, д), 4,99 (1H, м), 4,30 (2H, м), 3,71 (2H, т), 3,30 (2H, м), 2,74 (5H, м), 2,50 (1H, м), 2,42 (2H, м), 2,11 (3H, с), 1,98 (1H, м).

Пример 14
(Е)-1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H- 1,2,3-триазоло[4,5-d] -пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси- β-D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота
а) 2,6-Бис(пропилтио)-4,5-пиримидиндиамин
Пропилйодид (2,52 мл) добавляли к перемешиваемому раствору 4,5-диамино-2,6-димеркаптопиримидина (2,0 г) в 1 N растворе гидроксида калия (26,4 мл). После перемешивания в течение 24 часов твердое вещество собирали фильтрованием и получали соединение, указанное в заголовке, в виде розового твердого вещества (2,2 г).

МС (ЭУ): 258 (М⁺, 100%).

b) 5,7-Бис(пропилтио)-1H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин
Раствор нитрита натрия (0,6 г) в воде (7 мл) добавляли к перемешиваемой суспензии продукта стадии а) (2,0 г) в смеси уксусная кислота:вода (1:1, 90 мл) при 50^oC. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при 50^oC, твердое вещество собирали фильтрованием и получали соединение, указанное в заголовке.

МС (ЭУ): 269 (М⁺), 43 (100%).

с) 5,7-Бис(пропилтио)-3-(2,3,5-три-O-бензоил- β -D- рибофуранозил)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин
Газообразный бромид водорода барботировали в охлажденный льдом раствор 1-O-ацетил-2,3,5-три-O-бензоил- β-D-рибофуранозы (2,02 г) в дихлорметане (15 мл) в течение 15 мин. Реакцию перемешивали в течение 1 часа при 0^oC, затем в течение 15 мин при комнатной температуре. Раствор концентрировали, а остаток подвергали азеотропной отгонке с дихлорметаном (3 х 50 мл). Гидрид натрия (60%, 0,19 г) добавляли к перемешиваемой суспензии продукта стадии b) (1,08 г) в ацетонитриле (29 мл). После перемешивания в течение 15 мин при комнатной температуре добавляли бромсахар, описанный выше, в ацетонитриле (10 мл) и перемешивание продолжали в течение 24 часов. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, органический слой сушили и концентрировали. Хроматография (SiO₂ дихлорметан: диэтиловый эфир 39:1 в качестве элюента) давала смесь 5,7-бис(пропилтио)-3-(2,3,5-три-O-бензоил- β -D- рибофуранозил)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидина [МС (ББА): 714 (М+H⁺), 105 (100%)] и 5,7-бис(пропилтио)-2-(2,3,5-три-O-бензоил- β -D-рибофуранозил) -3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидина [МС (ББА): 714 (М+H⁺), 105 (100%)] (1,9 г). Дальнейшее элюирование давало 5,7-бис(пропилтио) -1-(2,3,5-три-O-бензоил- β -D- рибофуранозил)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин в виде бесцветной пены (0,46 г). [МС (ББА): 714 (М+H⁺), 105 (100%)].

d) N-Бутил-5-(пропилтио)-3-( β -D-рибофуранозил)-3H-1,2, 3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-амин
н-Бутиламин (7,37 г) добавляли к раствору смеси изомеров из стадии с) (9,0 г) в 1,4-диоксане (100 мл) и воде (30 мл). Раствор нагревали в течение 40 часов при 100^oC, затем концентрировали. Остаток растворяли в 0,1 М растворе метоксида натрия в метаноле (250 мл) и реакционную смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры добавляли уксусную кислоту до pH 7 и раствор концентрировали. Хроматография (SiO₂, хлороформ : изопропиловый спирт 85:15 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке, в виде бесцветного стеклоподобного вещества (2,0 г).

МС (Электрораспыление): 399 (М+H⁺, 100%).

е) N-Бутил-5-(пропилтио)-3-(2,3-этоксиметилен- β -D- рибофуранозил)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]пиримидин-7-амин
Раствор продукта стадии d) (0,40 г) в 1,4-диоксане (5 мл) обрабатывали трихлоруксусной кислотой (0,44 г) и триэтилортоформиатом (0,44 г). Полученный раствор нагревали в течение 90 мин при 50^oC. Охлажденный раствор разбавляли дихлорметаном (100 мл), промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и водой (50 мл), затем сушили и концентрировали. Хроматография (SiO₂, гексан: этилацетат 2:1 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке, в виде бесцветного твердого вещества (0,32 г).

МС (ББА): 455 (М+H⁺), 267 (100%).

f) (E)-1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофуранороновая кислота, этиловый эфир
Перемешиваемый раствор продукта стадии е) (3,25 г), пиридина (0,57 г) и трифторуксусной кислоты (0,41 г) в ДМСО (30 мл) обрабатывали 1,3-дициклогексилкарбодиимидом (4,42 г) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Добавляли карбоэтоксиметилентрифенилфосфоран (3,98 г) и реакцию перемешивали еще в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до 0^oC, разбавляли этилацетатом (400 мл) и добавляли щавелевую кислоту (3,51 г). Через 30 мин смесь фильтровали и фильтрат промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (200 мл), сушили и концентрировали. Хроматография (SiO₂, гексан: этилацетат 5:1 в качестве элюента) давала полупродукт, который растворяли в 80% уксусной кислоте (водная) (25 мл) и нагревали в течение 2 дней при 36^oC. Раствор концентрировали и остаток очищали хроматографией (SiO₂, гексан: этилацетат 2:1 в качестве элюента) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного твердого вещества (1,84 г).

МС (ББА): 467 (М+H⁺), 267 (100%).

g) (E)-1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроновая кислота
Получена по методике Примера 3 c) с использованием продукта стадии f).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 9,10 (1H, т), 6,82 (1H, дд), 6,15 (1H, д), 5,89 (IH, д), 4,76 (1H, т), 4,60 (1H, т), 4,39 (1H, т), 3,50 (2H, м), 3,08 (2H, м), 1,69 (2H, м), 1,61 (2H, м), 1,34 (2H, м), 0,98 (3H, т), 0,91 (3H, т).

МС (ББА): 439 (М+H⁺), 267 (100%).

Пример 15
(E)-N-[1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1, 2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D- рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота
а) (E)-N-[1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло-[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт- 5-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, бис(1,1-диметилэтиловый) эфир
Получен по методике Примера 2 a) с использованием продукта Примера 14.

МС (Электрораспыление): 666 (М+H⁺, 100%).

b) (Е)-N-[1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло-[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5-енофурануроноил] -L-аспарагиновая кислота
Получена по методике Примера 2 b) с использованием продукта стадии а).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 12,57 (2H, шс), 9,09 (1H, т), 8,42 (1H, д), 6,70 (1H, дд), 6,13 (2H, м), 5,78 (1H, д), 5,60 (1H, д), 4,71 (1H, м), 4,56 (2H, м), 4,40 (1H, кв), 3,07 (2H, м), 2,63 (2H, м), 1,68 (2H, м), 1,60 (2H, м), 1,35 (2H, м), 0,98 (3H, т), 0,91 (3H, т).

Пример 16
Следующее соединение получали по методике Примеров 14 и 15:
(Е)-N-[1-[7-Амино-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, моноаммониевая соль
а) 5-(Пропилтио)-3-(β -D-рибофуранозил)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d]пиримидин-7-амин
Раствор смеси изомеров из Примера 14 с) (12,0 г) в метаноле (1 л) охлаждали до 0^oC и насыщали газообразным аммиаком. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 72 часов, затем концентрировали. Хроматография (SiO₂, дихлорметан: метанол 14: 1 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке в виде бесцветного твердого вещества (4,94 г).

МС (Электрораспыление): 343 (М+H⁺, 100%).

b) 5-(Пропилтио)-3-[2,3-О-(этоксиметилен)- β-D-рибофуранозил] -3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-амин
МС (Электрораспыление): 399 (М+H⁺, 100%).

с) (Е)-1-[7-Амино-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроновая кислота, этиловый эфир
МС (Электрораспыление): 411 (М+H⁺, 100%).

d) (E)-1-[7-Амино-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5- d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроновая кислота, этиловый эфир
МС (Электрораспыление): 383 (М+H⁺, 100%).

е) (E)-N-[1-[7-Амино-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] - пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, бис(1,1-диметилэтиловый) эфир
МС (Электрораспыление): 610 (М+H⁺, 100%).

f) (E)-N-[1-[7-Амино-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] -пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси- β-D-рибогепт-5- енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, моноаммониевая соль
ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 8,53 (1H, шс), 8,18 (1H, шс), 6,66 (1H, дд), 6,62 (1H, д), 6,15 (1H, д), 5,78 (1H, т), 4,54 (1H, т), 4,39 (1H, т), 4,25 (1H, м), 3,05 (2H, м), 2,53-2,25 (2H, м), 1,68 (2H, м), 0,97 (3H, т).

Пример 17
(E)-N-[1-[7-(Бутиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6- тридезокси- β -D-рибогепт-5-енофурануpoнoил]-L-acпapaгинoвaя кислота, моноаммониевая соль
а) (Е)-1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-1,5,6-тpидeзoкcи- β -D- pибoгeпт-5-eнoфуpaнуpoновая кислота, этиловый эфир
Получен по методике Примера 3 b) с использованием продукта стадии 14 f).

МС (Электрораспыление): 469 (М+H⁺, 100%).

b) (Е)-1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси-β -D- рибогепт-5-енофурануроновая кислота
Получена по методике Примера 3 c) с использованием продукта стадии а).

МС (Электрораспыление, отрицательная ионизация): 439 (M-H⁺, 100%).

с) (Е)-N-[1-[7-(Бутиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5, 6-тридезокси- β -D-рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, бис(1,1-диметилэтиловый) эфир
Получен по методике Примера 2 a) с использованием продукта стадии b).

МС (Электрораспыление): 668 (М+H⁺, 100%).

d) (Е)-N-[1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло-[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт- 3-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, моноаммониевая соль
Получен по методике Примера 2 a) с использованием продукта стадии с).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 9,07 (1H, т), 7,69 (1H, д), 6,04 (1H, д), 5,50 (2H, ш с), 4,76 (1H, т), 4,18 (2H, м), 3,91 (1H, м), 3,49 (2H, кв), 3,08 (2H, т), 2,46-2,23 (2H, м), 2,18 (2H, т), 1,93 (1H, м), 1,70 (3H, м), 1,60 (2H, м), 1,34 (2H, м), 0,99 (3H, т), 0,91 (3H, т).

Пример 18
(Е)-N-[1,5,6-Тридезокси-1-[7-(гексиламино) - 5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]- β - D-рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, моноаммониевая соль
а) 3-(5-O-Бензоил- β -D-рибофуранозил)-и-гексил-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-амин
Получен по методике Примера 14 d) с использованием н-гексиламина.

МС (ББА): 531 (М+H⁺), 295 (100%).

b) 3-[5-О-Бензоил-2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D- рибофуранозил]-N-гексил-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4, 5-d]пиримидин-7-амин
Продукт стадии а) (4,93 г) в ацетоне (120 мл), содержащем 2,2-диметоксипропан (11,4 мл), обрабатывали п-толуолсульфокислотой (4,4 г). Полученный раствор перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре, подщелачивали триэтиламином (3,25 мл) и концентрировали. Хроматография (SiO₂, циклогексан:этанол 95:5 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (5,03 г).

МС (Электрораспыление): 571 (М+H⁺, 100%).

с) N-Гексил-3-[2,3-О-(1-метилэтилиден)- β -D- рибофуранозил] -5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-7-амин
Раствор продукта стадии b) (5,02 г) в 0,1 М растворе метоксида натрия в метаноле (88 мл) нагревали при кипячении с обратным холодильником 30 мин. Добавляли уксусную кислоту (1 мл) и реакцию концентрировали. Хроматография (SiO₂, дихлорметан: ацетонитрил 95:5 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (3,63 г).

МС (Электрораспыление): 467 (М+H⁺, 100%).

d) (Е)-1,5,6-Тридезокси-1-[7-(гексиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]-пиримидин-3-ил]-2,3-O- (1-метилэтилиден) β -D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота, 1,1- диметилэтиловый эфир
Получен по методике Примера 1 i) с использованием продукта стадии с).

МС (ББА): 563 (М+H⁺, 100%).

е) (Е)-1,5,6-Тридезокси-1-[7-(гексиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]- β -D- рибогепт-5-енофурануроновая кислота
Получена по методике Примера 1 j) с использованием продукта стадии d).

МС (ББА): 467 (М+H⁺), 295 (100%).

f) (Е)-N-[1,5,6-Тридезокси-1-[7-(гексиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]-пиримидин-3-ил]- β - D-рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, бис(1,1- диметилэтиловый) эфир
Получен по методике Примера 9a) с использованием продукта стадии е).

МС (ББА): 694 (М+H⁺), 295 (100%).

g) (E)-N-[1,5,6-Тридезокси-1-[7-(гексиламино)-5- (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] - β -D- рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, моноаммониевая соль
Получена по методике Примера 2 b) с использованием продукта стадии f).

МС (ББА): 582 (М+H⁺), 295 (100%).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 8,74 (1H, т), 8,00 (1H, м), 6,66 (1H, дд), 6 6,23 (1H, д), 6,15 (1H, м), 4,76 (1H, м), 4,55 (1H, т), 4,40 (1H, т), 4,27 (1H, т), 3,50 (2H, м), 3,07 (2H, м), 2,51 (2H, м), 1,68 (4H, м), 1,30 (6H, м), 0,98 (3H, м), 0,87 (3H, м).

Пример 19
(Е)-1-[7-(N-Бутил-N-метиламино)-5-(пропилтио) -3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота
а) N-Бутил-N-метил-5-(пропилтио)-3-(β-D-рибофуранозил)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-амин
Получен по методике Примера 14 d) с использованием N-метил-N-бутиламина.

МС (ББА): 413 (М+H⁺), 281 (100%).

b) N-Бутил-N-метил-5-(пропилтио)-3-[2,3, O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибофуранозил]-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин- 7-амин
Получен по методике Примера 18 b) с использованием продукта стадии а).

МС (ББА): 453 (М+Н⁺), 281 (100%).

с) (E)-1-[7-(N-Бутил-N-метиламино)-5-(пропилтио)-3H- 1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-2,3- O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота, 1,1- диметилэтиловый эфир
Получен по методике Примера 1i) с использованием продукта стадии b).

МС (ББА): 549 (М+H⁺, 100%).

d) (Е)-1-[7-(N-Бутил-N-метиламино)-5-(пропилтио)-3H-1, 2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота
Получена по методике Примера 1j) с использованием продукта стадии с).

МС (ББА): 453 (М+H⁺, 100%).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 6,51 (1H, дд), 6,12 (1H, д), 5,83 (1H, д), 4,71 (1H, т), 4,51 (1H, т), 4,31 (1H, м), 3,76 (2H, м), 3,71 (3H, с), 3,08 (2H, м), 1,69 (4H, м), 1,61 (2H, м), 1,34 (2H, м), 0,94 (6H, м).

Пример 20
(Е)-N-[1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1, 2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D- рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота
а) 3-(2,3,5-Три-O-бензоил- β -D-рибофуранозил)-5,7- бис(метилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин и
2-(2,3,5-Три-O-бензоил- β -D-рибофуранозил)-5,7-бис (метилтио)-3H-1,2,3-триазол[4,5-d]пиримидин
Получены по методике Примера 14c) с использованием 5,7-бис(метилтио)-1H-триазоло[4,5-d]-пиримидин (получен по методике, описанной J.A.Montgomery, A.T.Shortancy, G.Arnett, W.H.Shannon, J.Med.Chem., 1977, 20, 401). Хроматография (SiO₂, дихлорметан:этилацетат 99:1 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (13,3 г).

МС (Электрораспыление): 467 (М+H⁺, 100%).

b) N-Бутил-3-[2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибофуранозил]-5- (метилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-амин
н-Бутиламин (13,5 мл) добавляли к раствору смеси изомеров со стадии а) (22,5 г) в смеси диоксан (175 мл)/вода (25 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов, затем концентрировали. Остаток растворяли в 0,1 М растворе метоксида натрия в метаноле (500 мл) и нагревали при кипячении с обратным холодильником 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры раствор концентрировали и остаток растворяли в ДМФ (80 мл). Добавляли п-толуолсульфокислоту (5,91 г) и 2,2-диметоксипропан (50 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Раствор концентрировали и остаток распределяли между этилацетатом (500 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (500 мл), органическую фазу сушили и концентрировали. Хроматография (SiO₂, гексан:этилацетат 7:3 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке, в виде бесцветного твердого вещества (3,67 г).

МС (Электрораспыление): 411 (М+H⁺, 100%).

с) (Е)-1-[7-(Бутиламино)-5-(метилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-2,3-O-(1- метилэтилиден)- β D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота, этиловый эфир
Получен по методике Примера 1 i) с использованием продукта стадии b) и карбэтоксиметилентрифенилфосфорана.

МС (ББА): 479 (М+H⁺, 100%).

d) (Е)-1-[7-(Бутиламино)-5-(метилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроновая кислота, этиловый эфир
Продукт стадии с) (1,4 г) растворяли в 2 М раствора HCl в метаноле (75 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре, затем концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате (300 мл), промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (3 х 100 мл), сушили и концентрировали. Хроматография (SiO₂, дихлорметан:метанол 97:3 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке, в виде бесцветного твердого вещества (1,10 г).

МС (ББА): 439 (М+H⁺), 239 (100%).

e) (E)-1-[7-(Бутиламино)-5-(метилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4, 5-d]пиpимидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроновая кислота
Получена по методике Примера 3c) с использованием продукта стадии d).

МС (ББА): 411 (М+H⁺), 154 (100%).

f) (E)-N-[4-[7-(Бутиламино)-5-(метилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5- енофурануроноил] -L-аспарагиновая кислота, бис(1,1-диметилэтиловый) эфир
Получен по методике Примера 2 a) с использованием продукта стадии е).

МС (ББА): 638 (М+H⁺), 239 (100%).

g) (Е)-N-[1-[7-(Бутиламино)-5-(метилтио)-3H-1,2,3- триазоло-[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт- 3-енофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота
Получена по методике Примера 2 b) с использованием продукта стадии f).

МС (ББА): 526 (М+H⁺), 239 (100%).

Пример 21
(E)-1-[5-Бутил-7-(бутиламино)-3H-1,2,3-триазоло[1,5-d] пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт- 5-енофурануровая кислота.

а) 5-Бутил-3,4-дигидро-3-[2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибофуранозил] -7H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-он
Натрий (4,6 г) растворяли в этаноле (200 мл), затем добавляли 5- амино-1-[2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибофуранозил] -1H- 1,2,3-триазол-4-карбоксамид (получен как описано G.Biagi et al., Farmaco, 1992, 47, 525) (6,0 г) и смесь нагревали с обратным холодильником. Добавляли метилвалерат (10,5 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 17 часов. Смесь нейтрализовали, используя Dowex 50х8-200 (Н⁺-форма), фильтровали, фильтрат концентрировали. Остаток растворяли в этаноле, добавляли уксусную кислоту и раствор концентрировали. Хроматография (SiO₂, гексан:этилацетат 7:3 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке, в виде бесцветного масла (3,08 г).

МС (ББА): 366 (М+H⁺).

b) 5-Бутил-3,4-дигидро-3-[5-О-ацетил-2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибофуранозил]-7H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-он
Триэтиламин (0,42 г) и ацетилхлорид (0,3 г) добавляли последовательно к охлажденному льдом раствору продукта со стадии а) (1,41 г) в дихлорметане (50 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин при 5^oC, затем промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили и концентрировали. Хроматография (SiO₂, дихлорметан : метанол 95:5 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (1,2 г).

МС (ЭУ): 408 (М+H⁺).

с) 5-Бутил-7-хлор-3-[5-O-ацетил-2,3-О-(1-метилэтилиден)- β -D-рибофуранозил]-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин
Продукт стадии b) (1,19 г) и ДМФ (299 мг) в хлороформе нагревали с обратным холодильником, добавляли тионилхлорид (3,47 г) и кипятили с обратным холодильником в течение 45 мин. После охлаждения на ледяной бане смесь медленно добавляли к перемешиваемому насыщенному раствору бикарбоната натрия. Смесь экстрагировали дихлорметаном (3 х 200 мл), объединенные экстракты сушили, фильтровали и концентрировали. Хроматография (SiO₂, гексан:этилацетат 5:1 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (1,14 г).

МС (ЭУ): 427, 425 (М+H⁺).

d) N, 5-Дибутил-3-[2,3-O-(1-метилэтилиден)- β-D-рибофуранозил] -3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-амин
Получен по методике Примера 1h) с использованием продукта стадии с).

МС (ЭУ): 420 (М⁺).

е) (Е)-1-[5-Бутил-7-(бутиламино)-3H-1,2,3-триазоло[4, 5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-2,3-O-(1- метилэтилиден) -β-D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота, 1,1-диметилэтиловый эфир
Получен по методике Примера 1 i) с использованием продукта стадии d).

МС (ББА): 517 (М+H⁺, 100%).

f) (E)-1-[5-Бутил-7-(бутиламино)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -O-рибогепт-5-енофурануроновая кислота
Получена по методике Примера 1 j) с использованием продукта стадии е).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 8,87 (1H, т), 6,71 (1H, дд), 6,20 (1H, м), 5,89 (1H, д), 4,75 (1H, м), 4,56 (IH, т), 4,37 (1H, т), 3,54 (2H, кв), 2,73 (2H, т), 1,74 (2H, м), 1,62 (2H, м), 1,35 (4H, м), 0,91 (6H, т).

Пример 22
(Е)-1-[7-Бутил-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота
а) 5-Амино-1-[5-О-[(1,1-диметилэтил)диметилсилил] -2,3-O-(1-метилэтилиден) - β -D-рибофуранозил]-1H-1,2,3-триазол-4-карбоксамид
Раствор 5-амино-1-[2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибофуранозил]- 1H-1,2,3-триазол-4-карбоксамида (получен как описано G.Biagi et al, Farmaco, 1992, 47, 525) (10,0 г), имидазола (2,20 г) и трет-бутилдиметилсилилхлорида (4,98 г) в ДМФ (200 мл) перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Раствор концентрировали и остаток очищали (SiO₂, дихлорметан : этилацетат 1: 1 в качестве элюента) с получением соединения, указанного в заголовке.

МС (ЭУ): 398 (M-CH₃ ⁺), 73 (100%).

b) 3,6-Дигидро-3-[5-O-[(1,1-диметилэтил)диметилсилил]- 2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибофуранозил]-5-меркапто-7Н-1,2, 3-триазол[4,5-d]пиримидин-7-он
Продукт стадии а) (26,0 г) в ДМФ (100 мл) добавляли за 1 час к перемешиваемой суспензии гидрида натрия (60%, 2,52 г) в ДМФ (200 мл). Добавляли 1,1-тиокарбонилдиимидазол (11,2 г) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 часа, затем концентрировали. Остаток растворяли в воде (1 л), подкисляли ледяной уксусной кислотой и соединение, указанное в заголовке, выделяли фильтрованием (14,1 г).

МС (ББА): 456 (М+H⁺), 69 (100%).

с) 3-[5-O-[(1,1-Диметилэтил)диметилсилил]-2,3-O-(1- метилэтилиден) β -D-рибофуранозил]-3,4-дигидро-5-(пропилтио) -7H-1,2,3-)триазоло[4,5-d]пиримидин-7-он
Продукт стадии b) (19,3 г) добавляли к перемешиваемой суспензии гидрида натрия (60%, 1,41 г) в ДМФ (200 мл). Через 15 мин добавляли иодпропан (3,55 г), смесь перемешивали в течение 1 часа, затем концентрировали. Остаток распределяли между водой (1 л) и дихлорметаном (1 л). Органический слой сушили, концентрировали и получали соединение, указанное в заголовке (18 г).

МС (ББА): 498 (М+H⁺), 73 (100%).

d) 3-[2,3-O-(1-Метилэтилиден)- β -D-рибофуранозил] -3,4- дигидро-5-(пропилтио)-7H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-7-он
Фторид трибутиламмония (1 М в ТГГФ, 40,6 мл) добавляли к перемешиваемому раствору продукта стадии с) (20,2 г) в ТТФ (300 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 12 часов при комнатной температуре. Раствор концентрировали и остаток распределяли между водой (1 л) и этилацетатом (1 л). Органическую фазу сушили, концентрировали и получали соединение, указанное в заголовке (14,1 г).

МС (Электрораспыление): 382 (M-H⁺, 100%).

е) 3-[5-O-Ацетил-2,3-O-(1-метилэтилиден)-β-D-рибофуранозил] - 3,4-дигидро-5-(пропилтио)-7H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-он
Получен по методике Примера 21 b) с использованием продукта стадии d).

МС (Электрораспыление): 443 (М+H⁺, 100%).

f) 3-[5-О-Ацетил-2,3-О-(1-метилэтилиден)-β-D-рибофуранозил] -7-хлор-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин
Получен по методике Примера 21 c) с использованием продукта стадии е).

МС (ББА): 444, 446 (М+H⁺).

g) 3-[5-O-Ацетил-2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D- рибофуранозил]- 7-бутил-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин
Получен по методике Примера 21 c) с использованием продукта стадии е).

Бис (трифенилфосфин) палладий (II) хлорид (40 мг) и тетрабутилолово (0,81 мл) добавляли к раствору продукта стадии f) (500 мг) в 1-метил-2-пирролидиноне (5 мл) и смесь перемешивали в течение 2 часов при 100^oC, затем при комнатной температуре в течение 72 часов. Смесь распределяли между водой (100 мл) и этилацетатом (200 мл), органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл), сушили и концентрировали. Хроматография (SiO₂, гексан: этилацетат 85:15 в качестве элюента) давала соединение, указанное в заголовке (230 мг).

МС (ББА): 466 (М+H⁺).

7-Бутил-3-[2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D- рибофуранозил]-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин
Получен по методике Примера 16 а) с использованием продукта стадии q).

МС (ББА): 424 (М+H⁺).

i) (Е)-1-[7-Бутил-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β-D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота, 1,1 -диметилэтиловый эфир
Получен по методике Примера 1 i) с использованием продукта стадии h).

МС (ББА): 520 (М+H⁺).

j) (Е)-1-[7-Бутил-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроновая кислота
Получена по методике Примера 1i) с использованием продукта стадии h).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 7,00 (1H, д), 6,52 (1H, с), 6,01 (1H, д), 5,30 (2H, шс), 4,94 (1H, с), 4,56 (1H, т), 4,76-4,81 (2H, д), 3,12 (4H, ш с), 1,80 (2H, кв), 1,70 (2H, кв), 1,37 (2H, кв), 0,99 (3H, т), 0,89 (3H, т).

Пример 23
(Е)-N-[1-[5,7-Ди(бутиламино)-3H-1,2,3-триазоло[4,5- (1] пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D- рибогептофурануроноил] -L-acпарагиновая кислота, моноаммониевая соль
а) (Е)-N-[1-[7-Бутиламино-5-(метилсульфонил)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогептофурануроноил]-L-аспарагиновая кислота, 1,1-диметилэтиловый эфир
3-Хлорпероксибензойную кислоту (50%, 0,12 г) в этаноле (1 мл) добавляли за 1 час к перемешиваемому раствору продукта Примера 17 с) (0,1 г) в этаноле. После перемешивания в течение 16 часов при комнатной температуре раствор разбавляли дихлорметаном (50 мл), затем промывали водным раствором метабисульфита натрия (30 мл) и водным раствором карбоната натрия (2 х 20 мл). Органический слой сушили, концентрировали и получали соединение, указанное в заголовке (90 мг).

МС (ББА): 700 (М+H⁺), 299 (100%).

b) (Е)-N-[1-[5,7-Ди(бутиламино)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогептофурануроноил] - L-acпарагиновая кислота, 1,1-диметилэтиловый эфир
Получен по методике Примера 1 h) с использованием продукта стадии а).

МС (ББА): 665 (М+H⁺, 100%).

с) (Е)-N-[1-[5,7-Ди(бутиламиноэ-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси- β -D-рибогептофурануроноил]-L- аспарагиновая кислота, моноаммониевая соль
Получен по методике Примера 2 b) с использованием продукта стадии b).

МС (Электрораспыление): 553 (М+H⁺, 100%).

Пример 24
(Z)-1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d]-пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси- β -D- рибогепт-5-енофурануровая кислота
а) N-Бутил-5-(пропилтио)-3-[2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D- рибофуранозил]-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7- амин
Получен по методике Примера 18 b) с использованием продукта стадии 14е).

МС (ББА): 443 (М+H⁺), 267 (100%).

b) (Z)-1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-2,3-O- (1-метилэтилиден)- β -D-рибогепт-5-енофурануроновая кислота, 1,1- диметилэтиловый эфир
Получен по методике Примера 1i) с использованием продукта стадии а), причем соединение, указанное в заголовке, выделяли в качестве продукта, полученного в незначительном количестве.

МС (ББА): 535 (М+H⁺, 100%).

с) (Z)-1-[7-(Бутиламиноэ-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроновая кислота
Получена по методике Примера 1 j) с использованием продукта стадии b).

МС (ББА): 439 (М+H⁺), 267 (100%).

Пример 25
N-Бутил-5-(пропилтио)-3-[5,6-дидезокси-6-(1H-тетразол-5- ил)- β -D-рибогексофуранозил]-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-7-амин
а) (Е)-1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d] пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-2,3-O-(1-метилэтилиден) - β -D-рибогепт-5-енофуранурононитрил
Получен по методике Примера 1 i) с использованием продукта стадии 24а) и (трифенилфосфонарилиден)ацетонитрила.

МС (ББА): 460 (М+H⁺, 100%).

b) (Е)-1-[7-(Бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибогептофуранурононитрил
Получен по методике Примера 8 b) с использованием продукта стадии а).

МС (ФИ): 462 (М+H⁺, 100%).

с) N-Бутил-5-(пропилтио)-3-[5,6-дидезокси-2,3-O-(1-метилэтилиден) -6-(1H-тетразол-5-ил)-β-D-рибогексафуранозил- 3H-1,2,3-триазоло[4,5-d]пиримидин-7-амин
Азидотриметилсилан (0,30 г) и дибутилоловооксид (32 мг) добавляли к раствору продукта стадии b) (0,60 г) в толуоле (6 мл) и полученный раствор кипятили с обратным холодильником в течение 72 часов. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляли, а остаток очищали хроматографией (SiO₂, этилацетат:изогексан:уксусная кислота 100:100:1 в качестве элюента) с получением соединения, указанного в заголовке (0,26 г).

МС (ББА): 505 (М+H⁺), 267 (100%).

d) N-Бутил-5-(пропилтиоэ-3-[5,6-дидезокси-6-(1H-тетразол- 5-ил)- β -D-рибогексофуранозил]-3H-1,2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин- 7-амин
Получен по методике Примера 1 j) с использованием продукта стадии с).

МС (ББА): 465 (М+H⁺), 267 (100%).

ЯМР δ H (d₆-ДМСО): 9,08 (1H, т), 6,08 (1H, д), 5,65 (1H, д), 5,35 (1H, м), 4,76 (1H, т), 4,30 (1H, т), 3,98 (1H, м), 3,50 (2H, м), 3,06 (2H, м), 2,92 (2H, м), 2,05 (2H, м), 1,63 (4H, м), 1,34 (2H, м), 0,97 (3H, т), 0,91 (3H, т).

Пример 26
1,5,6-Тридезокси-1-[5,7-бис(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло-[4,5-d]пиримидин-3-ил]- β -D-рибогептофурануроновая кислота, натриевая соль
а) (Е)-1,2,3-Три-O-ацетил-5,6-дидезокси- β -D-рибогепт-5- енофурануроновая кислота, этиловый эфир
Этиловый эфир (Е)-метил-5,6-дидезокси-2,3-O-(1-метилэтилиден)- β -D-рибогепт-5-енофуранозидуроновой кислоты (получен как описано A.J.Cooper, R.G. Salomon, Tetrahedron Lett. , 1990, 31, 3813) (88,0 г) нагревали при 80^oC в смеси уксусной кислоты (256 мл) и воды (64 мл) в течение 16 часов при комнатной температуре. Упаривание давало остаток, который растворяли в пиридине (160 мл) и обрабатывали уксусным ангидридом (19,8 мл). Через 24 часа реакционную смесь разбавляли этилацетатом (500 мл) и промывали разбавленной HCl. Сушка и выпаривание давало масло, которое очищали хроматографией (SiO₂, изогексан: этилацетат 5:1 в качестве элюента) с получением соединения, указанного в заголовке, (5,34 г).

МС (ББА+RbI): 431, 429 (M+Rb⁺), 285 (100%).

b) 1,2,3-Три-О-ацетил-5,6-дидезокси- β -D- рибогептофурануроновая кислота, этиловый эфир
Получен по методике Примера 8 b) с использованием продукта стадии а).

МС (ББА+RbI): 433, 431 (M+Rb⁺), 185 (100%).

с) 2,3-Ди-О-ацетил-1,5,6-тридезокси-1-[5,7-бис (пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло[4,5-d] пиримидин-3-ил]-β-D-рибогептофурануроновая кислота, этиловый эфир, и 2,3-ди-О-ацетил-1,5,6-тридезокси-1-[5,7-бис(пропилтио)-3H-1, 2,3-триазоло [4,5-d]пиримидин-2-ил]-β-D-рибогептофурануроновая кислота, этиловый эфир.

Продукт стадии b) (1,00 г) и продукт стадии 14 b) (0,78 г) смешивали с п-толуолсульфокислотой (12 мг) и тщательно перемешивали при вакууме водоструйного насоса. Смесь погружали в масляную баню, нагретую до 140^oC. Нагревание продолжали в течение 10 мин, затем колбу охлаждали и реакционную смесь обрабатывали хлороформом. Промывание насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушка, выпаривание и хроматография (SiO₂, дихлорметан-этилацетат 15: 1 в качестве элюента) давали соединения, указанные в заголовке (5,34 г) в виде неразделимой смеси.

d) 1,5,6-Тридезокси-1-[5,7-бис(пропилтио)-3H-1,2,3- триазоло-[4,5-d]пиримидин-3-ил]- β -D-рибогептофурануроновая кислота, натриевая соль
Получена по методике Примера 3 c) с использованием продукта стадии с).

МС (ББА+RbI): 433, 431 (M+Rb⁺).

Фармацевтические композиции
Новые соединения настоящего изобретения могут быть введены парентерально, внутривенно, ингаляцией или перорально. Предпочтительным путем введения является внутривенное вливание.

Доза введения зависит от способа введения, серьезности заболевания, возраста и веса больного, а также от других факторов, обычно учитываемых штатным врачом больницы при определении индивидуальных режима и уровня доз, наиболее приемлемых для определенного пациента.

Примерами фармацевтических композиций, которые могут быть использованы, и подходящих наполнителей, разбавителей или носителей являются следующие:
для внутривенного введения или вливания - очищенная вода или физиологический раствор;
для ингаляционных композиций - необработанная лактоза;
для таблеток, капсул и драже - микрокристаллическая целлюлоза, фосфат кальция, диатомитовая земля, сахар, такой как лактоза, декстроза или маннит, тальк, стеариновая кислота, крахмал, бикарбонат натрия и/или желатин;
для суппозиториев - природные или отвержденные масла или воски.

Если соединение настоящего изобретения предназначено для использования в водном растворе, например, для вливания, может оказаться необходимым включение других наполнителей. В частности, могут быть использованы хелатирующие агенты или пассиваторы, антиоксиданты, агенты, регулирующие тонус, агенты, регулирующие pH, и буферные агенты. Растворы, содержащие соединение формулы (1), если нужно, могут быть выпарены, например, сушкой вымораживанием или распылительной сушкой, для получения твердой композиции, которая может быть восстановлена перед использованием. Композиции также могут содержать подходящие консервирующие, стабилизирующие и смачивающие агенты, агенты, способствующие растворению, например, водорастворимый полимер целлюлозы, такой как гидроксипропилметилцеллюлоза, или водорастворимый гликоль, такой как пропиленгликоль, подслащивающие и окрашивающие средства и отдушки. В случае необходимости, соединения могут быть сформулированы в виде формы с пролонгированным выделением.

Согласно еще одному аспекту, изобретение относится к использованию соединения формулы (1) или его фармацевтически приемлемой соли для производства медикамента для лечения нарушений, связанных с агрегацией тромбоцитов.

Согласно еще одному аспекту, изобретение относится к способу лечения любого нарушения, в которое включена агрегация тромбоцитов, включающему введение эффективного количества соединения формулы (1) больному, страдающему таким заболеванием.

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (1) включают соли щелочных металлов, например, соли натрия и калия; соли щелочноземельных металлов, например, соли кальция и магния; соли элементов III группы, например, соли алюминия; и соли аммония. Соли с подходящими органическими основаниями, например, соли с гидроксиламином; низшими алкиламинами, например, метиламином или этиламином; с замещенными низшими алкиламинами, например, гидроксизамещенными алкиламинами; или с моноциклическими азотсодержащими гетероциклическими соединениями, например, пиперидином или морфолином; и соли с аминокислотами, например, аргинином, лизином и т.д. или их N- алкилпроизводными; или с аминосахарами, например, N-метил- D- глюкамином или глюкозамином. Перечисленные выше соли являются только примерами солей, которые могут быть использованы в соответствии с настоящим изобретением, и их перечень не должен рассматриваться как исчерпывающий.

Предпочтительными фармацевтически приемлемыми солями соединений формулы (1) являются соли щелочных металлов и соли аммония, более предпочтительны соли натрия и моноаммониевые соли.

Биологическое испытание
Эффективность соединений настоящего изобретения в качестве ингибиторов агрегации тромбоцитов определяли по их способности действовать в качестве антагонистов P_2T-рецептора, как показано в следующем тексте.

Количественное определение агонистической/антагонистической активности в отношении P_2T-рецептора промытых тромбоцитов человека.

Приготовление
Венозную кровь человека (100 мл) распределяли поровну между 3 пробирками, причем каждая содержала 3,2% тринатрийцитрат (4 мл) в качестве антикоагулянта. Пробирки центрифугировали в течение 15 мин при 240 G для получения плазмы, обогащенной тромбоцитами (ПОТ), к которой добавляли 300 нг/мл простациклина для того, чтобы стабилизировать тромбоциты во время операции промывания. ПОТ, не содержащую красных клеток, получали центрифугированием в течение 10 мин при 125 G и последующим центрифугированием в течение 15 мин при 640 G. Надосадочную жидкость отбрасывали, а лепешку тромбоцитов повторно суспендировали в модифицированном, не содержащем кальция растворе Tyrode (НКТ) (10 мл), имеющем состав: NaCl 137 мМ, NaHCO₃ 11,9 мМ, NaH₂PO₄ 0,4 мМ, KCl 2,7 мМ, MgCl₂ 1,1 мМ, декстроза 5,6 мМ, насыщали газообразной смесью 950 O₂/5% СО₂ и выдерживали при 37^oC. После добавления еще 300 нг/мл ПГ I₂ объединенную суспензию центрифугировали еще раз в течение 15 мин при 640 G. Надосадочную жидкость отбрасывали, а тромбоциты повторно суспендировали сначала в 10 мл НКТ, затем добавляли еще НКТ, чтобы довести конечное содержание тромбоцитов до 2 х 10⁵/мл. Эту конечную суспензию хранили в 60-мл шприце при 3^oC без доступа воздуха. Чтобы допустить восстановление нормальной функции после ингибирования ПГ I₂, тромбоциты использовали для исследования агрегации не раньше, чем через 2 часа после конечного ресуспендирования.

Во всех исследованиях 3-мл аликвоты суспензии тромбоцитов добавляли в пробирки, содержащие раствор CaCl₂ (60 мкл 50 мМ раствора, конечная концентрация 1 мМ). Добавляли фибриноген человека (Sigma, F 4883) и 8-сульфофенилтеофиллин (8-СФТ, чтобы блокировать любую антагонистическую активность соединений по отношению к P₁) с получением конечных концентраций 0,2 мг/мл (60 мкл раствора белка, способного свертываться, в физиологическом растворе с концентрацией 10 мг/мл) и 300 нМ (10 мкл 15 мМ раствора в 6% глюкозе), соответственно. Тромбоциты или буфер соответственно добавляли, в объеме 150 мкл в отдельные ячейки планшета с 96 ячейками. Все измерения сделаны трижды с тромбоцитами от каждого донора.

Протокол испытания
а) Оценка агонистической/антагонистической активности
Агрегацированные реакции в планшете с 96 ячейками, используя изменение поглощения, фиксируют регистрирующим устройством на планшете при 660 нм.

Поглощение каждой ячейки в планшете фиксировали при 660 нм, чтобы установить базовую цифру. Физиологический раствор или соответствующий раствор испытываемого соединения добавляли в каждую ячейку в объеме 10 мкл с получением конечной концентрации 0,001, 0,1, 1, 10 или 100 мМ. Планшет затем встряхивали в течение 5 мин на ротационном шейкере в положении 10 и фиксировали поглощение при 660 нм. Агрегация в этой точке является показателем агонистической активности испытываемого соединения. Затем в каждую ячейку добавляли физиологический раствор или АДФ (30 мМ; 10 мкл 450 мМ раствора) и планшет встряхивали еще в течение 5 мин до фиксирования поглощения снова при 660 нм.

Агонистическую активность оценивали как % ингибирования контрольной реакции на АДФ. Соединения настоящего изобретения показывали антиагрегационную активность при испытаниях по вышеуказанной методике.

Номер примера - pIC₅₀
1 - 7,60
2 - 9,30
3 - 5,85
4 - 7,14
5 - 7,04
6 - 7,00
7 - 7,15
8 - 6,24
10 - 5,93
14 - 7,39
pIC₅₀ представляет собой log₁₀ IC₅₀, где IC₅₀ представляет собой концентрацию антагониста, требующуюся для 50% ингибирования агрегации.

Изобретение относится к производным 3-Н-1,2,3-триазоло-[4,5d]-пиримидина общей формулы I, в которой В представляет собой О или СН₂; Х выбирают из NR¹R², SR¹ и C₁-C₇-алкила; Y выбирают из SR¹, NR¹R² и C₁-C₇-алкила; R¹ и R² каждый независимо представляет Н или C₁-C₇-алкил или R¹ представляет C₁-C₇-алкил, необязательно замещенный в алкильной цепи одним атомом О или S или одним или более галогенами, и R² представляет водород; R³ и R⁴ оба представляют водород или вместе образуют связь; А представляет СООН, С(О)NН(СН)_рСООН, С(О)N[(СН₂)_q-СООН] ₂, С(О)NНСН(СООН)(СН₂)_rСООН или 5-тетразолил, в которых р, q и r каждый независимо равен 1, 2 или 3, а также их фармацевтически приемлемым солям или эфирам. Также описывается способ получения этих соединений и содержащая их фармацевтическая композиция. Заявленные соединения предотвращают агрегацию тромбоцитов. 3 с. и 14 з.п.ф-лы.

1. Производные 3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] пиримидина общей формулы I

в которой B представляет O или CH₂;
X выбирают из NR¹R², SR¹ и С₁-С₇-алкила;
Y выбирают из SR¹, NR¹R² и С₁-С₇-алкила;
R¹ и R² каждый независимо представляет H или С₁-С₇-алкил или R¹ представляет С₁-С₇-алкил, необязательно замещенный в алкильной цепи одним атомом О или S или одним или более галогенами, и R² представляет водород;
R³ и R⁴ представляют водород или R³ и R⁴ вместе образуют связь;
A представляет COOH, C(O)NH(CH₂)_pCOOH, C(O)N[(CH₂)_q-COOH]₂, C(O)NHCH(COOH)(CH₂)_rCOOH или 5-тетразолил, в которых p, q и r каждый независимо равен 1, 2 или 3,
а также их фармацевтически приемлемые соли или эфиры. 2. Соединение формулы I по п.1, где X представляет NR¹R²; Y представляет SR¹; A представляет C(O)NHCH(COOH)(CH₂)_rCOOH и где R¹, R² и r определены в п.1. 3. Соединение по п.2, где X представляет NR¹R², где R¹ представляет водород и R² определен в п. 1; Y представляет SR¹, где R¹ представляет С₁-С₅-алкил, необязательно замещенный одним или больше галогенами; А представляет C(O)NHCH(COOH)(CH₂)COOH. 4. Соединение по п.1, которое представляет собой
[1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -3-[4-[7-бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил] -2-пропеновой кислоты, натриевую соль;
[1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -N-[3-[4-[7-бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L-аспарагиновой кислоты, динатриевую соль;
[1S-(1α,2β,3β,4α)] -4-[7-бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]-пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентанпропановой кислоты, натриевую соль;
[1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -3-[4-[7-бутиламино)-5-(пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил] -2-пропеновой кислоты, натриевую соль;
[1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -3-[4-[7-(этиламино)-5-(пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил] -2-пропеновой кислоты, натриевую соль;
[1S-(1α,2β,3β,4α)] -4-[7-бутиламино)-5-(пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]-пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентанпропановой кислоты, натриевую соль;
[1S-(1α,2β,3β,4α)] -4-[7-(этиламино)-5-(пентилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентанпропановой кислоты, натриевую соль;
[1R-(1α,2α,3β,5β)] -3-[7-(бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]-пиримидин-3-ил]-5-[2-(1H-тетразол-5-ил)этил-1,2-циклопентадиол;
[1R-(1α,2β,3β,4α)] -N-[3-[4-[7-бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил] пропаноил]-L-аспарагиновую кислоту;
[1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -N-[3-[4-[7-гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L-аспарагиновую кислоту;
[1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -3-[4-[7-(3,3-диметилбутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил] -2-пропеновую кислоту;
[1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -3-[4-[7-(2-метокси)этиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеновую кислоту;
[1R-(1α,2β,3β,4α)] -N-[3-[4-[7-(гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентилпропаноил]-L-аспарагиновую кислоту;
[1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -N-[3-[4-[5-(3,3,3-трифторпропил)тио] -7-[2-(метилтио)-этиламино] -3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L-аспарагиновой кислоты, моноаммониевую соль;
(E)-1-[7-(бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]-пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5-енофурануроновую кислоту;
(E)-N-[1-[7-(бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]-пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5-енофурануроноил] -L-аспарагиновую кислоту;
(E)-N-[1-[7-амино-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспарагиновой кислоты, моноаммониевую соль;
(E)-N-[1-[7-(бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]-пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогептофурануроноил]-L-аспаргиновой кислоты, моноаммониевую соль;
(E)-N-[1,5,6-тридезокси-1-[7-(гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]-пиримидин-3-ил]-β-D-рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспаргиновой кислоты, моноаммониевую соль;
(E)-1-[7-(N-бутил-N-метиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5-енофурануроновую кислоту;
(E)-N-[1-[7-(бутиламино)-5-(метилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспарагиновую кислоту;
(E)-1-[5-бутил-7-(бутиламино)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5-енофурануроновую кислоту;
(E)-1-[7-бутил-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5-енофурануроновую кислоту;
(E)-N-[1-[5,7-ди(бутиламино)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогептофурануроноил]-L-аспарагиновой кислоты, моноаммониевую соль;
(Z)-1-[7-бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил]-1,5,6-тридезокси-β-D-рибогеп-5-енофурануроновую кислоту;
N-бутил-5-(пропилтио)-3-[5,6-дидезокси-6-(1H-тетразол-5-ил)-β-D-рибогексофуранозил]-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d]-пиримидин-7-амин или 1,5,6-тридезокси-1-[5,7-бис(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -β-D-рибогептофурануроновой кислоты, натриевую соль. 5. Соединение по п.4, которое представляет собой (E)-N-[1-[7-(бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -1,5,6-тридезокси-β-D-рибогепт-5-енофурануроноил]-L-аспарагиновую кислоту. 6. Соединение по п.4, которое представляет собой [1R-(1α,2β,3β,4α)]-N-[3-[4-[7-(бутиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]пропаноил]-L-аспарагиновую кислоту. 7. Соединение по п.4, которое представляет собой [1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -N-[3-[4-[7-(гексиламино)-5-(пропилтио)-3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил]-2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L-аспарагиновую кислоту. 8. Соединение по п.4, которое представляет собой [1R-(1α(E),2β,3β,4α)] -N-[3-[4-[5-[(3,3,3-трифторпропил)тио] -7-[2-(метилтио)-этиламино] -3H-1,2,3-триазоло-[4,5-d] -пиримидин-3-ил] -2,3-дигидроксициклопентил]-2-пропеноил]-L-аспарагиновой кислоты, моноаммониевую соль. 9. Соединение формулы I по п.1 в форме соли. 10. Соединение по п.9, которое представляет собой соль щелочного металла или аммониевую соль соединения формулы I по п.1. 11. Соединение по п. 10, которое является натриевой солью соединения формулы I по п.1. 12. Соединение по п.10, которое является моноаммониевой солью соединения формулы I по п.1. 13. Соединение формулы I по п.1, которое находится в любой одной из его таутомерных, энантиомерных или диастереомерных форм. 14. Соединение формулы I по п.1, где B, X, Y, R¹, R², R³ и R⁴ определены в п. 1 и А выбирают из COOR¹¹, C(O)NH(CH₂)_pCOOR¹¹, C(O)N[(CH₂)_qCOOR¹¹]₂ или C(O)NHCH(COOR¹¹)(CH₂)_rCOOR¹¹, где p, q и r равны 1, 2 или 3 и R¹¹ представляет низший алкил. 15. Соединение формулы I по п.1 для предотвращения агрегации тромбоцитов. 16. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей агрегацию тромбоцитов активностью, содержащая соединение формулы I по п.1 в качестве активного ингредиента вместе с фармацевтически приемлемым носителем. 17. Способ получения соединения формулы I по п.1, включающий (i) взаимодействие соединения формулы I, где X представляет SR¹, NR¹R² или С₁-С₇-алкил; Y представляет SR¹, NR¹R² или С₁-С₇-алкил; R¹ и R² определены в формуле I; B представляет O или CH₂; R³ и R⁴ представляют водород или вместе образуют связь, и A представляет COOH, с соединением структуры NH₂(CH₂)_pCOOR¹¹, NH[(CH₂)_qCOOR¹¹]₂ или NH₂CH(COOR¹¹)(CH₂)_rCOOR¹¹, где p, q и r равны 1, 2 или 3 и R¹¹ представляет низший алкил, с использованием методов пептидного синтеза, с получением соединения формулы I, где X представляет SR¹, NR¹R² или С₁-С₇-алкил; Y представляет SR¹, NR¹R² или С₁-С₇-алкил; R¹ и R² определены в формуле I; B представляет O или CH₂; R³ и R⁴ представляют водород или вместе образуют связь, и A представляет C(O)NH(CH₂)_pCOOR¹¹, C(O)N[(CH₂)_qCOOR¹¹]₂ или C(O)NHCH(COOR¹¹)(CH₂)_rCOOR¹¹, где p, q и r равны 1, 2 или 3 и R¹¹ представляет низший алкил; (и) деэтерификацию продукта формулы I стадии (i) с получением соединения формулы I, где B представляет O или CH₂; X представляет NR¹R², SR¹ или С₁-С₇-алкил; Y представляет SR¹, NR¹R², или С₁-С₇-алкил; R¹ и R², каждый независимо, представляет H или С₁-С₇-алкил; R³ и R⁴ оба представляют водород или R³ и R⁴ вместе образуют связь и A представляет C(O)NH(CH₂)_pCOOH, C(O)N[(CH₂)_qCOOH]₂ или C(O)NHCH(COOH)(CH₂)_rCOOH, где p, q и r, каждый независимо, равны 1,2 или 3;
Приоритет по пунктам:
04.07.1996 - по пп.1, 2, 4, 5 и 7 - 17;
11.07.1995 - по п.3;
08.11.1995 - по п.6.