ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО ИЗ ЛИСТЬЕВ ЛИПЫ Folia Tilia И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСТРАКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ Российский патент 2003 года по МПК A61K35/78 A61P1/16 A61P1/04 A61P9/04 A61P9/10 A61P17/02 A61P25/28 A61P27/16 A61P29/00 A61P31/04 A61P31/10 A61P31/12 A61P37/00 A61P39/06 A61P43/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к созданию фармакологического средства широкого спектра действия на основе растительного сырья и способу его получения, а именно к лечебно-профилактическому средству для внутреннего и наружного применения с общеукрепляющим, противовоспалительным, ранозаживляющим, обезболивающим, детокстцирующим, антимикробным, антиангинальным, антиатеросклеротическим, антиоксидантным, антигипоксическим, нейропротекторным, седативным, кардиопротекторным, антиаритмическим, ангиопротекторным, стресспротекторным, иммунотропным, противогрибковым, нефропротекторным, гепатопротекторным, гастропротекторным, фервопротекторным, мембранопротекторным, фригопротекторным, радиопротекторным, ретинопротекторным и антисурдинантным действием и к способу приготовления средства на основе экстрактивных веществ листьев липы Folia Tilia, заготовленных в фазу от начала распускания почек до листопада, используемого для повышения защитных свойств организма, нарушении функций печени, мочевыделительной системы, хронических, вялотекущих процессов желудочно-кишечного тракта, опорно-двигательной системы, при заболеваниях верхних дыхательных путей, органов кроветворения, центральной нервной системы, сахарном диабете, а также для профилактики гриппа и острых респираторных заболеваний в осенне-весенний период.

Род деревьев семейства липовых (Tilia) насчитывает около пятидесяти видов в Северном полушарии и около семнадцать видов деревьев, произрастающих в России и в странах СНГ [2].

Известно большое количество фармакологических препаратов из растительного сырья липы, обладающих лечебно-профилактическим действием в основном из цветков липы, включая различные способы их получения, однако большинство из них обладают небольшим спектром фармакологической активности и находят свое применение для профилактики и лечения заболеваний конкретных нозологий, что значительно ограничивает область их применения [1, 7, 8, 9].

Известно использование в лечебных целях растительного сырья - почек, листьев и цветков с прицветниками липы сердцевидной. В народной медицине измельченные свежие почки, а также свежие листья используются в качестве наружного обезболивающего и противовоспалительного средства. Кроме того, известно использование этого сырья для лечения трофических язв и ран, для лечения геморроя, ревматизма и подагры, в качестве болеутоляющего средства при мигрени, цветки липы используются как седативное, противосудорожное и болеутоляющее средство. В официнальной медицине они применяются как противовоспалительное и потогонное средства при простудных заболеваниях [3, 4, 5] .

Известно лечебно-профилактическое средство, а именно спиртовой экстракт из растительного сырья, куда входят цветки липы, средство обладает детоксицирующим, адаптогенным, противовоспалительным действием.

Указанное средство требует значительного набора трав и обладает ограниченным фармакологическим спектром действия [10].

Известно средство для лечения сахарного диабета, представляющее собой эмульсию на основе экстрактивных веществ из смеси растительного сырья, в состав которого входят цветки липы сердцевидной [11].

Известно средство, содержащее экстракт из измельченной коры липы, и способ его получения [12] . Противовоспалительное, ранозаживляющее, антимикробное, детоксицирующее средство представляет собой водный экстракт, полученный экстрагированием измельченной коры липы. Экстракцию проводят в течение 98 часов при температуре 95^oС при соотношении воды, растительного сырья и мочевины 1:0,4:0,08. Для получения сухого экстракта жидкую фракцию высушивают при температуре 60^oС.

Недостатком препарата является недостаточно широкий спектр фармакологической активности и наличие побочных отрицательных эффектов, а использование коры липы для приготовления препаратов губительно действует на состояние деревьев.

В проанализированной авторами литературе не найдено известного источника информации, в котором описывалось лечебно-профилактическое средство из листьев липы Folia Tilia с широким спектром действия и способ его получения, таким образом предложенное средство из листьев липы Folia Tilia и способ его получения не имеют прототипа.

Задача изобретений (требуемый технический результат, достигаемый при использовании изобретений) является создание нового лечебно-профилактического средства, обладающего широким спектром действия, не имеющего противопоказаний к применению, а именно обладающего общеукрепляющим, противовоспалительным, ранозаживляющим, обезболивающим, детокстцирующим, антимикробным антиангинальным, антиатеросклеротическим, антиоксидантным, антигипоксическим, нейропротекторным, седативным, кардиопротекторным, антиаритмическим, ангиопротекторным, стресспротекторным, иммунотропным, противогрибковым, нефропротекторным, гепатопротекторным, гастропротекторным, фервопротекторным, мембранопротекторным, фригопротекторным, радиопротекторным, ретинопротекторным и антисурдинантным действием, а также разработка технологии указанного средства на основе экстрактивных веществ из листьев липы Folia Tilia, используемого для повышения защитных свойств организма при нарушении функций печени, мочевыделительной и опорно-двигательной системы, хронических вялотекущих процессов в желудочно-кишечном тракте, при заболеваниях верхних дыхательных путей, органов кроветворения, центральной нервной системы, сахарном диабете, а также для профилактики гриппа и острых респираторных заболеваний в осенне-весенний период.

Поставленные задачи решаются и требуемый технический результат достигается тем, что лечебно-профилактическое средство на основе экстрактивных веществ растительного сырья липы согласно изобретению представляет собой водное и спиртовое извлечение экстрактивных веществ листьев липы Folia Tilia, заготовленные в фазу от начала распускания почек до листопада, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Экстрактивные вещества в том числе: флавоноидные соединения, фенольные кислоты, аминокислоты, сапонины, кумарины, дубильные вещества, полисахариды - 0,1 - 47
10-95%-ный Спирт этиловый и вода - Остальное
При этом средство содержит преимущественно 40%-ное спиртовое извлечение экстрактивных веществ листьев липы сердцевидной Folia Tilia cordata Mill, заготовленных в фазу от начала бутонизации до конца плодоношения.

Поставленные задачи и требуемый технический результат достигается также тем, что по способу получения средства, обладающего общеукрепляющим, противовоспалительным, ранозаживляющим, детоксицирующим, антимикробным, антиангинальным, антиатеросклеротическим, антиоксидантным, антигипоксическим, нейропротекторным, седативным, кардиопротекторным, антиаритмическим, ангиопротекторным, стресспротекторным, иммунотропным, противогрибковым, нефропротекторным, гепатопротекторным, гастропротекторным, фервопротекторным, мембранопротекторным, фригопротекторным, радиопротекторным, ретинопротекторным, антисурдинантным действием, согласно изобретению в качестве растительного сырья используют листья липы Folia Tilia, заготовленные в фазу от начала распускания почек до листопада, а экстракцию осуществляют последовательно очищенной водой и 15-96%-ным спиртом этиловым методом дробной мацерации при температуре 40-90^oС или перколяции при комнатной температуре в течение 1-168 часов при соотнощении сырье:экстрагент 1:(5-100), полученное водное извлечение отфильтровывают и сгущают и объединяют с отфильтрованным спиртовым извлечением, объединенное водное и спиртовое извлечение отстаивают с последующим выделением суммы экстрактивных веществ. Преимущественно экстрагирование листьев липы сердцевидной Folia Tilia cordata Mill, заготовленных в фазу от начала бутонизации до конца плодоношения, осуществляют последовательно водой и 40%-ным спиртом этиловым при температуре 90^oС методом трехкратной мацерации или перколяции при 20^oС последовательно водой очищенной и 40%-ным спиртом этиловым, при этом объединенное водное и спиртовое извлечение отстаивают при температуре 5-15^oС в течение 24-120 часов в темноте, выделение суммы экстрактивных веществ из объединенного водного и спиртового извлечения осуществляют концентрацией извлечения до 5-30% воздушно-сухих веществ и сушкой концентрата до получения сухого экстракта.

Предложена группа изобретений, объединенная единым изобретательским замыслом, второе изобретение предназначено для получения первого. Оба изобретения решают одну и ту же задачу с достижением единого технического результата.

Экспериментально установлено, что именно в результате этой, заявляемой в качестве изобретения технологии удается в максимальной степени извлечение биологически активных веществ (БАВ).

Характерной особенностью изобретениий является использование листьев липы Folia Tilia, заготовленных в фазу от начала распускания почек до листопада, преимущественно в качестве растительного сырья используют листья липы сердцевидной Folia Tilia cordata Mill, заготовленных в фазу от начала бутонизации до конца плодоношения, при этом используют свежесобранные или высушенные листья вместе с черешками.

Экспериментально установлено, что накопление БАВ в листьях липы увеличивается от распускания почек до начала листопада, при этом наибольшее накопление БАВ происходит в период от начала бутонизации до конца плодоношения липы. (Результаты фитохимического анализа листьев липы представлены в таблице 1).

Кроме того, экспериментально установлено, что листья липы не обладают раздражающим и сенсибилизирующим действием, а для препаратов на его основе характерна неспецифичность действия, низкая токсичность. Они обладают уникальной совокупностью свойств и практически не имеют противопоказаний. (Результаты фармакологической характеристики препаратов из листьев липы представлены в таблице 4).

Как следует из приведенного выше обзора уровня техники, заявляемое лечебно-профилактическое средство из листьев липы, способ его получения не вытекают явным образом из известного современного уровня техники, т.е. предложенные решения неочевидны для специалиста и обладают изобретательским уровнем.

Сущность изобретения поясняется нижеприведенными примерами реализации изобретений в Санкт-Петербургской химико-фармацевтической академии.

Листья липы сердцевидной Folia Tilia cordata Mill, заготовленные в фазу от начала бутонизации до конца плодоношения, в виде цельных и измельченных листьев, по краю мелкозубчатых, с верхней стороны темно-зеленых, а снизу - сизоватого цвета, с содержанием экстрактивных веществ не менее 3%, пожелтевших и почерневших листьев не более 5%, других частей растений (веточек, почек) не более 4%, слабого запаха, сладковато-слизистого, слегка вяжущего вкуса. Сырье измельчают на дробилке, просеивают через сито 2 и 3.

Спиртовый экстрагент различной концентрации готовят в реакторе с мешалкой. В реактор подают 96%-ный спирт этиловый и туда же подают в необходимом количестве воду очищенную.

Пример 1.

Листья липы сердцевидной Folia Tilia cordata Mill в количестве 10 кг загружают в перколятор и заливают 75 л экстрагента (вода очищенная), проводят процесс экстракции (перколяции) в течение первого часа, затем полученное водное извлечение экстрактивных веществ сливают в отстойник, затем сгущают на треть от первоначального его объема. Затем это же сырье заливают 75 л экстрагента (преимущественно 40%-ного спирта этилового), процесс экстракции проводят аналогично. Сгущенное отфильтрованное водное извлечение экстрактивных веществ смешивают со спиртовым. Объединенное водное и спиртовое извлечение экстрактивных веществ отстаивают при температуре 5^oС в течение 24 часов или при температуре 15^oС в течение 120 часов. В результате получают лечебно-профилактическое средство, представляющее собой настойку коричневого цвета, горьковатого вкуса с ощущением слизистости, специфического запаха, с содержанием 47% экстрактивных веществ (23% экстрактивных веществ в 40%-ном спирте этиловом и 20% экстрактивых веществ в очищенной воде) или с содержанием 10% экстрактивных веществ в 95%-ном этиловом спирте или с содержанием 20% экстрактивных веществ в 10%-ном этиловом спирте).

Пример 2.

Листья липы сердцевидной Folia Tilia cordata Mill в количестве 10 кг загружают в перколятор и заливают 500 л экстрагента (вода очищенная), проводят процесс экстракции (перкаляции) в течение первого часа, затем полученное водное извлечение экстрактивных веществ сливают в отстойник, затем сгущают на треть от первоначального его объема. Затем это же сырье заливают 500 л экстрагента (преимущественно 40%-ного спирта этилового), процесс экстракции проводят аналогично. Сгущенное отфильтрованное водное извлечение экстрактивных веществ смешивают со спиртовым. Объединенное водное и спиртовое извлечение экстрактивных веществ отстаивают при температуре 5^oС в течение 24 часов или при температуре 15^oС в течение 120 часов В результате получают лечебно-профилактическое средство, представляющее собой гомеопатическую настойку коричневого цвета, горьковатого вкуса с ощущением слизистости, специфического запаха, с содержанием 0,1% экстрактивных веществ.

Пример 3.

Листья липы сердцевидной Folia Tilia cordata Mill в количестве 10 кг загружают в экстрактор с водяной рубашкой и заливают 25 л экстрагента (вода очищенная) и проводят экстракцию (настаивание) в течение 10 ч, затем полученное водное извлечение сливают в отстойник, а в экстрактор заливают очередную порцию экстрагента (25 л воды очищенной). Экстрагиварование (мацерация) очищенной водой осуществляют троекратно при температуре 90^oС. Процеживание осуществляют на вакуумном фильтре. Затем это же сырье заливают 25 л экстрагента (40%-ного спирта этилового) и аналогичным образом проводят трехкратную мацерацию. Весь процесс экстрагирования занимает 168 часов. Сначала водное извлечение выпаривают на треть от первоначального ее объема и смешивают со спиртовым. Лечебно-профилактическое средство (спиртовой экстракт) представляет собой жидкость коричневого цвета, горьковатого вкуса с ощущением слизистости, специфического запаха, с содержанием 47% экстрактивных веществ.

Пример 4.

Выделение суммы экстрактивных веществ производят из объединенного водного и спиртового излечения, полученного по методу дробной мацерации или перколяции концентрацией, используя вакуумную отгонку экстрагента, а затем концентрат высушивают на вакуумной распылительной сушилке до получения сухого экстракта. Полученный порошок из листьев липы Folia Tilia cordata Mill можно использовать для изготовления таблеток, мазей, паст, кремов, суппозиториев, растворов.

Пример 5.

Проведенное нами исследование фитохимического состава доказало, что для лечебно-профилактического средства из листьев липы может быть характерно присутствие таких групп БАВ (биологически активных веществ) как флавоноиды, фенольные кислоты, аминокислоты, сапонины, кумарины, дубильные вещества, полисахариды. Для определения флавоноидов проведена качественная цветная реакция (реакция с алюминием-хлоридом) к средству добавляют 1%-ный спиртовый раствор аллюминия-хлорида в 95%-ном этиловом спирте, появляется желто-зеленое окрашивание, а именно в средстве присутствуют флавоноиды.

Пример 6.

Идентификация средства по такой группе БАВ, как дубильные вещества, осуществляют с использованием способности их давать цветные реакции с солями железа. К средству прибавляют раствор железоамонийных квасцов, появляется черно-зеленое окрашивание.

Пример 7.

Для доказательства в подлинности средства такой группы БАВ, как полисахариды, проведена реакция осаждения 95%-ным этанолом. Появляются хлопьевидные сгустки, выпадающие в осадок при стоянии.

Пример 8.

Идентификацию кумаринов, содержащихся в средстве, осуществляют хроматографически, на хроматограмме появляются два пятна желтого цвета.

Фармакологическое изучение лечебно-профилактического средства на основе листьев липы Folia Tilia.

Исследования лечебно-профилактического средства на все виды фармакологического действия (острая и хроническая токсичность, кумулятивное действие, эмбриотоксическая, аллергенная, канцерогенное действие) показали, что данное средство не обладает этими видами действия (см. табл.1, 2, 3, 4), что позволило провести испытание средства на добровольцах. Испытания проведены более чем на 100 добровольцах. Ежедневно в течение 2 месяцев каждый из них принимал по 300 мг сухого экстракта (по 100 мг три траза в день после еды), через каждые 10 дней исследовали кровь, мочу, регистрировали общее состояние. Наблюдалось отсутствие побочных эффектов. У 38 добровольцев, регулярно выполнявших физические нагрузки умеренной интенсивности, улучшились показатели, что свидетельствует о благоприятном влиянии средства на кислородное обеспечение клеток. У 26 добровольцев с различными формами вегето-сосудистых расстройств уже в первые две недели приема средства стабилизировалось артериальное давление и прекратились головные боли. Все добровольцы старше 50 лет отметили улучшение зрения, слуха, работоспособности, улучшение внимания, памяти. В период приема средства у детей 10-15 лет не зарегистрировано ни одного случая простудных заболеваний, выявлены существенные улучшения иммунологических показателей (восстановеление нормального уровня иммуноглобулинов A, G, М и показателей Т-клеточного иммунитета).

Изложенные выше подробные описания примеров практической реализации группы изобретений не оставляют никаких сомнений в их осуществимости. Проведенные фармакологические исследования и освоения технологии подтвердили уверенное достижение поставленных задач. Созданное новое лечебно-профилактическое средство на основе листьев липы Folia Tilia обладает общеукрепляющим, противовоспалительным, ранозаживляющим, детоксицирующим, антимикробным, антиангинальным, антиатеросклеротическим, антиоксидантным, антигипоксическим, нейропротекторным, седативным, кардиопротекторным, антиаритмическим, ангиопротекторным, стресспротекторным, иммунотропным, противогрибковым, противопротозойным, нефропротекторным, гепатопротекторным, гастропротекторным, фервопротекторным, мембранопротекторным, фриопротекторным, радиопротекторным, ретинопротекторным, антисурдинантным действием и может быть использовано для повышения защитных свойств организма, нарушений функций печени, мочевыделительной системы, хронических вялотекущих процессов желудочно-кишечного тракта, опорно-двигательной системы, при заболеваниях верхних дыхательных путей, органов кроветворения, центральной нервной системы, сахарном диабете, а также для профилактики гриппа и острых респираторных заболеваний в осенне-весенний период.

В целом, учитывая новизну и неочевидность изобретения, показанную в разделе сущность изобретения, существенность всех общих и частных признаков изобретения (показанную в разделе "Раскрытие сущности изобретения"), а также указанную в разделе "Промышленная применимость" осуществимость изобретения и достижение изобретением поставленных задач, заявленная группа изобретений удовлетворяет всем требованиям, предъявляемым к изобретениям.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Растительные ресурсы России и сопредельных государств: Часть I - Семейства Lycopodiaceae - Ephdraceae, часть II- Дополнение к 1-7-му томам. Спб.: Мир и семья. - 1995, 96, - 571 с.

2. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; семейства Paeoniaceae - Thymelanaceae. - Л.: Наука, 1985, - 336с.

3. Государственная фармакопея СССР XI изд. - М.: Медицина, 1989, вып.2 - 400с.

4. Государственный реестр лекарственных средств. - М., 2000, - 1202 с.

5. Справочник видаль. Лекарственные препараты в России, изд. 7-е перераб. и дополн. - Справочник. М.: АстраФармСервис. - 2001, - 1536.

6. Муравьев И.А. Технология лекарств М., Медицина, 1980, стр.186, 198, 202.

7. Пастушенков. Л. В. , Лесиовская Е. Е. Растения - антигипоксанты (фитотерапия). - СПб.: Хим.-фарм. инст., 1991. - С.26.

8. Попов А.П. Лекарственные растения в народной медицине. - Киев: Здоровье, 1969, - 315 с.

9. Пастушенков Л. В. "Растения - друзья здоровья". Лениздат, 1989 г., стр.84.

10. Патент RU 2085580, А 61 К 35/78, опубликован 27.07.97.

11. Патент RU 2070409, A 61 K 35/78, опубликован 20.12.96.

12. Патент RU 2038093, A 61 K 35/78, опубликован 13.07.93.

Изобретение относится к медицине, а именно к гомеопатическим, лечебно-профилактическим средствам для внутреннего и наружного применения, обладающих общеукрепляющим, противовоспалительным, ранозаживляющим, детоксицирующим, антимикробным, антиангинальным, антиатеросклеротическим, антиоксидантным, антигипоксическим, нейропротекторным, седативным, кардиопротекторным, антиаритмическим, ангиопротекторным, стресспротекторным, иммунотропным, противогрибковым, нефропротекторным, гепатопротекторным, гастропротекторным, фервопротекторным, мембранопротекторным, фригопротекторным, радиопротекторным, ретинопротекторным и антисурдинантным действием. Средство представляет водное извлечение из листьев, заготовленных в фазу от начала распускания почек до листопада, при следующем соотношении компонентов, мас. %: экстрактивные вещества 0,1-47, 10-95%-ный спирт этиловый и вода очищенная остальное. Проводят экстракцию сначала водой, затем 15-96%-ным спиртом этиловым при 40-90^oС методом дробной мацерации или перколяции в течение 1-168 ч при соотношении сырье-экстрагент 1:(5-100), полученные извлечения объединяют и выделяют сумму экстрактивных веществ. Изобретение позволяет реализовать указанное назначение. 2 с. и 4 з.п.ф-лы, 4 табл.

1. Средство, обладающее общеукрепляющим, противовоспалительным, ранозаживляющим, детоксицирующим, обезболивающим, антимикробным, антиангинальным, антиатеросклеротическим, антиоксидантным, антигипоксическим, нейропротекторным, седативным, кардиопротекторным, антиаритмическим, ангиопротекторным, стресспротекторным, иммунотропным, противогрибковым, нефропротекторным, гепатопротекторным, гастропротекторным, фервопротекторным, мембранопротекторным, фригопротекторным, радиопротекторным, ретинопротекторным, антисурдидантным действием, характеризующееся тем, что оно представляет собой водное и спиртовое извлечение экстрактивных веществ листьев липы Folia Tilia, заготовленных в фазу от начала распускания почек до листопада, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Экстрактивные вещества - 0,1-47
10-95% Спирт этиловый и вода очищенная - Остальное
2. Средство по п.1, характеризующееся тем, что оно содержит преимущественно 40% спиртовое извлечение экстрактивных веществ листьев липы сердцевидной Folia Tilia cordata Mill, заготовленных в фазу от начала бутонизации до конца плодоношения. 3. Способ получения средства, обладающего общеукрепляющим, противовоспалительным, ранозаживляющим, детоксицирующим, обезболивающим, антимикробным, антиангинальным, антиатеросклеротическим, антиоксидантным, антигипоксическим, нейропротекторным, седативным, кардиопротекторным, антиаритмическим, ангиопротекторным, стресспротекторным, иммунотропным, противогрибковым, нефропротекторным, гепатопротекторным, гастропротекторным, фервопротекторным, мембранопротекторным, фригопротекторным, радиопротекторным, ретинопротекторным, антисурдидантным действием, характеризующийся тем, что в качестве растительного сырья используют измельченные свежесобранные или высушенные листья липы Folia Tilia, заготовленные в фазу от начала распускания почек до листопада, а экстракцию осуществляют последовательно водой очищенной и 15-96% спиртом этиловым при температуре 40-90^oС методом дробной мацерации или перколяции при комнатной температуре в течение 1-168 ч при соотношении сырье-экстрагент 1:(5-100), полученное водное извлечение отфильтровывают, сгущают и объединяют с отфильтрованным спиртовым извлечением, объединенное водное и спиртовое извлечение отстаивают с последующим выделением суммы экстрактивных веществ. 4. Способ по п. 3, характеризующийся тем, что экстрагирование листьев липы сердцевидной Folia Tilia cordata Mill, заготовленных в фазу от начала бутонизации до конца плодоношения осуществляют преимущественно последовательно водой и 40% спиртом этиловым методом трехкратной мацерации при 90^oС или перколяции последовательно водой очищенной и 40% спиртом этиловым при 20^oС. 5. Способ по п.3 или 4, характеризующийся тем, что объединенное водное и спиртовое извлечение отстаивают при температуре 5-15^oС в течение 24-120 ч в темноте. 6. Способ по п.5, характеризующийся тем, что выделение суммы экстрактивных веществ из объединенного водного и спиртового извлечения осуществляют концентрацией извлечения до 5-30% воздушно-сухих веществ и сушкой концентрата до получения сухого экстракта.