СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСА, ОБЛАДАЮЩЕГО АДАПТОГЕННЫМ, ГИПОГЛИКЕМИЧЕСКИМ, АНТИГИПОКСИЧЕСКИМ И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 1999 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к медицине и касается лекарственных средств, получаемых из растительного сырья.

Известны лекарственные средства, обладающие адаптогенным и тонизирующим действием, получаемые из растительного сырья: корневищ элеутерококка, корневищ и корней родиолы розовой, корней аралии маньчжурской, женьшеня, левзеи [1] . Получают их в виде настоек или жидких экстрактов с использованием 40 - 70% водного этанола путем экстрагирования измельченного растительного сырья. Эти способы длительны и трудоемки [2].

Известны способы экстракции сапонинов из листьев и корней женьшеня спиртами (CH₃OH, C₂H₅OH) [3] и азеотропными смесями хлороформа, хлористого метилена и спирта [4]. Их недостаток - способы предназначены для получения только одной биологически активной группы веществ.

Из литературы известно, что в листьях женьшеня кроме сапонинов содержатся много других активных веществ. Содержание панаксозидов (веществ, вызывающих адаптогенный эффект) в них в 2 - 3 раза больше, чем в корнях [5, 6] . Состав биологически активных веществ (БАВ) листьев женьшеня отличается от состава БАВ корней. В листьях обнаружено большое количество панаксозидов спектрофотометрическим методом [7]. Кроме панаксозидов (сапонинов), в листьях обнаружены флавоновые гликозиды [6, 8] (кемферол, трифолин, панасенозид), присутствуют каротин, алифатические, ароматические и гетероциклические аминокислоты.

Известно, что флавоноиды обладают отличным от панаксозидов действием: в частности, противовоспалительным, желчегонным, спазмолитическим, гипоацидным и др. эффектами [8]. Поэтому целесообразно было разработать метод получения комплексного препарата, содержащего нативный комплекс как панаксозидов, так и флавоноидов, что позволяет расширить спектр действия препарата.

Известен способ получения экстракта из листьев женьшеня, включающий измельчение листьев, экстракцию кипящей водой, фильтрование и сушку. Способ длителен, многостадиен, используется большой объем экстрагента (50 об.ч. на 1 вес. часть сырья), при экстракции вводят дополнительно хлористый натрий и лимонную кислоту [9].

Лучшие и наиболее известные среди препаратов-адаптогенов из растительного сырья - препараты из корня женьшеня. Способ получения настойки из корней женьшеня является наиболее близким к предлагаемому.

Настойку корня женьшеня получают методом перколяции [2, стр. 175] в соотношении 1:10 при использовании в качестве экстрагента 70% этилового спирта [2, стр. 182]. Корни женьшеня измельчают, смачивают 70% спиртом и оставляют на 4 ч, после чего набухший материал плотно укладывают в перколятор и заливают экстрагент до образования "зеркала" - слоя жидкости на поверхности сырья. Сырье настаивают 24 ч, а затем растительный материал медленно перколируют, спуская за 1 ч объем жидкости, соответствующий примерно 1/48 используемого объема перколятора, до получения необходимого количества настойки. Сверху в перколятор подается свежий экстрагент. Всего на получение вытяжки затрачивается порядка 48 ч (2-ое суток). Затем вытяжку отстаивают в течение двух суток, фильтруют и получают настойку.

Недостаток метода - длительный период настаивания и вытеснения вытяжки. Полученный продукт содержит небольшое количество панаксозидов и обладает недостаточным адаптогенным действием.

Задача изобретения - разработать технологичный и экономичный способ получения комплекса БАВ из растительного сырья, обладающего сильновыраженным адаптогенным, антистрессорным, гипогликемическим и противовоспалительным действием при низкой токсичности, расширить ассортимент таких средств.

Поставленная задача реализуется предлагаемым способом, включающим экстракцию водным этанолом БАВ, в котором в качестве сырья используют разновозрастные листья женьшеня, экстракцию проводят 20 - 50% водным этанолом в течение 8 - 11 ч, причем соотношение сырье : экстрагент - 1 : (10 - 14). Полученную вытяжку отстаивают и фильтруют. Из фильтрата можно получить сухой экстракт.

Приготовленный в виде настойки комплекс обладает адаптогенным, гипогликемическим, антигипоксическим и противовоспалительным действием.

Выбор экстрагента отражен в табл. 1.

Высокое содержание панаксозидов найдено в листьях различного возраста (табл. 2).

Изобретение иллюстрируется следующими примерами (см. табл. 3).

Пример: 500 г измельченного сырья (частицы размером 3 - 5 мм) загружают послойно в перколятор, смачивая водным этанолом соответствующей концентрации, заливают экстрагентом до образования свободного слоя "зеркала" и настаивают 2 - 4 ч. Экстракцию сырья производят при подаче сверху водного этанола соответствующей концентрации со скоростью 1000 мл/ч (6 - 7 ч.) до получения 5000 мл вытяжки. Вытяжку отстаивают в течение суток при температуре 8^oC и фильтруют. При этом выход панаксозидов составляет 88 - 96% от их содержания в высушенных листьях женьшеня.

Фармакологические испытания позволили определить высокий уровень защитного действия заявляемого комплекса на организм животных при воздействии ряда экстремальных факторов. Так, согласно результатам, представленным в табл. 4, впервые показано, что в сравнении с официнальной настойкой корня женьшеня (НКЖ), комплекс обладает более высокой противогипоксической активностью. В условиях острой гипобарической гипоксии время жизни животных, получивших профилактически изучаемый комплекс (однократно), увеличивается на 800% по сравнению с контрольными значениями и составляет 12,72 ± 3,40 мин, тогда как соответствующий показатель для животных, получавших НКЖ, составляет 3,47 ± 1,00 мин. В этой же табл. приведены результаты сравнительного изучения защитного эффекта НКЖ и заявляемого комплекса на других экспериментальных моделях. Практически во всех случаях он превосходил НКЖ по эффективности.

Особое значение имеет впервые обнаруженное на разработанной нами модели преимущество нового средства в сложных условиях воздействия комплекса экстремальных факторов: гипоксия + перегревание + физическая статическая нагрузка.

Эти результаты позволяют сделать прогноз об эффективности его применения у людей, находящихся в тяжелых условиях профессиональной деятельности.

Большим преимуществом заявляемого комплекса является более выраженный по сравнению с НКЖ гипогликемический эффект, что позволяет рекомендовать его для комплексной терапии сахарного диабета.

Соответствующие данные приведены в табл. 5.

Подробно изучены также противовоспалительные и ранозаживляющие свойства предлагаемого комплекса. Впервые установлено, что при профилактическом введении животным комплекса резко снижается количество деструкций слизистой желудка крыс, подвергнутых иммобилизационному стрессу, резерпинизации, а также количество эрозий, вызванных перевязкой привратника, введением бутадиона или атофана. Ранозаживляющее действие комплекса обнаружено на модели полнослойных ран. Профилактическое и лечебное применение комплекса способствовало сокращению сроков заживления ран. Отчетливое действие наблюдалось в фазу эпителизации поврежденной поверхности.

Из представленных материалов фармакологических исследований видно, что комплекс, полученный предложенным способом из разновозрастных листьев женьшеня, обладает выраженным адаптогенным, антигипоксическим, гипогликемическим и противовоспалительным действием, более эффективным, чем активность НКЖ. К достоинствам комплекса необходимо отнести также отсутствие у него токсичности: ЛД₅₀ = 84 г/кг.

Таким образом предлагаемый способ позволяет получить из растительного сырья, которое ранее не использовали (отход производства при заготовке корня женьшеня), т. е. из разновозрастных листьев женьшеня, нетоксичный комплекс БАВ, обладающий адаптогенной, антигипоксической, гипогликемической и противовоспалительной активностью. Способ технологичен (вытяжку можно получить на доступном оборудовании) и экономичен.

Литература:
1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. ч. 1. Вильнюс, 1993 г.

2. Муравьев Н.А. Технология лекарств. М. Медицина, 1980 г., т. 1, 391 с.

3. Патент ФРГ N 2456889 от 14.04.77 г.

4. Минина С.А., Громова Л.Н. и др. Способ получения сапонинов из женьшеня. Бюлл. изобр., 1984, N 42, А.С. N 1123701 (СССР).

5. Легостева А. Б., Грушвицкий И.В., Минина С.А. Возрастная и сезонная динамика содержания панаксозидов в листьях культивируемого Panax ginseng C. A. May // Растительные ресурсы- 1986. N 4 - стр. 523 - 526.

6. Бржихнач Б., Шаповалов В.К., Севрюк Н.И. К фармакогностической характеристике листьев Panax ginseng C.A. May // Растительные ресурсы - 1982. т. 18, вып. 3 - с. 357 - 363.

7. Минина С.А., Легостаева А.Б. Способ количественного определения действующих веществ в сырье и лекарственных формах женьшеня // Бюлл. изобр., 1989, N 18, А.С. 1480568 (СССР).

8. Komatsu M., Makigushi V., Tomimori T. Studies on the contituents of the herb of Panax ginseng C.A. Mayer. II. On the flavonoid contituents. Vakugaku Zasshi. - 1969. - V. 89, - N 1 - p. 122 - 126.

9. Патент Р.Ф. N 1833171 (з. N 5024903) A 23 L 2/38. БИ N 29 (93).

Способ относится к медицине и предназначен для получения средства из женьшеня. Экстракции подвергают разновозрастные листья женьшеня 20-50%-ным водным этанолом при соотношении сырье : экстрагент 1 : (10-14) в течение 8-11 ч. Вытяжку отстаивают и фильтруют. Комплекс обладает повышенным по сравнению с настойкой корня женьшеня адаптогенным действием, обладает гипогликемическим, противовоспалительным и антигипоксическим действием, нетоксичен. 5 табл.

Способ получения комплекса на основе женьшеня путем экстракции его водным этанолом, отличающийся тем, что экстракции подвергают разновозрастные листья женьшеня 20 - 50%-ным водным этанолом при соотношении сырье : экстрагент 1 : (10 ^oC 14) в течение 8 - 11 ч, вытяжку отстаивают и фильтруют.