ВЫСОКОМЕЧЕННЫЙ ТРИТИЕМ БУТИРИЛХОЛИНХЛОРИД Российский патент 2004 года по МПК C07B59/00 C07C219/06 

Изобретение относится к области органической химии и может найти применение в аналитической химии, биоорганической химии, биохимии и прикладной медицине.

Известен бутирилхолинхлорид формулы I:

Данное соединение используется для определения активности холинэстеразы Sumner, Somers, Chemistry and Methods of Enzymes (New York, 1947), Mendel, Mundell, Biochem. J. 37, 64 (1943) Davies, Green, Advan. Enzymol 20, 283 (1958). The Merck Index 1999 N 2264.

Ряд методов исследования физиологически активных соединений требует наличия их меченых аналогов.

Однако меченные тритием аналоги бутирилхолинхлорида не описаны.

Известно, что замена атомов соединений на их меченые аналоги не приводит к изменению каких-либо свойств исходного соединения (Evans Е.А. - Tritium and its compounds London Butterworths, 1947, p.48).

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является расширение ассортимента меченых аналогов физиологически активных веществ.

Достигается указанный технический результат получением нового меченого физиологически активного соединения - высокомеченного тритием бутирилхолинхлорида формулы II:

Ниже приведен пример реализации изобретения.

Пример 1

В реакционную ампулу помещали 2 мг бутирилхолинхлорида, нанесенного на 20 мг 5% Pt/C. Затем ампулу вакуумировали до давления 0,1 Па, заполняли газообразным тритием до давления 400 гПа и выдерживали при температуре 180°С 10 мин. Избыточный тритий удаляли вакуумированием. После охлаждения продукты реакции растворяли в 2 мл метанола с 10 мкл концентрированной соляной кислоты, катализатор отфильтровывали, а фильтраты упаривали несколько раз в виде раствора в метаноле (3×3 мл) для удаления лабильного трития. Остаток разделили на три зоны, используя бумажную хроматографию. Зона, содержащая бутирилхолинхлорид, включала 66% общей метки. Окончательную очистку проводили методом ВЭЖХ. Из реакционной смеси выделен меченый бутирилхолинхлорид с выходом 16% и молярной радиоактивностью - 6,5 Ки/ммоль, радиохимической чистотой - 98-99%.

Бумажная хроматография. На бумаге Whatman ЗММ, в системе бутанол-этанол-уксусная кислота-вода (8:2:1:3), R_f 0,67.

ВЭЖХ бутирилхолинхлорида проводили на колонке Kromasil 100 C₁₈, 7 мкм, 4×150 мм, в системе метанол-вода-гептафтормасляная кислота (30:70:0,1), скорость элюента - 1,0 мл/мин, время удерживания – 8,76 мин.

Для приема и обработки хроматографических данных использовался программно-аппаратный комплекс “МультиХром” (ЗАО “Амперсенд”, Россия) на базе IВМ PC/AT. Радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике с эффективностью регистрации трития 30% в диоксановом сцинтилляторе.

Таким образом, получено новое высокомеченное тритием физиологически активное соединение.

Изобретение относится к новому высокомеченному бутирилхолинхлориду формулы [³H]C₃H₇-COO-CH₂-CH₂-N⁺(CH₃)₃Cl^-, который является аналогом бутирилхолинхлорида и может найти применение в аналитической химии, биоорганической химии, биохимии и прикладной медицине, в частности, для определения активности холинэстеразы.

Высокомеченный тритием бутирилхолинхлорид формулы

[³H]C₃H₇-COO-CH₂CH₂-N⁺(CH₃)₃ Сl^-.