ВЫСОКОМЕЧЕННЫЙ ТРИТИЕМ [H]-РАПАМИЦИН Российский патент 2004 года по МПК C07D498/18 

Изобретение относится к органической химии и может найти применение в аналитической химии, биоорганической химии, биохимии и прикладной медицине.

При изучении физиологически активных соединений необходимы их меченые аналоги.

Известен рапамицин формулы I

Данное соединение, получившее наименование “рапамицин”, является сильным иммуносупрессором и реагентом, используемым в иммунохимии (N.H.Sigal, F.J.Dumont // Ann.Rev.Immunol., 1992. Vol.10. 519-560. J.Y.Chang, S.N.Sehgai // Brit.J.Rheumatol. 1991. Vol. 30. № 2. 62-65) [1].

Однако его меченный тритием аналог не описан.

Известно, что замена атомов соединений на их меченые аналоги не приводит к изменению каких-либо свойств исходного соединения (Evans Е.А. - Tritium and its compounds London Butterworths, 1974, p.48) [2].

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является расширение ассортимента меченых аналогов физиологически активных соединений.

Достигается указанный технический результат получением высокомеченного тритием ³H-рапамицина формулы I.

Ниже приведен пример реализации изобретения.

Пример

В первую камеру реакционной двукамерной ампулы с сообщающимися между собой первой нижней и второй верхней камерами помещали 40 мг окиси палладия и 40 мг 5% PdO/BaSO₄, в другую - 50 мкл абс. диоксана, 5 мкл триэтиламина и 12 мг рапамицина. Вторую камеру замораживали жидким азотом и ампулу вакуумировали до давления 0,1 Па и заполняли газообразным тритием до давления 333 ГПа. Затем первую камеру нагревали до 70°С. Окись палладия восстанавливалась, тритиевая вода перемораживалась во вторую камеру. Реакционную ампулу вакуумировали до давления 0,1 Па, продолжая нагревать первую ампулу до 70°С, и заполняли аргоном. Затем содержимое второй камеры переносили в первую камеру, которую запаивали. Таким образом реакционная смесь состояла из восстановленного катализатора, 100% тритиевой воды, триэтиламина и раствора рапамицина в диоксане. Содержимое ампулы нагревали в течение 30 мин при 100°С, после чего ампулу вскрывали, реакционную смесь разбавляли 0,5 мл хлороформа. Катализатор отделяли фильтрованием и промывали его последовательно хлороформом (3×1 мл) и метанолом (3×1 мл). Тритиевую воду, диоксан и триэтиламин отгоняли. Лабильный тритий удаляли, несколько раз растворяя вещество в метаноле (5×2 мл) и упаривая последний.

Очистку меченого препарата осуществляли методом ВЭЖХ в две стадии:

1) на колонке Kromasil 100C₁₈, 7 мкм (8×250 мм), в 30-минутном градиенте от 0 до 100% элюента В в элюенте А, где элюент А - метанол-вода (70:30), элюент В - метанол; расход элюента - 2 мл/мин; время удерживания рапамицина - 17.78 мин;

2) на колонке Kromasil 100C₁₈, 7 мкм (8×250 мм), в 30-минутном градиенте от 0 до 100% элюента С в элюенте D, где элюент С - ацетонитрил-вода (60:40), элюент D - ацетонитрил; расход элюента - 2 мл/мин; время удерживания рапамицина - 17,70 мин,

Выход меченного тритием [³Н]-рапамицина после хроматографии составил 15-20%, молярная радиоактивность - 4,6 Ки/ммоль.

Таким образом, получено новое высокомеченное тритием физиологически активное соединение.

Изобретения относится к новому меченному тритием аналогу физиологически активного соединения -[³H]-рапамицин формулы I

который находит применение в органической и биорганической химии и в медицине в качестве иммуносупрессора. Технический результат - получение аналога физиологически активного соединения.

Высокомеченный тритием [³H]-рапамицин формулы