СПОСОБ ОЦЕНКИ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ОРГАНИЗМА К ЛЕКАРСТВЕННЫМ ПРЕПАРАТАМ Российский патент 2004 года по МПК G01N33/15 G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к способам скрининга лекарственных препаратов, а именно подбора препарата и его оптимальной дозы для лечения конкретного больного.

В настоящее время традиционный подбор препарата для конкретного больного включает в себя клиническое обследование больного, сопоставление данных обследования с рекомендациями фармации, назначение препарата или группы препаратов и коррекцию назначения по результатам воздействия препарата на организм (Методы экспериментальной химиотерапии. Практическое руководство./Под ред. Першина Г.Н. М., 1971, с. 234).

Однако длительность и ненадежность подбора методологии лечения для конкретного больного, высокая роль субъективного подхода заставляет искать новые более объективные методы подбора препаратов и их дозировки для конкретного больного с конкретным заболеванием.

Известен метод скрининга лекарственных препаратов для конкретного пациента, включающий в себя помещение рук оператора над больным и тестируемыми веществами и тестирование оптимального препарата исходя из температурной реакции оператора (патент РФ №2007117,1992, кл. А 61 В 5/04).

Этот метод носит достаточно универсальный характер, однако для него также характерна определенная субъективность и недостаточная надежность результатов.

Известны методы скрининга лекарственных препаратов для лечения отдельных патологий - заболеваний ЦНС, вирусных, онкологических и иных заболеваний (пат. и авт. св. РФ №1806601, 1990, кл. А 61 В 5/0476; №1540804, 1987, кл. А 61 В 10/00; №2000739, 1991, кл. А 61 В 5/02; №2046341, 1994, кл. G 01 N 33/48). В основе методов лежит введение тестируемых препаратов в организм или в контакт с препаратами тканей или жидкостей организма, выявление значимых характеристик, измерение параметров этих характеристик для каждого тестируемого препарата и выбор в качестве оптимального препарата средства, оказывающего максимальное воздействие на выбранные характеристики.

Однако эти методы не позволяют получить достаточно надежные результаты в случае необходимости проведения комплексной терапии, в частности при нормализации иммунной системы организма, и носят ограниченный характер.

Типичным примером такого метода является способ скрининга противовирусных препаратов для конкретного индивидуума, включающий в себя отбор пробы крови больного, выделение из нее взвеси лейкоцитов, культивирование их с исследуемыми препаратами, фиксацию формалином моноцитов, их прокрашивание, определение клеток с вирусными включениями и выбор в качестве целевого препарата из исследуемых средства, обеспечивающего наибольшее снижение определяемых параметров (авт. св. СССР №1266029, 1985, кл. А 61 В 10/00, G 01 N 33/15).

Недостатком способа является узкий спектр применения, длительность анализа (около 2 суток).

Наиболее близким к заявляемому является способ скрининга лекарственных препаратов для конкретного больного, заключающийся в культивировании пробы цельной гепаринизированной крови больного с водными растворами тестируемых препаратов в разных дозах, определения соотношения -SH- и -SS-групп в клеточной фракции крови больного после культивирования и выбор в качестве оптимального препарата или оптимальной дозы препарат, обеспечивающий указанное соотношение наиболее близким к 3,0. Культивирование крови проводят, как правило, в течение 1 ч при температуре, близкой к 37°С, причем введение тестируемого препарата в кровь осуществляют в дозе, соответствующей 1:5000 от терапевтической (пат. РФ №2150700, 1999, кл. G 01 N 33/15).

Определенным недостатком способа является ограниченность спектра используемых для скрининга препаратов, а именно применимость только для препаратов трансдермального введения.

Задачей, стоявшей перед авторами, являлось создание способа скрининга для конкретного больного препаратов, вводимых перорально, в частности препарата “Влаирин” или его аналогов, на основе полисахаридов, выделяемых из ткани растений рода Унгерния, находящего широкое применение для большого числа патологий (пат. РФ №2098114 (1995), 2147438 (1998), 2141838 (1997), 2156460 ((1997), все кл. А 61 К 31/71).

Необходимость проведения такого скрининга обусловлена тем, что при подавляющем количестве больных, на которых введение “Влаирина” воздействует позитивно в широчайшем диапазоне концентраций, имеется около 3% больных, на которых воздействие препарата в терапевтических дозах (2-10 капель экстракта, содержащего около 0,02% полисахарида на 10 кг веса) практически отсутствует, и около 0,2% больных, у которых прием “Влаирина” вызывает ухудшение заболевания, в результате чего препарат заменяют другим аналогичного действия.

Для решения указанной задачи были отобраны пробы крови 80 больных с различной реакцией на “Влаирин” и осуществлено их всестороннее обследование с целью выявления различий и исследования возможности создания метода, позволяющего прогнозировать эффективность использования препарата и определять возможные эффективные его дозы для конкретного больного.

Было найдено, что указанная задача решается путем использования оценки влияния препарата на адаптивные системы организма с использованием модифицированного авторами кристаллографического метода исследования жидких сред (Шаболин В.Н., Шатохина С.Н. Фундаментальные основы биологических ритмов // Вестник РАМН. - 2000. - №8. - С. 4-7; Шатохина С.Н, Шабалин В.Н. Диагностическое значение профильной дегидратации сыворотки крови: структурная форма информации // Лаборатория. - 1999. - №4. - С. 3-5).

Для оценки возможного действия “Влаирина” на конкретного больного предлагается культивировать нативную сыворотку крови больного с раствором препарата “Влаирин” в различных разведениях, затем дегидратировать пробы на предметном стекле до образования сфероидной пленки-фации и сопоставлять состояние структурных элементов фаций в пробах с контролем (без “Влаирина”) и с различными количествами препарата.

(В качестве структурных элементов учитывают радиальные и поперечные трещины, сектора, отдельности, конкреции (фиг.1). Наличие в фации вертикальных и горизонтальных складок белковой зоны, бляшек с мелкими морщинками, листовидных структур, трещин-“закруток” и т.п. образований свидетельствует о наличии патологического процесса в организме обследуемого (Шаболин В.Н., Шатохина С.Н. Фундаментальные основы биологических ритмов // Вест. РАМН. - 2000. - №8. - С. 4-7)).

Было найдено, что для больных, у которых применение “Влаирина” показывает высокую эффективность, характерно упорядочение структуры фаций за счет увеличения радиальных трещин (фиг.2) и приближение структуры к структуре “нормы” (фиг.1), причем наиболее эффективно использовать препарат в дозе, вызывающей максимально эффект упорядочения.

Для больных, у которых применение “Влаирина” показывает неэффективность, фации нативной сыворотки крови и ее смеси с препаратом имели сходную структуру (фиг.3).

Для больных, у которых применение “Влаирина” вызывает негативную реакцию, в структуре фаций смеси сыворотки крови и препарата происходят выраженные изменения основных показателей системной организации, а также появляются патологические образования (микроструктуры типа языков Арнольда), отсутствующие в структуре фаций нативной сыворотки (фиг.4), что является прогнозом на возможное обострение патологического процесса на фоне приема “Влаирина”, или наблюдается снижение уровня структурируемости (фиг.5). В этом случае прием “Влаирина” или вообще противопоказан, или показан в разведениях, приводящих к улучшению структур фаций.

Следует отметить, что в смесях сыворотки крови и “Влаирина” не было отмечено появления патологических образований (складки и бляшки белковой зоны), характеризующих процессы интоксикации и деструкции, что свидетельствует о об отсутствии токсичности данного препарата.

Методика анализа заключается в следующем. К 0,2 мл нативной сыворотки больного, помещенной в пробирку Флоринского, добавляли 0,01 мл исследуемого препарата в различных разведениях и инкубировали при комнатной температуре в течение по крайней мере 1 ч. Затем на поверхность предметного стекла в форме капель наносили 0,02 мл нативной сыворотки крови в качестве контроля и по 0,02 мл препаратов, полученных в ходе культивирования, образцы дегидратировали при 18-25°С в течение 24 ч, после чего производили их сравнительную микроскопию.

Исследование системной организации сыворотки крови осуществлялось на программно-аппаратном комплексе, включающем стереомикроскоп “Leica” (Германия), телевизионную камеру “Pixera” (США) и персональный компьютер Pentium-II.

При микроскопировании фаций сыворотки крови и ее смеси с "Влаирином" учитывались характер расположения трещин, их величина, конфигурация, размеры и количество основных структурных элементов.

Результаты сопоставления фаций больных с различной реакцией на “Влаирин” приведены на фиг.1-5.

Полученные результаты показали эффективность заявляемого способа для оценки перспективности для конкретного больного применения “Влаирина” при широком круге патологий, включающем инфекционные, онкологические, сердечно-сосудистые заболевания, последствия воздействия на организм ионизирующего излучения, стрессов и т.д.

Изобретение относится к медицине, точнее к способам скрининга лекарственных препаратов, а именно подбора препарата и его оптимальной дозы для лечения конкретного больного. Способ включает культивирование крови больного с тестируемым препаратом в различных разведениях к терапевтической дозе препарата в течение одного часа, анализ компонентов крови после культивирования и оценку воздействия препарата, при этом культивируют нативную сыворотку крови больного при комнатной температуре с использованием в качестве тестируемого препарата препарат, содержащий полисахариды из ткани растений рода Унгерния, образец после культивирования и образец нативной сыворотки помещают на предметное стекло, дегидратируют их до образования сфероидной пленки-фации, сопоставляют в образцах состояние структурных элементов фаций и оценивают препарат эффективным для больного при увеличении радиальных трещин в тестируемом образце по сравнению с контролем. В качестве препарата, содержащего полисахариды ткани растений рода Унгерния, вводят препарат “Влаирин”. Технический результат: способ эффективен для оценки перспективности для конкретного больного применения “Влаирина” при широком круге патологий. 1 з.п. ф-лы, 5 ил.

1. Способ оценки индивидуальной чувствительности организма к лекарственным препаратам путем культивирования крови больного с тестируемым препаратом в различных разведениях к терапевтической дозе препарата в течение одного часа, анализа компонентов крови после культивирования и оценки воздействия препарата, отличающийся тем, что культивируют нативную сыворотку крови больного при комнатной температуре с использованием в качестве тестируемого препарата препарат, содержащий полисахариды из ткани растений рода Унгерния, образец после культивирования и образец нативной сыворотки помещают на предметное стекло, дегидратируют их до образования сфероидной пленки-фации, сопоставляют в образцах состояние структурных элементов фаций и оценивают препарат эффективным для больного при увеличении радиальных трещин в тестируемом образце по сравнению с контролем.2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве препарата, содержащего полисахариды ткани растений рода Унгерния, вводят препарат “Влаирин”.