СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ, ОСЛОЖНЕННЫХ ДИСБАКТЕРИОЗОМ "БИОБАЛАНС-К" Российский патент 2007 года по МПК C12N1/20 A61K35/74 C12R1/225 

Предлагаемое изобретение относится к области биотехнологии, а именно к биологически активным комплексам, препаратам для медицины, сельского хозяйства и пищевой промышленности, и может быть использовано для приготовления лечебно-профилактических препаратов на основе живых лакто- и бифидобактерий.

Широко известны средства, направленные на восстановление нормального биоценоза кишечника, в частности пробиотики - бактерийные препараты из живых микроорганизмов - представителей облигатной микрофлоры кишечника - это колибактерин, лактобактерин, бифидумбактерин, бификол и т.п. сухие препараты [1].

Известно также средство для лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом, включающее компоненты, мас.%:

закваска молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophillus и Lactobacillus casei1-5пектин и/или бифидобактерин0,6-10вкусовые добавки (экстракты лекарственных растений, сахарные, фруктовые или овощные сиропы, соки и эссенции0,5-10молочная сыворотка и продукты ее ферментацииостальное [2]

Наиболее близким к предложенному средству является комплексный пробиотик "Цитродофилус" для коррекции микробной экологии пищеварительного тракта, содержащий ацидофильные бактерии, бифидобактерии с титром 10⁹ КОЕ/капсулу и топинамбур [3].

В задачу наших исследований входило создание высокоэффективного средства для профилактики и лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом, содержащего комплекс натуральных биологически активных биологических продуктов, обладающих наряду с противоинфекционным - антидисбактериозным действием, способностью к быстрой нормализации деятельности желудочно-кишечного тракта и повышением неспецифической резистентности организма.

Данная задача была достигнута тем, что средство для лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом, содержит при следующем соотношении компоненты, мас.%:

чистая культура Lactobacillus acidophillus 100 , лиофилизированная в среде культивирования с добавлением среды сахарозо-желатино-молочной среды, 10¹⁰ КОЕ/г5-7чистая культура Bifidobacterium bifidum штамм №1, лиофилизированная в среде культивирования с добавлением сахарозо-желатино-молочной среды, 10¹⁰ КОЕ/г5-7чистая культура Lactobacillus rhamnosus ВКПМ В-9072, лиофилизированная в среде культивирования с добавлением сахарозо-желатино-молочной среды, 10¹⁰ КОЕ/г5-7топинамбуростальное

Данный штамм размножается на всех питательных средах, используемых для культивирования пробиотиков, в основе которых содержится гидролизат обрата молока и казеина. Выращивание культуры проводят в ферментерах. Контролируют все параметры процесса. Культивирование проводят в несколько этапов, по схеме → пробирка → колба → бутыль → ферментер, при соблюдении правил асептики. Каждый этап подвергается контролю на микробиологическую чистоту. Жидкий препарат после контроля разливают в стерильные флаконы, укупоривают, этикируют, маркируют. Для получения капсул и таблеток жидкий препарат помещают в сахарозо-желатиновую среду и подвергают сублимации, при параметрах Т°С -40 - +25°C в течение 48 часов. Сухой препарат подвергается контролю на микробиологическую чистоту. Сухая биомасса смешивается с наполнителями и фасуется в таблетки и капсулы. Готовый продукт контролируется по всем необходимым параметрам.

Предлагаемое средство, названное нами «БИОБАЛАНС - К», представляет собой смесь из микробной массы живых, антагонистически активных Lactobacillus acidophillus штамм №100 АШ, Lactobacillus rhamnosus штамм СТ-2-05, ВКПМ В-9072, Bifidobacterium bifidum, штамм №1, лиофилизированных в среде культивирования с добавлением сахарозо-желатино-молочной среды (СЖМ), а также с добавлением топинамбура, помещенных в капсулы или сформованных в таблетки.

Исследование различных композиций показало, что наиболее выраженный эффект достигается при использовании следующего состава ингредиентов (мас.%). Форма выпуска 2 вида: 1 - таблетки, 2 - капсулы.

Для производства таблеток используют следующие компоненты, мас.%:

чистая культура Lactobacillus acidophillus штамм №100 АШ, лиофилизированная в среде культивирования с добавлением среды СЖМ, 10¹⁰КОЕ/ г6чистая культура Bifidobacterium bifidum штамм №1, лиофилизированная в среде культивирования с добавлением среды СЖМ, 10¹⁰ КОЕ/г6чистая культура живых Lactobacillus rhamnosus штамм СТ-2-05, лиофилизированная в среде культивирования с добавлением среды СЖМ, 10¹⁰ КОЕ/г6топинамбур ГОСТ 9164-002-11866470-94остальное

Для производства капсул используют следующие компоненты: мас. (%):

чистая культура Lactobacillus acidophillus 100 АШ, лиофилизированная в среде культивирования с добавлением среды сахарозо-желатино- молочной среды, 10¹⁰ КОЕ/г.6чистая культура Bifidobacterium bifidum штамм №1, лиофилизированная в среде культивирования с добавлением среды сахарозо-желатино- молочной среды,10¹⁰ КОЕ/г.6чистая культура Lactobacillus rhamnosus ВКПМ В-9072, лиофилизированная в среде культивирования с добавлением среды сахарозо-желатино- молочной среды, 10¹⁰ КОЕ/г.6топинамбуростальное

Штамм СТ-2-05 Lactobacillus rhamnosus депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИ Генетика под № ВКПМ В-9072.

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ:

- Палочки (0,3-0,5)×(1,5-2) мкм, располагаются короткими цепочками или хаотично.

- Неподвижные споры, капсул не образуют.

- Окраска по Грамму - положительная.

- Отношение к кислороду - микроаэрофил.

- Отношение к рН: пределы (3-7,4), оптимум (5,05±0,5).

- Отношение к температуре: термофил, пределы (15-45)°С.

- Антигенные свойства: Групповой антиген - С.

СПОСОБНОСТЬ К СБРАЖИВАНИЮ УГЛЕВОДОВ:

- Образует при сбраживании L+ молочную кислоту.

- Не образует газа из глюкозы.

- Сбраживает галактозу, лактозу, мальтозу, манит, сахарозу, сорбит, фруктозу, глюкозу, рамнозу.

- Не сбраживает арабинозу, рацинозу, мелибиозу, ксилозу.

- Активность кислотообразования - не менее 120°Т.

УСТОЙЧИВОСТЬ К АНТИБИОТИКАМ.

- Устойчив к олеандомицину, полимиксину, ристомицину, стрептомицину.

- Слабо чувствителен - к канамицину, неомицину, фузидину.

- Предельные ингибирующие концентрации мкг/мл: гентамицин - 600, левомицетин - 500, мономицин - 600, стрептомицин - 700, полимиксин - 10000, канамицин - 1000, тетрациклин - 450.

- Антагонизм: зона подавления роста (мм)

Sh. Sonnei 5063-19, Sh. Flexneri 170-21, Sh. Flexneri 377, Coli 157-13, St. aureus 209-11, Pr. Vulgaris 177-20, Pr. mirabilis 3177-12.

Рекомендуемая среда и условия культивирования: на основе гидролизата обрата молока (ГОМ) с добавлением автолизата дрожжей, солей и глюкозы. Рекомендуемый метод хранения - лиофилизированная культура, температура не выше 4°С.

КУЛЬТУРАЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА:

Продукт, синтезируемый штаммом - L+ молочная кислота.

- Продуктивность штамма - 2,75% в колбах.

- Способность определения активности штамма с указанием метода - титрование, среда МРС-5.

- Способ, условия и состав сред для размножения штамма - среда Блаурока или МРС-5, полужидкая.

- Оптимальные условия и состав среды для ферментации - питательная среда на основе гидролизата обрата молока (ГОМ) с добавлением ростовых добавок экстракта дрожжей, глюкозы и солей.

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ШТАММА:

- Мутации, делеции, инверсии - нет. Плазмиды - нет.

- Профаги - нет.

Прочие генетические особенности - нет.

- Штамм не является зоопатогенным, фитопатогенным, не представляет опасности.

Микроскопические показатели предложенного средства должны соответствовать требованиям Сан ПиН 2.3.2.1078-01 (индекс 1.10.10.1), отражены в таблице.

Предложенное средство позволяет нормализовать ферментативное расщепление пищи, тем самым нормализовать функции желудочно-кишечного тракта. Бифидо- и лактобактерии, входящие в состав средства, синтезируют эндогенные витамины, участвуют в модуляции иммунитета, осуществляют санитарную очистку кишечника, подавляют рост и размножение патогенных микроорганизмов.

Лактобактерии рамнозус стимулируют колонизационную резистентность пищеварительного тракта, длительно колонизируют слизистые кишечника человека. Позитивное действие заключается в лечебно-профилактическом эффекте при острых диареях различного происхождения, вызванных бактериальными и вирусными агентами; дисбактериозах, вызванных применением антибиотиков и другими факторами. Позитивный эффект выявляется при гиперхолестеринемии, аллергиях, новообразованиях и при иммунодефицитных состояниях. Включение топинамбура, содержащего набор микроэлементов, витаминов и инулин, который является пребиотическим средством, способствующим восстановлению собственной нормофлоры - бифидобактерий, позитивно влияет на поджелудочную железу, ее функциональную активность, снижает уровень глюкозы в крови, положительно воздействует на гипоталамические структуры, уменьшает в толстой кишке содержание канцерогенов и гнилостных субстанций.

Предложенное средство апробировано с положительным результатом в Московском НИИ педиатрии и детской хирургии в январе-марте 2005 г.

Задачей испытаний являлась оценка клинической эффективности БАД, названной нами «Биобаланс - К», при коррекции дисбиоза кишечника у больных с разной патологией ЖКТ.

В группу наблюдения вошли 25 пациентов (14 мальчиков и 11 девочек) от 2-х до 17 лет, с разной гастроэнтерологической патологией, осложненной дисбактериозом кишечника.

Обследование включало клиническую оценку статуса, лабораторные и другие методы исследования. Больные основной группы - 10 человек (6 мальчиков и 4 девочки) получали «Биобаланс - К».

В контрольную группу были включены 15 детей (9 мальчиков и 6 девочек) от 3-х до 17 лет, с различной патологией ЖКТ и дисбактериозом. Пациенты этой группы получали одно из известных пробиотических средств (флорадофилюс, линекс, пробифор).

Лечение обеих групп проводилось 14 дней, дети получали возрастные дозировки. Контрольные исследования проводились через 1 и 2 месяца после окончания лечения.

Результаты клинических испытаний показали, что «Биобаланс - К» обладает выраженным пробиотическим действием. Клинический эффект от приема «Биобаланса - К» в большинстве случаев является более выраженным и стойким.

Предложенное средство найдет применение в медицине как биологически активный комплекс, содержащий нормофлору человека для лечения больных с дисбактериозом, как БАД в качестве профилактического средства, входящего неотъемлемой частью в состав функционального питания здорового человека.

Просим предложенное средство назвать «Биобаланс - К» согласно утвержденной документации.

Источники информации

1. Кн. В.А.Княжева «Дисбактериоз. Теория и практика», Нижний Новгород, 1999, с.70-73.

2. Патент РФ №2076716, кл. А61К 35/20, 35/66, 1997.

3. ШЕНДЕРОВ Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Пробиотики и функциональное питание, т.111. M.: Грантъ, 2001, с.207.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к биологически активным комплексам, препаратам для медицины, сельского хозяйства и пищевой промышленности, и может быть использовано для приготовления лечебно-профилактических препаратов на основе живых лакто- и бифидобактерий. Средство содержит чистую культуру Lactobacillus acidophilus №100 АШ, чистую культуру Bifidobacterium bifidum штамм №1, чистую культуру Lactobacillus rhamnosus ВКПМ В-9072 и топинамбур в соответствующих количествах. Каждая из культур лиофилизирована в среде культивирования с добавлением сахарозо-желатино-молочной среды. Средство апробировано с положительным результатом в Московском НИИ педиатрии и детской хирургии в 2005 г. 1 табл.

Средство для лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом, характеризующееся тем, что оно содержит при следующем соотношении компонентов, мас.%:

чистую культуру Lactobacillus acidophillus 100 АШ, лиофилизированную в среде культивирования с добавлением сахарозо-желатино-молочной среды, 10¹⁰ КОЕ/г5-7чистую культуру Bifidobacterium bifidum штамм №1, лиофилизированную в среде культивирования с добавлением сахарозо-желатино-молочной среды, 10¹⁰ КОЕ/г5-7чистую культуру Lactobacillus rhamnosus ВКПМ В-9072, лиофилизированную в среде культивирования с добавлением сахарозо- - желатино-молочной среды, 10¹⁰ КОЕ/г5-7топинамбуростальное