Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению цитокинов класса II, и может быть использовано в медицине. Полученные белки zcyto20, zcyto21, zcyto22, zcyto24 и zcyto25 являются наиболее близкородственными с интерфероном-α на уровне аминокислотной последовательности. Рецептор для этого семейства белков служит рецептор цитокинов класса II. Белки могут быть получены рекомбинантным путем с использованием клетки-хозяина, трансформированной экспрессирующим вектором, который содержит соответствующие белкам нуклеиновые кислоты. На основе белков zcyto20, zcyto21, zcyto22, zcyto24 и zcyto25 получают антивирусную фармацевтическую композицию и специфические антитела. Изобретение позволяет получить новый цитокин, который стимулирует клетки гемопоэтической линии дифференцировки и обладает выраженной антивирусной активностью. 19 н. и 5 з.п. ф-лы, 21 табл.
1. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, который имеет по меньшей мере 80% идентичность относительно полипептида, выбранного из группы, состоящей из
a) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205;
b) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205;
c) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:9 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202; и
d) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:11 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202, причем каждый из четырех указанных полипептидов связывается с рецептором цитокинов класса II, zcytor 19,
и кодируется полинуклеотидом, который остается гибридизованным после строгих условий промывки с полинуклеотидом, состоящим из нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:1 для полипептида по п.а) или SEQ ID NO:6 для полипептида по п.b), или комплементом нуклеотидной последовательности указанных нуклеотидов.
2. Выделенный полипептид по п.1, где указанный полипептид специфически связывает рецептор, показанный в SEQ ID NO:24, 27 или 29 в виде мономерного или гомодимерного рецептора.3. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, который имеет по меньшей мере 95% идентичность относительно полипептида, выбранного из группы, состоящей изa) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205;
b) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205;
c) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:9 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202; и
d) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:11 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202,
причем каждый из четырех указанных полипептидов связывается с рецептором цитокинов класса II, zcytor 19.
4. Выделенный полипептид по п.3, где указанный полипептид специфически связывает рецептор, показанный в SEQ ID NO:24, 27 или 29 в виде мономерного или гомодимерного рецептора.5. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, имеющий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205.6. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, имеющий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка. 205.7. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, имеющий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:9 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202.8. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, имеющий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 11 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202.9. Фармацевтическая композиция, обладающая антивирусной активностью, которая содержит эффективное количество полипептида с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205, в фармацевтически приемлемом носителе.10. Фармацевтическая композиция, обладающая антивирусной активностью, которая содержит эффективное количество полипептида с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205, в фармацевтически приемлемом носителе.11. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, обладающий антивирусной активностью, где эта молекула нуклеиновой кислоты выбрана из группы, состоящей изa) полинуклеотида, имеющего нуклеотидную последовательность SEQ ID NO:3,
b) полинуклеотида, который остается гибридизованным после строгих условий промывки с полинуклеотидом, состоящим из нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:1, или комплементом нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:1.
12. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.6, обладающий антивирусной активностью, представляющий собой полинуклеотид, который остается гибридизованным после строгих условий промывки с полинуклеотидом, состоящим из нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:6, или комплементом нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:6.13. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, обладающий антивирусной активностью, характеризующийся нуклеотидной последовательностью, соответствующей аминокислотной последовательности полипептида, выбранного из группы, состоящей изa) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205;
b) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205;
c) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:9 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202; и
d) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:11 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202.
14. Выделенный полинуклеотид по п.13, где любое различие между аминокислотной последовательностью, кодируемой этой молекулой нуклеиновой кислоты, и соответствующей аминокислотной последовательностью обусловлено консервативной заменой аминокислоты.15. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.5, обладающий антивирусной активностью, имеющий нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:1 от нуклеотида 64 до нуклеотида 618.16. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.6, обладающий антивирусной активностью, имеющий нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:6 от нуклеотида 64 до нуклеотида 618.17. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.7, обладающий антивирусной активностью, имеющий нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:8 от нуклеотида 67 до нуклеотида 606.18. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.8, обладающий антивирусной активностью, имеющий нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:10 от нуклеотида 67 до нуклеотида 606.19. Экспрессирующий вектор, имеющий выделенную молекулу нуклеиновой кислоты по п.15, или 16, или 17, или 18, промотор транскрипции и терминатор транскрипции, где промотор функционально связан с этой молекулой нуклеиновой кислоты и где эта молекула нуклеиновой кислоты функционально связана с терминатором транскрипции.20. Рекомбинантная клетка-хозяин для экспрессии полипептида по пп.5-7 или 8, обладающего антивирусной активностью, содержащая экспрессирующий вектор по п.19, где эта клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из бактерии, клетки дрожжей, клетки гриба, клетки насекомого, клетки млекопитающего и клетки растения.21. Способ получения полипептида с антивирусной активностью по пп.5-7 или 8, предусматривающий стадию культивирования рекомбинантных клеток-хозяев, содержащих экспрессирующий вектор по п.19 и продуцирующих этот полипептид, и выделения этого полипептида из культивируемых клеток-хозяев.22. Антитело, которое специфически связывается с полипептидом с антивирусной активностью, полученное с помощью полипептида по п.1, или его F(ab)2, Fab или его одноцепочечный фрагмент, сохраняющий специфическую функцию антитела.23. Антитело по п.22, в котором антитело выбирается из группы поликлонального антитела, моноклонального антитела, сходного с антителом человека, антитела, полученного из моноклонального антитела мыши, нейтрализующего антитела, и моноклонального антитела человека.24. Фрагмент антитела по п.22, в котором фрагмент антитела выбирается из группы F(ab)2, Fab и антитела с одной цепью.Приоритет по пунктам и признакам:
20.04.2001 по пп.1, 3, 5, 9, 11, 13-15, 19-24 (в части SEQ ID NO:1 и 2).25.04.2001 по пп.1, 3, 6, 10, 12-14, 16, 19-24 (в части SEQ ID NO:7 и 6).22.10.2001 по пп.1, 3, 7, 8, 13, 14, 17-24 (в части SEQ ID NO:8, 9, 10 и 11).19.04.2002 по пп.2 и 4.
