РАВНОМЕРНО МЕЧЕННЫЕ ТРИТИЕМ ТРИТЕРПЕНОВЫЕ ГЛИКОЗИДЫ ГОЛОТУРИЙ CUCUMARIA Российский патент 2009 года по МПК C07J71/00 C07J73/00 C07B59/00 

Изобретение относится к области органической химии и может найти применение в аналитической химии, биоорганической химии, биохимии и прикладной медицине.

При изучении физиологически активных соединений могут быть необходимы их меченые аналоги.

Известны тритерпеновые гликозиды голотурий Cucumaria формулы:

Данные тритерпеновые гликозиды обладают ярко выраженным иммуномодуляторным действием (Sedov A.M.; Apollonin, A.V.; Sevastyanova E.К. Stimulation of mice non specific antibacterial resistance to conditionally pathogenic gram-negative microorganisms. Antibiot. Khimioter. 1990, 35 (1), 23-26) [I].

Однако эти меченные тритием тритерпеновые гликозиды не описаны.

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является расширение ассортимента меченых аналогов физиологически активных соединений.

Достигается указанный технический результат получением высокомеченных тритием тритерпеновых гликозидов формулы:

Известно, что замена атомов соединений на их меченые аналоги не приводит к изменению каких-либо свойств исходного соединения (Evans Е.А. - Tritium and its compounds London Butterworths, 1974, p.48).

Ниже приведены примеры реализации изобретения.

Пример 1

В ампулу помещали 70 мг 5% Pd/C и добавляли к нему раствор 10 мг ненасыщенного тритерпенового гликозида в 0.1 мл диметилсульфоксида. Содержимое ампулы замораживали жидким азотом, вакуумировали до давления 0.1 Па, заполняли газообразным тритием до давления 400 гПа и выдерживали при температуре 25°С в течение 6 ч. Затем содержимое ампулы вновь замораживали жидким азотом и вакуумировали до давления 0.1 Па для удаления газообразного трития. В ампулу добавили 4 мл воды и содержимое ампулы перемешивали на магнитной мешалке 10 мин. Водный раствор фильтровали, вещество с катализатора экстрагировали метанолом (5×2 мл). Фильтраты объединяли и упаривали на роторном испарителе. После выделения ненасыщенного тритерпенового гликозида методом ВЭЖХ (колонка Kromasil 100С18, 7 мкм, 10×8 мм, система: смесь метанола с 5 мМ Н₃PO₄ 3:1, скорость потока элюента - 2 мл/мин, время удерживания - 3.70 мин) выход меченого препарата - 26%, молярная радиоактивность - 22 Ки/ммоль, радиохимическая чистота 96-98%.

Пример 2

В ампулу помещали 1 мг меченого тритием ненасыщенного тритерпенового гликозида (22 Ки/ммоль), 40 мг 5% Pd/C и 2 мл воды. Содержимое ампулы замораживали жидким азотом, вакуумировали до давления 0.1 Па, заполняли газообразным тритием до давления 400 гПа, нагревали до 25°С и перемешивали на магнитной мешалке в течение 15 ч. Затем содержимое ампулы вновь замораживали жидким азотом и вакуумировали до давления 0.1 Па для удаления газообразного трития. Водный раствор фильтровали, вещество с катализатора экстрагировали метанолом (5×2 мл). Фильтраты объединяли и упаривали на роторном испарителе. Насыщенный тритерпеновый гликозид выделяли методом ВЭЖХ, как описано в примере 1 (время удерживания - 5.23 мин).

Выход меченого насыщенного тритерпенового гликозида достигал 12%, молярная радиоактивность - 71 Ки/ммоль. После первой очистки выделено 6.5 мКи меченого препарата с радиохимической чистотой 93-95%, после второй очистки получено 4.5 мКи насыщенного тритерпенового гликозида с радиохимической чистотой 96-98%.

Таким образом получены новые высокомеченные тритием физиологически активные соединения.

Изобретение относится к получению новых меченых аналогов физиологически активных соединений - тритерпеновых гликозидов голотурий Cucumaria формулы:

Высокомеченные тритием тритерпеновые гликозиды голотурий Cucumaria формулы